153375. lajstromszámú szabadalom • Eljárás acilezett tetrapeptid-származékok előállítására
7 153375 8 1. példa: 178 rész L-triptofanil-L-metiionil-L-aszparagil-L-fenilalaninamidtrifluoraoetátnak (185—190 C°on gázfejlődés köziben olvad) 2000 rész dimsrilformamiddal készített oldatát 0 C°-ra lehűtjük és 50,5 rész trietilamint adunk 'hozzá. Az elegyet keverjük és 0 C°-on 90 rész hippursiav-2,4,5-tri~ klórfenilésztert adagolunk hozzá. A reakcióelegyet 48 órán keresztül 0 C^-on tartjuk, ezután 2n sósav hozzácsepegtetésével az elegyet pH 1 értékre állítjuk: be, majd 5000 rész jeges vizet és 5000 rész étert öntünk hozzá. Az élegyet 15 percen keresztül 0 C°-on keverjük, azrután megszűrjük. A szilárd maradékot vízzel, majd éterrel mossuk és 40—50 C°-on csökkentett nyomásion megszárítjuk. Az így kapott N-benzoüglicil-I^üiptofanü-L-rnetiionil-L-aiszpariagil-L-fenilalaninamid olvadáspontja bomlás köz^-1 ben 237—238 C°. A terméket etanolból átkristályiosíthatjuk és így fehér péhelyszerű tűket nyerünk. A fent alkalmazott hippursav-i2,4,5-tráklórfenilésztert a következőképpen állíthatjuk elő: 179 rész hippursavat és 217 rész 2,4,5-triklórfenolt 2000 rész forró aoetonitrilhez adagolunk. A kapott szuszpenziót gyorsan 30 C°-ra hűtjük és 206 rész N,N'-dicikldhexilkarbodiijmidet adunk hozzá. Az elegyet 20—30 C°-on 3 órán át folyarmatosan keverjük, majd 5 percen keresztül forraljuk. A forró elegyet megszűrjük és a szürletet lehűtjük. A szürletből kivált színtelen terméket ismételt szűréssel összegyűjtjük és etanolból kristályosítjuk. A kapott hippursav-2,4,5--triklórfenilészter olvadáspontja: 148—'149 C°. Az L-triptofanil-L-metionil-L-iaszparagil-L-fenüalaninamidtrifluoraoetát kiindulási termék (olvadáspontja: 185—190 C°) előállítása önmagában ismert módon történik. 2. példa: Az 1. példa eljárását megismételjük úgy, hogy a 90 rész hippursav-2,4,5-MHórfenilészter helyett 78 rész L^piroglutaminsav-2,4,5-triklórfenilésztert alkalmazunk. A kapott L^piroglutamil--L-triptofianil-L-metiianil-L-aszparagil-L-fenilalaninamid olvadáspontja bomlás mellett 232 C°. A, fenti L-piroglu.taminsaiv-2,4,5-triSklórfenilésztert a következőképpen iállíthatjuk elő: 206 rész N,N'-tdiciM'ohexiIkiarbodiiimidet 0—10 C°-on 263 rész N-tbenzilhexilkarbonil-L-piaioglutíaminsavnak és 198 rész 2,4,5-triklórfenolnák 1000 rész vízmentes tetraMdrofuránnal készített kevert oldatához adunk. Az elegyet 16 órán keresztül 0 C°-on tartjuk, majd megszűrjük. A szürletet csökkentett nyomáson bepároljuk és a -maradékot etanolból kristályosítjuk. Az így nyert Nnbenziloxikarbonil-L-piroglutaminsav-2,4,5-triklórfenilészter olvadáspontja: 107—108 C°. 443 rész N-benziloxikarbonil-L-ipiroglutainiinsav-2,4,5-triklórferiilészter 4000 rész tetrahidrofurános oldatát 50 rész 5%~os paUádiumriaktívszén katalizátorral elkeverjük és az elegyen 18—22 C°-ori, atmoszféra nyomáson míg a széndioxidtfejlődés meg nem szűnik, hidrogént buborékoltatunk keresztül. A reakeióelegyből azután szűréssel a katalizátort eltávolítjuk és a szürletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A 5 kapott maradékot. metanolból kristályosítjuk. A kapott L-piroglutamil-i2,4,5-triklórfenilészter olvadáspontja: 162—163 C°. 3. példa: 10 Az 1. példa eljárását megismételjük úgy, hegy a 90 rész hippursav-2,4,5-triklórfenilészte]; helyett 46 rész p-nitrofenilaoetátot használunk. Az így nyert Na-aoetil-Lr-triptofanil-L-metionil-L-15 -aszparagil-L-rfenilalanmiamid febér szilárd termék, 245—246 C°-on gázfejlődés közben olvad. 4. példa: 20 Az 1. példa eljárását megismételjük úgy, hogy a 90 rész hippursaiv-2,4,5-triklórfenilészter helyett 61 rész p-nitoofenübenzoátot alkalmazunk. Az így nyert Na^benzoil-L-triptofanil-L--metw> nil-L-aszparagü-L-fenilailaninamid fehér szilárd 25 termék, 228—230 C°-on gázfejlődés közben olvad. -" 5. példa: £0 Az 1. példa eljárását megismételjük úgy, hogy a 90 rész ihippursav-2,4,5-triklórfenilészíber helyett 140 rész N<»-t-Jbutiloxikarbonil-Nf-'benziloxikarbonil-L-lizin-2,4,5-triklórfenilésztert alkalmazunk. A kapott Na-t-butiloxikarbonil-Ní-35 -benzßox^arbonil-Lr^zdl-I^triptofanil-L-imetionü-L-aszparagil-f.erülalaninamid fehér szilárd anyag, 207—208 C°-on gázfejlődés közben olvad. 6. példa: 40 Az 1. példa eljárását megismételjük úgy, hogy a 90 rész hippursav-.2,4,5-triklór!fenilészter he^lyett 140 rész Na^benziloxikarbonü-Nff-t-butiloxikarbonil-L-lizin-2,4,5-tciklórfenilésztert hasz-45 nálunk. Az így kapott Na^benziloxikarbonil-Ni;-1>-butiloxikarbonil-Hlj-lizil-L-triptofianil-L-jmetionil-L-iasEparagil-L-fenilalaninamid fehér szilárd termék, 216—217 C°-on gázfejlődés közben olvad. 50 7. példa: Az 1. példa eljár ásat megismételjük, úgy, hogy a 90 rész hippursav-2,4,5-triklórfenilész,ter he-55 lyett 98 rész N-benziloxikarbonilglicin-2,4,5-triklórfenilésztert használunk. Az így kapott N-ibenziloxikarbanüglicü-L-triptofanil-L-metionil-L-asziparagE-L-fenilalaninamid fehér szilárd termék. (A C39 H450 9 N T S képletnél C: 59,3%; H: 5,75%; N: 12,5%. iA talált adatok szerint 60 C: 59,6%; H: 6,0%; N: 12,3%.) A termék tisztaságát 6n sósavas hidrolízissel is ellenőrizhetjük. A kapott hidrolizátumiot Beckmann-féle aminosav analizátorral meghatározva a termék az 65 alábbi aminosav arányokat tartalmazza: aszpa-4
