153375. lajstromszámú szabadalom • Eljárás acilezett tetrapeptid-származékok előállítására
13 153375 14 metilformamiddal készített oldatát 0 C°-ra hűtjük és 1,01 rész trietilaminnal hozzuk reakcióba. Ezután 3,43 rész N-t-ibutiloxikarbonil-L-alanil-'L-fenilalanil-L-iz'Oleucilglicin-2,4,5-triMórfenilésztert adunk hozzá és az elegyet 0—5 C°-on 2 napon keresztül keverjük, majd 50 rész vizet öntünk hozzá és a keverést 20—25 C°-on imiég egy napon át folytatjuk. Az elegyet ezután 50— 60 C°-ra melegítjük és szűrjük. A szilárd maradékot 100 rósz forró letilaoetáttal 15 percen keverjük, majd a forró elegyet megszűrjük. A szilárd maradékot 150 rész forró ecetsavban feloldjuk és 100 rész vizet adunk hozzá. A kivált kristályokat szűréssel összegyűjtjük, 50%-os ecetsav oldattal, majd -etilacetáttal mossuk és vákuumban 40—50 C°-on szárítjuk. Az így kapott N-t-butilopdikaribonil-L-,alanil-^L-fenilalánil-L-izioleuícilglidl-'Lr-triptofianil-Ljmetionil-L-tasz^ paragil-L-fenilalamnamid bomlás' mellett 248— 250 C°-on olvad. Vékony rétegű krtomatográfiával szilikagél adszotrtbenst és 10 rész n-butanol, 10 rész ecetsav és 50 rész vizét tartalmazó oldószer elegyet használva egy egyedül álló R/.- 0,79 értékű folt tartalmazza a vegyületet. Hasonlóan 75 rész izobutanolból és 25 rész 3'%HOS ammórdumMdroxidból készített oldószer-elegynél ez az egyedül álló folt az RF 0,46 érteiknél található. A kiindulási anyagként használt N-t-butiloxikarbonil-L-alanü-Lrifenilalanü-L-izoleucilglicin-2,4,5-triklórfenilésztert (260 C°, fölött bomlik) a savból. 2,4,5-triklórfienolból és N,N'-diiciklohexilfcarbodiimidből Pless és Boissonnas szerint állíthatjuk elő (Helv. Ohim. Acta., 1963, 46, 1609). 18. példa: 1,78 rész L-triptofanil-L-metionil-L-^aszparagil-L-fienilalianina'midtrifluora^oetátnak 15 rész dimetilf ormamiddal készített oldatát 0 Cl0 -ra hűtjük és 0,505 rész trietilamint adunk hozzá. Ezután 0,93 rész N-benziloxikarbonil-L-prolin-p-mtrofenilósztert adaigolunik hozzá és az elegyet 48 órán keresztül 0 C°-on majd 24 órán át 20— 22 C°-on keverjük. Ezután 70 rész jeges vizet adunk hozzá és az elegyet 20 rész etilacetáttal extraiháljuk, melyet vízzel mosunk. A vizes fázist és a vizes mosófolyadékot In sósavval pH 2-re savanyítjuk és megszűrjük. A szilárd maradékot etanolból kristályosítjuk. A nyert N-benziloxikarbonn-I^proM-L-triiptofanil-L-'metionalr-L-aszparagil-L-f enilalaninairnid -bomlás közben 238—240 C°-on olvad. 