153375. lajstromszámú szabadalom • Eljárás acilezett tetrapeptid-származékok előállítására
9 raginsaív: 1,00; glicin: 1,02; metionim: 0,87; fenilalanin: 1,00. 8. példa: 5 20 rész L-trip'tofanil-L^metionil-L-asZiparagil-L-fenilalaninamidtr if luoraicetátnak 1600 rész apetonnal készített oldatához 1250 rész vizát adunk. Az elegy pH-ját In nátriumhidroxidnak részletekben történő hozzáadásával 10,9 értékre 10 állítjuk be. Ezután 46,5 rész benziloxákarbonilkloridot adunk hozzá és a neakicióelegyet 1,5 órán keresztül 18—25 C°-on keverjük, miközben az elegy pH-ját atu'totlitrátorra1! In náMumihidroxid adagolással 10,9 értéken tartjuk. Az &zz- 15 tont ezután csökkentett nyomáson eltávolítjuk és a kapott elegyet megszűrjük. A maradékot' először vízzel mossuk, majd etilaoetáttal és 2n sósavval keverjük el. Az etilaoetátos réteget elválasztjuk, vízzel háromszor mossuk, vízmentes 20 magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. A szilárd maradékot éterben szuszpendáljuk és szűréssel összegyűjtjük. Az így nyert N-benziloixikiarbonil-L-triptoifanil-L-metionil^L-aszpairagil-L-fenilalianinamid fehér szilárd ter- 25 mék. Vékony rétegű kromatográfiával szilikagél adszorbenst és 57 rész n-butanolból, 6 rész ecetsavból és 25 rész vízből álló oldószert használva egy egyedül álló RF 0,93 értékű folt (Ehrlich reagenssel előhívva), tartalmazza a vegyületet. 30 9. példa: 240 rész L-tripitiofaml-L-m'etionil-L-aszpaíragil-L-fenilalaninamidtriifluoracetát 2400 rész dime- 35 tilformamidot tartalmazó oldatát 0 C°-ra hűtjük és 68,5 rész trietilamint adunk hozzá. Az: elegyet keverjük és 0 C°-on 123 rész N-t-butiloxikarbonilglicin-2,4,5-triklárfenil észtert adagom lünk hozzá. A reafccióelegyet ©0 órán keresztül 40 18—22 p°-on tartjuk. Ezután 60 000 rész etilatcetátot és 20 000 rész Zrí sósavat öntünk az elegyhez és 5 percen keresztül keverjük. Az etilaoetátos réteget elválasztjuk: és vízzel mossuk, vízmentes magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd 45 csökkentett nyomáson bepároljuk. A szilátrd maradékot 50100' nesz etilacetáttal elkeverjük és szűréssel összegyűjtjük. Az így kapott N-t-ibutiloxikarbonilglidl-L-tíriptofanil-L-metionil-L-aszparagil-L-feniialanmaimid színtelen amorf por. 50 (A C39iH4 7 0 9 N 7 S képletnél C: 57,3%; H: -6,3%; N: 13,0%. A talált értékek: C: 57,4%; H: 6,6%; N: 13,2%.) 10. példa: 55 100 rész N-t-biitiloixiikaribonilglicil-L-triipibofanil-l^metionil-Lras:zparagil-I>-feniilalaninaimiidoit keverés közben 15—20 C°-on 3000 rész: 75%HOS trifluoreicetsav vizes oldatához adagolunk. A ka- 60 patt oldatot 20 penoen keresztül 20—25 C°-on tártjaik. A trifluoneoetsav felesleget 37 C° alatt csökkentett nyomáson eltávolítjuk. A maradékot metanolban feloldjuk, majd a metanolt csökkentett nyomáson ismét 37 C° alatti hőmérsékleten @5 10 történő bepáriással eltávolítjuk. A maradékot újból feloldjuk metanolban és az oldószert hasonló körülmiények között elpárologtatTjuk. A terméket azután éterrel elkeverjük és szűréssel összegyűjtjük. Az így kapott glioil-L-triptofanil-L-metionil-L-aszpaiiagil-L-fenilalaninamid színtelen amorf szilárd anyag. 11. példa: ' - , 102 rész N -!beinziloxikarbonil-(y-t^butil)-L-glutam 0 - (y-t-butil) -L-glutaimil-L-.alanil-I^tir ozilglicint 10 000 rész dimetilformamiídiban felodunk és 0 C°-ra hűtünk. Ezután keverés közben 12,6 rész trietilamint, majd 33,5 rész difenilfoszforilkloridot adunk hozzá és a reakcióelegyet még 43 percen keresztül 0 C°-on keverjük, majd 87 rész L-t:riptofanil-L-metioinil-L-.aszípa:ragil-L-fenilalaninaimidtrifluonacetát 5000 rész dimetilfarmamiddal készített oldatát és- 25,2 rész trietilamint adunk hozzá és a reakció elegyet 18 órán keresztül 18—2i2 C°-on keverjük. Az oldószert bepáriással, csökkentett nyomáson eltárvolítjük és a maradékot etilacetáttal elkeverjük. Az elegyet szűrjük és a szilárd anyagot, mely bomlás közben 220 C°-on olvad, etilacetáttal mossuk és 40 C°-on csökkentett nyomáson szárítjuk. A kapott tenmékből 30 részt keverés közben 15— 20 C°-on 300 rész 95%-os trifluorecetsav vizes oldatához adunk. Az oldatot 1 órán keresztül 20—25 C°-on tartjuk, majd az oldószert csökkentett nyomáson végzett bepárlásisal eltávolítjuk. A maradékot metanollal elkeverjük és megszűrjük, majd 40 C°~on csökkentett nyomáson szárítjuk. Az így nyert N-benziloxikairbonil-iL-glutamil-L-glutaniil-L-alanil-L-tiirrozilglicilrL-triptioifainil-L-imetionil-L-aszparagil-L-fenilalaninamid színtelen szilárd termék. A pH 6,1 értéknél végzett elektroforézis azt mutatta, hogy a minta által okozott folt az. anód felé mozdult el. 12. példa: 3,55 rész L-triptofanil-L~metionil-L-.aszparagil-L-fenilalaninaimidtrifluoracetátnak 30 rész dimetilforimamiddal készített oldatát 0 C°--ra hűt> jiük' és 1,01 rész trietilaimint adunk, hozzá. Az elegyet elkeverjük, miiközben, 1,84 rész ir-t->butiloxikanbonil-#-alanin-2-,4,5-triklórf'enilésztert adagolunk hozzá. A reakcióelegyet 48 órán keresztül még 0 C°-on, majd 24 órán át 20: —23 C°-on tartjuk. Az elegyet 100 nesz jeges víz, 0,37 rész tömény sósav (fs.: 1,18), 1,2 rész ecetsav és 20 nesz étiliaoetát keverékéhez adjuk. A kapott reakcióelegyet 15 percen keresztül 0'— 10 C°^on keverjük, majd szűrjük. A szilárd terméket vízzel, maljd etilaoetáttal mossuk, 40— 50 C°-on csökkentett nyomáson szárítjuk. A nyectNjbutüoxikariboii^^-alanil-I^tripto'fainil-L-!metionil-L-aszpanaigil-HL^fenilal.aninamid bomlás közben 213 C°-on olvad. Az N-t-butiloxikarbonil-^-alanin-2,4,5-triiklórfenilészter kiindulási anyagot (olvadáspont: 94— 95 C°) az N-a!cetil-A-alanin-2,4,5-tri! klőrfenilész-5
