152149. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására
7 • • feloldunk és —10 C°-on 5,4 g (33,3 mmol) karbonildiimidazolt adunk hozzá. Az elegyet további 20 percig 0 C°-on kavarjuk. Ezután 9,8 g (33,3 mmol) H-<Ns-Z)-L-Lys-OCH3-at adunk hozzá 50 ml abszolút tetrahidrofuránban és további 4 óra hosszat közönséges hőmérsékleten kavarjuk. A reakcÍQelegyet vákuumban bepároljuk és a maradékot eceteszterben felvesszük. Az eeeteszter-oldatot háromszor In sósavval, kétszer vízzel és egyszer telített nátriumklorid oldattal megmossuk, nátriumszulfáton megszárítjuk és vákuumban bepároljuk. A 26 g-os maradék eceteszter/petroléterben váló átkristályosításkor 15,1 g N*-oetiloxikarbonil-(N«-Z)-L-Lys-(Ne-Z)-L-Lys-OCH3-at ad, olvadáspont 93—101 C°. További átkristályosítás az olvadáspontot 105—106 C°-ra emeli; [*pD = —10,1° (c = 1,0 metanolban). Na-cetiloxikarbonil-L-Lys-L-Lys-OCH3.2HCl 15,1 g (16,2 mmol) Na-cetiloxikarbonil-(Ne-Z)-L-Lys^N«-Z)-L-Lys-OCH3-at 200 ml jégecetben 3,5 g 5%-os palládiumszénnel hidrogenolizálunk. 930 ml hidrogén felvétele után a hidrogénfelvétel megszűnik és az elegyet megszűrjük. Vákuumijepárlás után vízben oldódó maradék marad vissza, melyet 22 ml 2,3n sósav-/metanolban oldunk, majd ezt követóen szárazra párolunk. A szilárd maradék kétszeres átkristályosítás után 6,9 g Na-cetiloxikarbönil-L-Lys-L-Lys-OCH3.2HCl-t ad, olvadáspont 190—192 C°; |>l24 o = —13,39 (c == 0,99 metanolban). • A kiindulási anyagként használt Na-cetiloxikarbonil-(N«-Z)-L-LysOH-t a következőképpen kaphatjuk: 121 g '^0,5 mol) cetilalkoholt 1000 ml benzolban oldunk. Kavarás közben addig desztillálunk le benzolt, amíg már nem megy át víz. Ezután a hőmérsékletet 55—60 C°-ra csökkentjük és 70 ml (99 g = 1 mol) kondenzált foszgént desztillálunk be, ami kb. 6 órát vesz igénybe. Ezután 'a benzol felét ledesztilláljuk, miközben gyenge nitrogénáramot fúvatunk az oldat fölé. A foszgén- és sósavmentes maradékot vákuumban még tökéletesen megszabadítjuk a benzoltól, amikor is kb. 150 g cetiloxikarboriilkloridot kapunk. 28,0 g (0,1 mol) (Ní-Z)-L-Lys-OH-t finoman elporítva 120 ml In nátronlúgba és 50 ml acetonba adunk és ehhez az elegyhez kb. 5 C°-on, kavarás közben egyidejűleg 30,5 g (0,1 mol) cetiloxikarbomlkloridot és 100 ml In nátronlúgot adunk cseppenként, ami kb. 35 percig tart. Az elegyet további 20 percig kavarjuk, majd 3n sósavval kongóra megsavanyítjuk és kétszer eceteszterrel extraháljuk. Az eceteszteres kivonatot kétszer In sósavval, kétszer vízzel és egyszer telített nátriumklorid oldattal mossuk, nátriumszulfáton megszárítjuk és vákuumban besűrítjük. Hexánban kristályosítva 41,7 g, még kevés cetilalkoholt tartalmazó terméket kapunk, . olvadáspont 55—68 