153375. lajstromszámú szabadalom • Eljárás acilezett tetrapeptid-származékok előállítására
23 153375 24 -metiionil-L-asziparagü-L-fenilalaninirntetilészter fehér kristályos termék, olvadáspontja: 167—169 C°. A termék vékony rétegű kromatográfiája szilifcagél adszotbenst és 100 rész s-butanol és 44 rész 3%-os ammónia oldat elegyét alkalmazva az Rp 0,61 értéknél egy egyedülálló foltot mutat. Ugyancsak szilifcagél adszorbenst, de 25 nesz n-butanol, 6 rész ecetsav és 25 rész víz elegyét használva az egyedülálló folt FP 0,50 értékű. A fenti metilészterből 100 részt 72 órán keresztül 22 C°-on 10 000 rész ammóniával telített vízmentes metanollal elkeverünk. A reakcióelegyet azután csökkentett nyomáson bepároljuk és a maradékot 2000 rész metanolban feloldjuk, majd 15—20 C°- on keverés közben 5°/Q-os citromsavat csepegtetünk hozzá, míg a pH 2—3 éritékbe nem áll. A szilárd terméket szűréssel összegyűjtjük, vízzel mossuk és 40 C°^on csökkentett nyomáson szárítjuk. A kapott N-t-Jbutiloxikaribonil^Ix4riptöfanü-L-metiohil-L-aszpainaigil-L-fenilalaniniaimid gázfejlődés köziben 209—210 C°-on olvad. A kiindulási anyagként használt L-aszparagil-L-fenilalaniínmetiilészter-hidrokloridot a következőképpen állíthatjuk elő: 465 rész N-benzilöxikarbonil-:(^-benz:il)-L-aszparaginsavat és 280 rész L^fienilalaninmietilészter-hidrokloridot 1200 rész metilénkloiridban feloldunk. 132 rész trietilamint, majd 294 rész N^N'-diciklohexilkarbodiimidet adunk hozzá, miközben a hőmérsékletet 0 C°-on tartjuk. Ezután az elegyet még további 1 órán keresztül ezen a hőmérsékleten keverve, majd 16 órán keresztül 20—212 'C°-on keverve tartjuk. Az elegyet megszűrjük és a szürletet egymás után In sósavval (500 rész), vízzel (500 rész), In nátriumhidrogénkairbonáttal (500 rész) és vízzel (500 rész) mossuk és vízmentes magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot etilaoetát és petroléter (forráspont: 60—80 C°) elegyéből kristályosítjuk. Az így kapott N-ibenziloxikarbonil-(^-benzil)rL-aszpa!ragil-L-fenilaLaninmetilészter olvadáspontja: 1115—116 C°. A fenti vegyületből 312 részt 4000 rész metanolt és 300 rész 2n sósavat tartalmazó elegyet 18—22 C°-on atmoszféra nyomásom 3 órán keresztül 50 rész 10%^os palládium-aktívszén katalizátorral keverjük, ímiközben az elegyen hidrogént buborékoltatunk át. A reakcióelegyet azután megszűrjük, hogy a katalizátort eltávolíthassuk és a szürletet azután csökkentett nyomáson bepároir juk. A maradékot szintén csökkentett nyomáson 40 C°-on pároljuk be. Az így kapott L-aszparahgil-L-fenilalaninmetilészter-jhidroklorid olvadáspontja: 105-^110 C°. 