152802. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy eddig ismeretlen polipeptid előállítására
152802 9 észter (H-Pró-OTB) 70 tnl etilacétáttal készített oldatát 16 óra hosszat hagyjuk állni 20° hőmérsékleten. Az oldatot azután híg nátriumhidroxidoldatital, híg foszforossavval és telített nátriumkloridoldattal mossuk, nátriumszulfáton 5 szárítjuk és vákuumban bepároljulk. Benzol és éter elegyéből átkristályosítva 49 g CBO-(Tos)Arg-Pro-OTB nyerhető; op. 127°;[«]D 21 = --29° diimetilformamidban. 116 g GBO-(Tos)Arg-Pro-OTB 150 ml tri- 10 fluorecetsawal készített oldatát 2 óra. hosszat hagyjuk állni 20° hőmérsékleten. Azután étert adunk az: oldathoz és a levált csapadékot nammoniumhidroxidoldatbian feloldjuk. Az oldatot etilacetáttal mossuk, 4 n kéhsavoldattal 15 megsavanyítjuk és a levált csapadékot etilacetátban oldjuk. Az etilacetátos oldatot vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. Ily módon 98 g CBO-(Tos)Arg-Pro-OH nyerhető; [«]D21 = —11° dimetilforma- 20 midban. A kapott terméket 500 ml jégeoetes 4 n brómhidrogénsavban oldjuk és aá oldatot 1 óra hosszat hagyjuk állni 20° hőmérsékleten. Éter hozzáadása után 83 g H-(Tós)Arg-iPro-OH4iid- 25 robromid választható el. 60 g Hj(Tos)Arg-Pro-OH-hidrobromidot és 80 g OBO-(Tos)Arg-OCP-t (előállítva a 3. példa szerint) 200 ml dimetilformamidban oldunk^ és az ' oldathoz 52 iml tfietilamint adunk. Az 30 elegyet 48 óra hosszat rázzuk 20° hőmérsékleten, majd leszűrjük és a szüredékhez 500 ml 4 n ecetsavoldatot adunk. A levált olajszerű termieket n-ammóniumhidroxidoldatban oldjuk, etilacetáttal imossulk és 4 n kénsavoldattal meg- . 35 savanyítjuk. A levált terméket etilacetát és nbutanol elegyével extrah'áljuk, majd a kapott kivonatot vákuuimlban bepároljuk. Ily módon 86 g CBO-(Tos)Arg-Pro-OH nyerhető; [«]2/ ' D = —40° dimetilformamidlban. 40 A kapott terméket -500 ml jégecetes 4 n brómhidtogénsaivoldatban oldjuk és az oldatot 1 óra hosszat hagyjuk 20° hőmérsékleten állni. Éter hozzáadása után a levált terméket elválasztjuk; ily módon 86 g- H-(Tos)Arg~(Tos)Arg-PrcHOH- 45 hidrabromidot kapunk. 61 g H-(Tos)Arg-(Tos)Arg-Pro-0!H-Jhidrobromid és 32 g CBO(For)Lys-OGP (előállítva a 2. példában leírt miódon) 200 iml dimetilformamiddal 'készített oldatálhoz 90 ml trietilamint 50 adunk. Az elegyet 48 óra hosszat rázzuk 20° hőmérsékleten, majd leszűrjük és 500 ml 4 n ecetsavoldatot adunk hozzá. A levált terméket n-ainmóniumhidroxidoldatban oldjuk, az oldatot etilacetáttal mossuk és 4 n kénsavoldattal 55 megsavanyítjuk. A levált olajszerű terméket -. etilacetát és n-ibutanol elegyével extraháljuk, a kivonatot vízimentes nátriumszulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. Ily módon 42 g CBO-(For)íLys-(Tos)Arg-^ros)A:rg-ProJOH nyer- 6<) hető; [a ] 21 D — —23° dimetilformamidban. A kapott termieket 300 ml jégecetes 4 n brómhidrogensavoldatban