19. példa: 63,3 rész L-triptofanil-L^nxetionil-L-aszpiaraigil-I^fenilalaninamidhidroiklorildot 220 rész'In nátriumMdroxidot tartalmazó 1000 rósz vízihez adjuk. Az elegyet 20—22 C°-on 'keverjük, míg átlátszó oldatot nem kapunk, majd 10,5 rész p-'toluolszulfonilkloriidnak 200 rész aeetonnal készített oldatát 1 óra alatt adjuk hozzá, miközben a reakcióelegy pH-ját In nátriumhidroxid adagolással 10—11 értékfen tartjuk. A reakcióelegyet 20—22 C°~on még további 2 órán át (keverjük, mialatt In nátriumhiidroxiddal a pH 10—11 értéket, — amennyiben szükséges — visszaállítjuk. Az elegyet éterrel extraháljuk és a vizes 5 fázist In sósavval pH 2-re savanyítjuk, szűrjük, a szilárd terméket vízzel, majd etilacetáttal mossuk. Az így kapott N-jp-toluolszulíonil-L-triptafanH-L^mietionil-L-as^paragil-L-fenilalaninamiid ibomiás közben 233—234 C°-on olvad. 10 20. példa: 3,55 rész L-triptofanil-L-^m-etionil-L-.aszparagil-L-fenilalaninamidtrifluoraoetátnak 30 rész di-15 metilformamiddal készített oldatát 0 C°-ra hűtjük, majd 1,01 rész trietilamint, később 2,52 rész N-t-butiloxikarbonil-iS-benzil-L^homocisztein-2,4,5-triklórféniliésztert adunk hozzá és az elegyet 0-—5 C°-on 4 napon keresztül keverjük. Az 20 elegyet 120 rész jeges víz, 0,37 rész tömény sósav és 1,2 rész ecetsav elegyébez öntjük. A kapott reakeióelegyet 30 percen át 0—10 C°-on keverjük:, majd szűrjük:. A szilárd maradékot vízzel, majd éterrel mossuk és etanolból kristá-25 lyosítjuk. Az így nyert N-t-butiloxiikarbonil-S-benzil-L-homociszteinü-L-triptofanil-L-metiio^ nü-L-aszparaigil-L-fenilalaninaniid bomlás közben 215—216 C°-on olvad. A fenti ^eljárás során használt N-1>butiloxi-30 karbonil-S-benzil-L^homo'CÍsztein-2,4,5-triklórfenilésztert az alábbiak szerint készíthetünk: 2,06 rész N,N'-diciklohexilkarbodiimidet adagolunk 0—10 C°-on 3,25 rész N-t-butiloxifearbonil-S-ibenzil-L-homociszteinnék és 1,98 rész 2,4,5-S5 -triklórfenolniak 20 rész etilacetáttal készített oldatának elegyéhez. A reakeióelegyet 18 órán keresztiül 0 C-om keverjük, szűrjük. A szürletet csökkentett nyomáson bep áraljuk és a maradékot 'cikloihexánból kristályosítjuk. A kapott 40 N-t-butiloxikaorbonil-S-benzil-L-homocisztein-.2,4,5-triklórfenilészter olvadáspontja: 111—112 C°. 21. példa: 45 A 20. példa eljárását megismételjük úgy, hogy a 2,52 rész N^t-butiloxikaxbonil-S-benzil-L-'hoimotís:ztein-2,4,5-triklórfenilészter helyett 1,92 rész N-t-butiloxikartbonil-'N-:metil-lHalanin-2,4,5-50 -triklórfenilésztert [használunk. Az így kapott N-t-ibutiloxikarboniR-N-metil-L^alanil-L-triptofanü-I^mátionil^L-^szparagU-L-fenilalamnaniid1 bomlás Iközben 180—185 C°-on olvad. A N-t-butiloxiíkarbonil-N-métil-L-alanin-2,4,5-55 -tóklórfernlészter olajszerű terméket Pless és Boissonnas szerint állíthatjuk elő (Helv. Chim, Acta., 1963, 46, 1609). 22. példa: 60 A 20. példa eljárását megismételjük úgy, hogy 2,52 rész N-t-butiloxikarboml-S-benzil-L-homorisztein-2,4,5-triklórfenilészter helyett 3,09 rész Na-ibenziloxikairtbonil-NE-t-butiloxikaAonil-L-65 -•lizilglicin-2,4,5-triklórfenilésztert használunk. A
