153375. lajstromszámú szabadalom • Eljárás acilezett tetrapeptid-származékok előállítására
153375 19 20 ' trifluocaeetátnak és 2,64 rész N-pivaloil-^-alarnin-2,4,5-triMórfenüészternek 30 rész dilmetilfonmamiddal készített oldatához. A kapott oldatot 2 napon keresztül 20—22 C°-on állni hagyjuk, majd 500 rész jeges vizet, 0,74 rész: tömény sósavat (fs.: 1,18) és 300 rész ciklohexánt tartalmazó elegyhez; öntjük. A kapott reafccióelegyet megszűrjük, a szilárd maradékot vízzel, majd éterrel mossuk, és vizes etanolból kristályosítjuk. Az így nyert iN-pivaloál-/í-ailan:il-L-triptofianil-L-imetionál-L-íaszparagil-LHfenilalaninamid olvadáspontjai: 218—220 C°. A fentiekben említett N-pivaloil-/?Halanin-2,-i 4,:5-tr:iklárfenilészter a következőképpen (állítható elő: 1,03 rész N,JNF~ditikloíhexilkarbodiimidet adunk 0—10 C°-on 0,866 rész N-pivalo-il-^-alaninnak és 1,04 rész 2,4,5'-trifclór,fenolnak 20 rész aeetonnal készített kevert oldatához. Az ele^ gyet 18 órán keresztül 0—2 C°-on keverjük, majd szűrjük. A szürletet csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot diizopropiléíerből kristályosítjuk. A nyert N-pivaloil~#-alanin-2,4,5--triklórfenilészter olvadáspontja: 70—72 C°. Az előbbi N-pivaloiil-^alanint úgy készíthetjük, hogy 1,23 rész pivaloilkloridot 0^-4 C°-on 15 perc alatt 3,51 rész ^-alaninbenzilészter-p^-toluolszulforaátnak és 2,02 rész trietilaiminnak 20 rész kloroformmal készített kevert oldatához adagolunk. Az elegyet 2 órán keresztül 20=—22 C°-on keverjük, inalj d 10 rész vizet adunk hozrzá. A szerves fázist elválasztjuk ós egymás után 10 rész In nátriumhidrogénkarbonáttal, 10 rész vízzel, 10 rész 0,5n sósavval és 10 rész vízzel mossuk:. Vízmentés magnéziumszulfáttal szárítjuk és bepároljuk. A visszamaradó olajszerű terméket 15 rész 90%-os eoetsav vizes oldatában feloldjuk és az oldatot szoibahőmórséklteten 0,5 rész 5%-os palládiumaktívszén katalizátorral 4 órán keresztül hidrogénezzük. Az elegyet azután mégszűrjük és a szürletet bepároljuk. A kapott maradékot benzollal végzett azeotropos desztiilációval szárítjuk és etilacetátból kristályosítjuk. A kapott N-pivaloil-A-alanin olvadáspontja: 131,5—132,5 C°. 36. példa: 7,11 rész L-triptofanil-L-metionil-L-aszparagil-L^femlalaninamidtriifluaraoetát, 2,8 rész t-butiloxiikarbonilazid, 3,013 rész trietilamin és 80 rész piridin elegyét 4 napon keresztül 23—25 C°-on kéveírjük. Az elegyet 0,1 Hgm-m nyomáson bepároljuk és a maradékot ,100 rész jeges vízzel elkeverjük. Az elegyhez 10%-os citromsav oldatot adagolunk addig, amíg a pH 3-t elérjük. Az elegyet ezután megszűrjük, a szilárd maradékot vízzel alaposan kimossuk és vizes 2-etöxiietanolból kristályosítjuk. Az így kapott N-t-butiloxikairbonil-L-triiptofanil-L-metionil-L-aszparagil-L-fenilalaninaimid gázfejlődés közben 209:—210 C°-ón olvad. 