oldjuk oldatot 1 óra hosszat hagyjiik állni 20° hőmérsékleten. Éter hozzáadása után 39 g H-ÍForJLys-ÍTos^Arg- gg 10 -(Tos)Arg-Pro^OH-hidrobromid választható el. 37 g H-(For)Lys-(Tos)Arg-(Tos)Arg^Pro-OH-hidrobromid és 19 g CBO-(For)Lys-OCP (előállítva a 2. példában leírt módon) 100 nil dimetilformamiddal készített oldatához 68 ml trietilamint adunk. Az elegyet 20° hőmérsékleten 48 óra hosszat rázzuk, majd 500 ml 4 n ecetsavoldatot adunk hozzá. A levált olajszerű terméket n-ammóniumlhidroxidoldatlban oldjuk és az oldatot etfilacetáttal mossuk. Ezután híg kénsavval megsavanyítjuk az oldatot és n-ibutanol és etilacetát elegyével extraháljuk. A kivonatot vízmentes nátriumiszulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. Ily módon 28 g CBO-(For)-Lys-(For)Lys-(Tos)A!rg^(Tos)ArgHPro-OH nyerhető; [a ] 2i ó =- —18° dimetilformamidban. A fenti módon kapott terméket 300 iml jégecetes 4 n brómhidrogensavoldatban oldjuk és az oldatot 1 óra hosszat hagyjuk állni 20° hőmérsékleten. Éter hozzáadása után 31 g H-(For)Lys-(For):Lys-(Tos)Arg-(Tos)Arg^Pro-'OH-hidrobromid válik le az oldatból. A termék bomlás bözbien 176°-on olvad. [«ID 21 = —'1'5° 95%-os eoetsavlban. 11. példa: L-valil-glicil-epszilon-!N--ifoirmil-'TJ -lizil-epszilon-N-jformil-L-lizil-(guanido)^N-tozil-iL-arginil-(guanido)^N-tozil-lj-argiml-iLr-prolil-iL-vaIil-epszilon-flST-f ormil-HL-lizil-Ir-valil-L-tiroziWL-prolü-L-va] inamiíl; H-Val-Gly- (For) Lys-(For)Lys-(Tos) Arg~(Tos)-. -1 Arg-Pro-yal-(For)Lys-Val-Tyr-Pro-'ValHN i H2 (vö. C. ábra). 17 g CBÖ-Vál-Gly-OCP (előállítva a 7. példa szerint) és 40 g H-(For)Lys-(For)Lys-(Tos)Arg-(Tos)Arg-iPro-OH-hidrobromid (előállítva a 10. példában leírt módon) 100 ml dimetilf ormamiddal készített oldatához 100 ml trietilaimint adunk, Az elegyet 48 óra hosszat rázzuk 20° hőmérsékleten, majd leszűrjük és 500 ml 4 n ecetsavat adunk hozzá. A levált olajszerű terméket híg amimóniumhidroxidoldaltbah oldjuk és az oldatot etilacetáttal mossuk. 4 n kénsavoldattal történő ímegsavanyMs után n-butamol és etilacetát elegyével extraháljuk az oldatot, a szerves oldószeres kivonatot vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk, majd szárazra pároljuk be. Ily módon 26 g CBO-Val-Gly(For)Lys-(For)Lys-(Tos)Arg-(Tos)Arg-.Pro-OH nyerhető; [a]D 21 = —16° dimetilformamidban. A fenti módon kapott termék és 19 g H-Val-(For)L,ys-Val-Tyir-Pro-Val-flSrH2 (előállítva a 9. példában leírt módon) 160 ml dimetilformamid és 160 ml aoetonitril elegyével készített oldatához —10°' hőmérsékleten 7,2 g dicifclohexil-karbodiimidet adunk;. Az elegyet 16 óra hoszszat rázzuk 20° hőmérsékleten, majd a diciklohexil-karbaimidot kiszűrjük. A szüredékhez híg sósavat adunk, a levált terméket vízzel, majeF etilacetáttal mossuk. Ezután a terméket forró etanolban oldjuk és lehűlés után a levált terméket szűréssel elkülönítjük. Ily módon 22 g 5
