153906. lajstromszámú szabadalom • Eljárás acil-amino-vegyületek előállítására
153906 13 14 Vékonyréteg-kromaitoigram. szilikagélen (a 4. példában megadott rendszerek): R/-értéfcék 1. rendszer 2. rendszer Kiindulási anyag (I) 0,30 0,59 Termék (II) 0,47 0,65 9. példa 27,2 g {0,1 mól) 7-amino-oefalosparánsavat felveszünk 250 ml abszolút metilén-klorid és 71,5 ml {0,3 mól) triibutilamin elegyébe, és 0—10 C° közötti hőmérsékleten 1/2 óra alatt hozzáadjuk 14,7 g {0,125 mól) alfa-cián-propionil-klorid 100 ml metilén-kloriddal készített oldatát. Hozzáadás után 1/2; órán át 0 C°-on és 1 órán át 20 C°-on keverjük- az elegyet, majd 0,1 torr nyomáson bepároljuk. A maradékot 10%-os vizes dikálium-ihidrogén-foszfát-oldiatban felvesszük és ecetészíterrel kimossuk. A vizes fázist pH=2,0-n ecetészterrel extraháljuk. A nyert maradékot szilikagélen kromatografáljuk, és a termékeit kloroform és aceton 8:2: arányú elegyével eluáljuk. Aceton és éter elegyéből végzett átkristályosítás útján tiszta 7-i(alfa-cián-propionil-amino)-eéfalosporánsavat kapunk, 160—<164 C° olvadásponttal (bomlás). Ultraibolya abszorpciós spektrum 0,1 n nátriumHhidrógén-karbonát-oldatban: lambdama x = = 260 millimikron (epszilon = 9300). 10. példa 38,4 g (102,,:5 millimól) 7-cián-aeetü-aminocefalosporánsavat a 2. példában ismertetett módon nátriumsóvá alakítunk, és Bacillus subtilis ATCC 66:33 17,4 g sejt-nofüizátumával dezacev tilezzük. A kapott vizes szuszpenziót, melynek térfogata kb. 860 ml, 800 ml metilén-kloriddal elegyítjük, jód átkeverjük, és a keletkező emulziót centrifugáMssal elkülönítjük. A metilénkloridos fázist és a sejtpogácsát elöntjük, ill. kidobjuk, A vizes oldatot, amely nátrium-acetát és a felhasznált sejt-liofilizátum vízoldható komponensei mellett a dezacetil-7-cián-acetilamino-ceíalospoiránsav nátriumsóját tartalmazza^ vákuumban 250 ml-re besűrítjük. 2,05 liter Dowex 50—WX 8 ioncserélőt (H+ -forma) tartalmazó oszlopot 7,7 liter trietííl-ammónium-acetát 5,7 pH-jü {ecetsavra vonatkoztatva 0,5 mólos) puffer-oldatával perkoláltatva trietil-ammónium-forrnába visszük, és 3 liter vízzel utánmossuk. A fenti 250 ml koncentrífcumot lassan átfdlyatjuk az oszlopon, majd vízzel utánmossuk. Az első két liter eluátum tartalmazza a dezaCetil-7-cián-aoetil-amino-cefalo!3poránsav higroszkópos tdetól-ammónium-sóját. Liofilizálás után 49 g maradékot kapunk. Az ultraibolya reszorpcios spektrum vízben 262 millimikronnál mutat maximumot (epszilon = 5950). 11. példa 62,6 g (0,73 mól) cián-eoetsav és 185 ml (0,76 mól) tributil-amin 600 ml abszolút metilén-kloriddal készített oldatát —10 C-on keverés közben elegyítjük: 865 ml metilén-kloridos 10%-os pivalil-ldorid-oldattal {0,72 mól), A reakciót fél órán át hidegen hagyjuk lejátszódni. Ezután a reakcióelegyet lassan hozzákeverjük 150 g (0,55 mól) 7-amino-cefialosporánsav és 303 ml (1,6 mól) tributil-amin 2 liter metilén-kloriddal készített jéghideg oldatához, 0 C°-on fél órán iát végzett keverés után a rendszert vákuumban bepároljuk, és az 1. példában leírthoz: hasonló módon dolgozzuk fel. Hyen módon 163,0 g nyers 7-cián-,aoetil-aminowcefalosporánsavat kapunk. 12. példa 15 g 7-ciánHacetü-amino^cefalosporlánsavat (1) és 3 g vízmentes ammónium-aoetátot oldunk 300 ml aceton és 200 ml dimetifl-formamid elegyében, majd 16 órán át 24 C°-on állni hagyjuk. Vákuumban bepároljuk, a maradékot felvesszük 10%^os dikálium-^hidrogén-foszfát-oldatban, és ecetészterrel mossuk. A vizes fázist 2-es pH értéken ecetészterrel hidegen extraháljuk, az extraktumot szárítjuk és bepároljuk. A 15,4 g nyers terméket kromatografálássaíl harmincszoros mennyiségű szilikagélen megtisztítjuk. Klo1 roform és aceton 98:2: arányú elegyével eluálunk, és így tiszta 7-4(aIfa-cián-béta-dimetiJ-akril-aimino)-^oefalosporánsavat {II) kapunk. Vékonyréteg-kromatogram szilikagélen (a 4 példában megadott rendszerek): R/-értékek 1. rendszer 2. rendszer Kiindulási anyag (I) 0,24 0,5© Termék (II) 0,33 0,61 13. példa 100 mg 7~cián-aceti]~a.mino-cefalospO!ránsavat és 20 mg száraz ammónium-aoetátot oldunk 2 ml olyan élegyiben, amely egy térfogatrész dimetil-formamid és egy téirfogatrész 2-oktanon elegyítésévell készült, majd a kapott elegyet 22 C°-on 16 órán át rezgetjük. 10%-os vizes dikáliurnnhidrogén-foszfát-oldatban felvesszük, ecetészterrel mossuk, a plH-t 2,0-ra állítjuk, és a vizes oldatot ecetészterrel extraháljuk. Az ecetészteres extraktumot nátrium-szulfát fölött szárítjuk, majd bepároljuk. A maradék 7-{okti'lidén-i(:2)-cián-iacetil-amino)-oefalosporansavfoól áll. A vegyület az 1. rendszerben (v. ö. a 4. példával) 0,58-as R/-értéket mutat. Ugyanebben a i'endszerben a 7-eián-acetil-amino-oefalospoiránsav R/-értéke 0,2i8. 14. példa Mindenben a 13. példa szerinti módon járunk el, azonban 2-oktanon helyett 3-heptanont használunk. Így 7-[heptilidén~(3)-cián->acetíl-amino]oefalosporánsavat kapunk, melynek R/-értéke az 1. rendszerben (lásd a 4. példát) 0,56. 10 15 20 25 £0 25 40 45 50 55 60 7