37. példa: 0,409 rész N-t-but;ilotxika;rbonil-L-alíanil-L-tirozilglicinnek és 0,1 rész trietilaminnak 10 rész tetrialhidrofuránnal készített oldatát —20 C°-ra. hűtjük és 10 perc alatt —,10 C° és —20 C° között 0,123 rész pivaioilklaridnak 10 rész tetrahidrofuránnal készített oldatát adjuk hozzá. Az oldatot 20 percen keresztül keverjük, majd 0,71 rész L-triptofianil-'L^m'etionil-L-aszparagil-L-fenilalaninamidtrifluaraoetátnaik és 0,2 rés:z trietilaminnaik 8 rész dimetilformamiddal készített oldatát adagoljuk hozzá. A reakcióelegyet 20 órán keresztül 0 C°-on tartjuk, majd 50 rész víz, 1 rész In sósav és 0,12 ecetsav elegyét öntjük hozzá. A kivált szilárd terméket leszűrjük, vízzel, majd forró etanollal mossuk. A kapott N-t-ibutilocxiikairbonil-L-alanil-L-'tirozilgliicil-L-trip-' tofanil-L-imetionil-L-aszpairagil-L-fenilalaninamid bomlás közben 234 C°-om olvad.. A kiindulási anyagként alkalmazott N-t-butiloxikairbonil-L-alamil-L-tirozilglicint a következőképpen állíthatjuk elő: 5,5 rész iN-t-butiloxikairbonil-L-íalanil-L-itirozilglicinm'etilésztert 32 rész metanolban szuszpendálunfc és 26 rész In nátriumhidroxid oldatot adunk hozzá. A nyert elegyet 1 órán keresztül 0 C°-on keverjük, majd bepároljuk. A maradékot 40 rész vízben feloldjuk és az; oldatot 6,3 rész citromsawal megsavanyítjuk. A szilárd termákét szűréssel gyűjtjük össze. Az előállított N-t-butilbxikarbonil-L-alanil-L-'tiirozilglicin olvadáspontja: 195'—197 C°, színterelés után: 169—181 C°. Az N-t-butilo'xikarbanil-L-alanil-L-tirozilglicinmetilészter (olvadáspont: 179—180 C°) előállítása önmagában ismert módón történik. 38. példa: 1 rész N-t-butiloxika!rboinil-is -al;anil-L-'triiptofanil-L-imetionil-L-aszpar;agi'l-L-fen;ilalanin,aniidot és 2,6 rész In ammóniumíhidroxidot tartalmazó 10O0 rész desztillált vizet 3 órán keresztül 20—22 C°-on rázunk. A kapott oldatot 8,8 rész nátriumkloriddal hozzuk reakcióba, majd steril baktériummentes szűrőn átszűrve sterilizáljuk. Az így nyert iziotoniás, steril" injektálható N-t^butiloxikarbonil-^Talanil-L-triptofanil-L-mietio^ hil-L-íaszparagil-L-fienilalaninamid vizes oldata 1000 rész oldatban 1 nesz peptidszármiáizékot tartalmaz. Az oldat ultraibolya abszorpciós spektruma: Imin. 246,5 nui {s 2080), ^ inflexió 272— 275 mv. (e 5040) és I max. 280 m/i (« 5340) és 289 <m.lx {e 4590). 39. példa: 1 rész N-t-butiloxikarbonil-L-alanil-L-tiroz;ilgliicil-L-triptofanil-L-irnetionil-L-aszpairagil-Ljfenilalaninamidot 200 rész dimétilszulfoxdban feloldunk és 2 ekvivalens 0,ln ammóniumhidiroxid oldatot adunk hozzá. A kapott oldatot 1000 rész 0,9 súly%-Os nátriumklorid oldattal felhígítjuk, steril baktériumimentes szűrőn átszűrve sterilizáljuk. Izoitoniás, steril, injektálható ÍN-t-Jbutiloxikar'bonil-L-alanil-L-tirozilglkil-L-tiriptofanil-L-"m'etioniil-L-a:szpa'ragil-L-fenilalaniniamid vizes oldatát kapjuk. A fenti módszert megismételjük úgy, bogy 1 rész N-t-butiloxikarbönil-L-alanil-L-tirozilglicil-10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 10