43. példa: 1,96 rész N-t-butiloxikairbonil-^^alanil-L-trip'tofanü-L-metionil-L-aszparagil-L-fenilalaninme!tilésztert 0 C-on 50 rész ammóniával telített vízmentes metanolban feloldjuk. Az oldatot 24 órán keresztül 0—2 C°-on állni hagyjuk, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 40 rész metanolban feloldjuk és az elegyhez 0,2 rész ecetsavait adagolunk. A kivált szilárd termiékét szűréssel elkülönítjük és metanollal mossuk. Az így kapott N-t^butiloxiíkarbonil-^-ailanil-L^ripttoifánil-I^metiionil-L-iaszparaigil-r^-fenilalaninamid olvadáspontján, 229—230 C°-on bomlik. A kiindulási anyagként alkalmazott N-t-butiloxikarbonil-^-alianil-L-triptofianil-L-metionil-L-asz;paraigil-L-feniM.aninmetilésztert úgy állítjuk elő, hogy 9,6 rész N-t-butiloxikairbonil-^-alanin-2,4y5-triklórfenilészternek és 5,18 rész Ij-triptofanü-L^metionil-L-aszpiaragil-L-fenilalanmmetilésziter-hidrokloriidniak 50 rész dimietilformamiddal készített oldatát 0 C°^ra lehűtjük és 10 rész vizet, majd 1,62 rész trietiliamint adunk hozzá. Az elegyet 3 napon keresztül 0—2 C°-on keverjük, majd 200 rész jeges vizet, 1,6 rész citromsavat, 1,0 rész ecetsavat és 80 rész étert öntünk hozzá. Az elegyet megszűrjük és a szilárd maradékot 3 alkalommal vízzel, háromszor éterrel 'mossuk, majd etanolból kristályosítjuk. . A kapott N-t-butiloxikarbonil-^-alanil-'L-triptofainil-LrJrnetionil-L-aszparaigil-L-fenilalaninmetilésziter bomlás közben 171—172 C°-on olvad. L-triptofanil-L-imetionil-L-aszpanagil-L-fenilalanmmietilészteir-ihidroklorido't a következőképpen készíthetünk: 7,12 rész N-t4>utiloíxikairbonil-L-trÍ!ptofanil-L-imetionil-L-,aszpairagil-L-fenilalaninmetilészternek 100 rész ecetsavval készített oldatát 15—20 C°-on 100 rész 3,45n sósavnak etilacetátos oldatával reakcióba hozunk. Az oldatot 3 órán keresztül 20—22 C°-on állni hagyjuk, majd 1000 rész étert öntünk hozzá. Az; elegyet megszűrjük és a szilárd maradékot 5 alkalommal éterrel mossuk és 25 C'°-o(n vákuumban megszárítjuk. A kapott L-triptofanil-L^metionil-L-aszparagil-L-fenilalaninmietilészter-hidroklorid bomlás közben 180—181 Cc -on olvad. 44. példa: 3,89 rész N-t-butiloxi!karbonil-A-alanil-L-triptafámhidrazidot —20 C°-on erős keverés mellett 0,73 rész vízmentes sósavnak 20 rész vízmentes tetralhidrófuránnal készített elegyéhez adunk. A kapott oldatot 1,2 rész n-butilnitrittel hozzuk reakcióba és a keverést —20 C° és —25 C° között még 6 percen keresztül folytatjuk. Az elegyet ezután 0 C°-on 4,47 rész L-metiionil-L-aszparagil-L^fenilalaninamid-hidrokloD:idnak 50 rész dimietilfarimaimiddal, 25 rész vízzel és 4,24 rész trietilamirmal készített oldatához adjuk. A reakcióelegyet 0 C°-on 3 napon keresztül keverjük, majd 5%-os citramsavval pH 3,5-re savanyítjuk. Az oldatot azután 500 nesz jeges víz és 300 rész éter elegyéhez öntjük és a kapott keveréket megszűrjük. A szilárd maradékot vízzel mossuk és vizes 2-etoxietanoTból kristályosítjuk. Az így nyert N-t-butilöxika!rbon.il-A-alanil-L-tiriptofanil-L-metionil-L-aszparaigil-L-fenilalaninalmid bomlás közben 229—230 C°-om olvad. A kiindulási anyagként alkalmazott N-t-butiloxikarbonil-^-ialanil-L-triptofánhidrazidot úgy állíthatjuk elő, hogy 10,7 rész 100%-os hidrazin-10 15 20 25 Z0 35 40 45 50 55 60