C°. Éter/petroléteres átkristályosítás Na-cetiloxikarbonilj(Ns-Z)-L-Lys-OH-t ad, olvadáspont 59—69 C°; [a]»^ = +11,6° (c = 0,96 kloroformban). • • 8 2. példa: Na-oktiloxikarboniHNs -Z)-L-Om-NH-NH ä 5 31,7 g (0,1 mol) (Nö-Z)-L-Qfn--OCH3.HCl-t finoman elporítva 300 ml benzolban szuszpendalunk és azeotróp desztillációval víztől megszabadítjuk. Ezután visszafolyatás és kavarás közben addig vezetünk be foszgént, amíg min-10 den oldatba megy (kb. 5 óra). Ezután nitrogénáramban a benzol- kétharmadát ledesztilláljuk és a maradékot vákuumban bepároljuk. 26,4 g karbonil^NS-ZJ-L-Orn 4DC'H3-at (a-izoeianáto-3 --karbobenzoxiamino-valeriánsavmetileszter) ka-15 punk, olajos formában. 400 ml benzolból 100 ml-t ledesztillálunk és a maradékhoz 15,1 ml (96 mmol) n-oktanolt adunk. .Ezután kavarás közben 2 C°-on 26,4 g (86 mmol) karbonil-(NS-Z)-L-Orn-OCH3-at 50 ml 20 abszolút benzolban hozzácsepegtetünk és közönséges hőmérsékleten 16 óra hosszat állni hagyjuk. Vákuumbepárlás után 38,8 g Na-oktiloxikarbonil-(Ns -Z)-L-Orn~OCH 3 -at kapunk színtelen, nem kristályosodó olaj alakjában. 25 Ezt az olajat 200 ml metanolban feloldjuk és 8,5 ml (175 mmol) hidrazinhidrátot adunk hozzá. Az elegyet 20 órán át közönséges hőmérsékleten állni hagyjuk és azután vákuumban" bepároljuk. A maradékot alkohol/vízben átkristá-30 lyosítjuk. 32,2 g Na-oktiloxikarbonil-('N3-Z)-L-Orn-NH-NH2 -t kapunk, olvadáspont 110—120 • C°; [apD = —7,23° (1,03 metanolban). Na-oktiloxikarbonil-(Ná-Z)-L-Orn-(Ná-Z)-L-35 -Orn-OOH3 A kapott hidrazid 31,6 g-ját (72,3 mmol) 200 ml 2n sósavban és 2O0 ml eceteszterben kavarjuk és 15 ml jégecettel feloldjuk. Kavarás köz-40 ben, 5 C°-on: annyi 50%-os nátriumnitrit oldatot csepegtetünk hozzá, amíg a káliumjodidkeményítős papír 5 perc után már nem színtelenedik el (kb. 10 ml). Ezután a vizes fázist leválasztjuk. A szerves fázist jeges vízzel és két-45 szer 10%-os káliumhidrogénkarbonát oldattal és jéggel mossuk, megszűrjük, nátriumszulfáton megszárítjuk és 20,5 g (72,3 mmol) H~(NS-Z)~L-Orn-OCH3 oldatához adjuk. Az elegyet 18 óra hosszat közönséges hőmérsékleten állni 50 hagyjuk, majd kétszer 3n sósavval, kétszer vízzel és egyszer telített nátriumklorid oldattal megmossuk, jmegszérítjuk és vákuumban bepároljuk. A szilárd maradékot benzol/petroléterben átkristályosítjuk. 30 g (61%) Na-oktiloxikarbo-55 nil-(NS-Z)-L-Orn-(NS-Z)-L-Orn-OCH3-at kapunk, olvadáspont 83—92 C°; [a]26 D = —6,55° (0,99 metanolban). Na-oktiloxikarbonil-L-Orn-L-Orn-OCH3.2HCl m 27,9 g (40,8 mmol) Nö-oktiloxikarbonil-{NS-Z)-L-Orn-ÍNá-ZJ-L-Orn-OCHa-at 200 ml jégecetben 5 g 10%-os palládiumszénnel hidrogenolizálunk. 2,1 liter hidrogén félvétele után a hidai rogénezés megáll. A hidrogénező elegyet meg-4
