151698. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy új nonapeptidamid előállítására

151698 9 10 246°-on bomlás közben olvad. Infravörös-színkép: határozott sávok [«] = 4,75 mikronnál (-CO.N3). f) N-karbobenziloxi-L-aszparaginil-S-benzil-L-cisztein-hidrazid: 14.2 g i(30 millimól) íN-karbobenziloxi-L-aszparaginil-S-benzil-L-cisztein-metilésztert [előállítva pl. M. Bodánszky és V. Du Vigneaud, J. Am. Chem. Soc. 81, 5688 (1959) szerint] 250 ml dim etilform ami db an oldunk, az oldatot 0° hőmérsékletre hűtjük és 7,3 ml (150 millimól) Kidrazinhidrátot adunk hozzá. A reakcióelegyet 55 óra hosszat hagyjuk állni 0° hőmérsékleten. A hidrazid elkülönítése céljából 1800 ml etanolt adunk az oldathoz, amikoris a hidrazid 213—• 215°-on bomlás közben olvadó nyers termék alakjában leválik. Dimetilformamid és acetonitril elegyéből történő kétszeri átkristályosítás után a bomlás közbeni olvadáspont 214,5—• 215,5°-ra emelkedik; [a]o =—33,9° (c = 2,01 hangyasavban), [«]o =—29,7° (c = 0,52 dimetilf ormamidban). A vékonyrétegű kromatografálás során a termék egységesnek mutatkozik a n-butanol/jégecet/víz 3:1:1 rendszerben. Kimutatás: klór-módszer. g) N-karbobenziloxi-L-aszparaginü-S-benzil-L-cisztein-azid: 7,103 g (15 millimól) N-karbobenziloxi-L-aszparaginil-S-benzil-L-cisztein-hidrazidot 135 ml dimetilformamid és 45 ml n-sósav oldat elegyében oldunk és az oldathoz —10° hőmérsékleten keverés közben cseppenként hozzáadjuk egy előzetesen lehűtött 5 n nátriumnitrit oldat 3,6 ml-nyi i(18 millimól) mennyiségét. Az azid kb. 2 perc múlva kristályos alakban leválik. 15 percig tovább keverjük —10° hőmérsékleten, majd az azid leválásának teljessé tétele céljából óvatosan hozzáadunk 80 ml vizet. A képződött csapadékot leszűrjük, először hideg vízzel, majd hideg 2%-os inátriumhidrogénkarbonát oldattal, azután ismét vízzel mossuk, majd nagyvákuumban 0° hőmérsékleten 26 óra hosszat szárítjuk. A kapott termék 124°-on bomlás közben olvad. Ellenőrzés az infravörös színkép alapján: éles sávok A =4,75 mikronnál i(—CO-N3); még szobahőmérsékleten való 10 napi állás után is mentes izocianáttól i(A = 4,5 mikron). h) L-izoleucil-glicin-etilészter-hidroklorid: 15.3 g (44 millimól) N-karbobenziloxi-L-izoleucil-glicin-etilésztert [előállítva P. A. Jaquenoud és R. A. Boissonnas, Helv. Chim. Acta"44, 113 (1961) szerint] 200 ml jégecetben oldunk, majd az oldatot 1,1 ekvivalens tömény sósav és 5 g palládiumos aktívszén (10% Pd) jelenlétében szobahőmérsékleten 7,5 óra hosszat kezeljük hidrogénnel. A reakcióelegyet azután mentesítjük a könnyen illó alkotórészektől; a visszamaradó olaj száraz éterrel való többszöri eldörzsölés után kristályosodik. A reakciótermék etanol és éter elegyéből (1 :1) történő kétszeri átkristályosítás után 136—137°-on olvad; [•"]u'= +13,9° i(c = 3,0 absz. etanolban). Ez a termék a vékonyrétegű kromatografálás során egységesnek mutatkozik a n-butanol/j égecet/víz 3:1:1 rendszerben. Kimutatás: ninhidrin-módszer. i) N-karbobenziloxi-L-propil-L-izoleucil-glicin-etilészter: 12,15 g .(48 millimól) L-izoleucil-glicin-etilészter-hidrokloridot 120 ml absz. kloroformban, oldunk, az oldatot 0° hőmérsékletre hűtjük és ezen a hőmérsékleten hozzáadunk 7,4 ml i(52,8 millimól) trietilamint és 40 ml absz. kloroformban oldott 22,2 g i(60 millimól) N-karbobenziloxi-L-prolin-p-nitrofenilésztert [előállítva M. Bodánszky és V. DuVigneaud, J. Am, Chem. Soc. 81, 5688 ••(•1959) szerint]. A sárga színű reakcióelegyet 20 óra hosszat keverjük szobahőmérsékleten. Feldolgozás céljából 400 ml kloroformmal hígítjuk az elegyet, majd 90—90 ml n-sósav oldattal háromszor, 90—90 ml n-ammóniumhidroxid oldattal négyszer és 90—.90 ml vízzel háromszor extraháljuk, azután pedífe nátriumszulfáton szárítjuk. Az oldószert vákuumban elpárologtatjuk és a kapott kristályos maradékot etilacetátból kétszer átkristályosítjuk. A termék 159—160q-on olvad, [a\u — = —8'6,4° (c = 1,9.9 metanolban). Ez a termék a vékony rétegű kromatografálás során egységesnek mutatkozik a benzol/aceton 7 : 3 és n-butanol/j égece t/víz 3:1:1 rendszerekben. Kimutatás: klór-módszer. j) N-karbobenziloxi-L-propil-L-izoleucil-glicinamid: 15,5 g i(35,7 millimól) N-karbobenziloxi-;L-prolil-L-izoleucil-glicin-etilésztert 400 ml metanolban oldunk és a 0° hőmérsékletre lehűtött oldatba telítődésig vezetünk száraz ammónia-gázt. Az elegyet azután 30 óra hosszat hagyjuk állni szobahőmérsékleten, majd vákuumban 30° hőmérsékleten szárazra bepároljuk és a kapott kristályos maradékot metanol és víz 1 : 3 arányú elegyéből átkristályosítjuk. A kapott termék 183—184i

5°-on olvad; [«]?í = —65,7q l(c = 1,90 metanolban). A termék a vékonyrétegű kromatografálás során egységesnek mutatkozik a benzol/aceton 3:7 és n-butanol/j égecet/víz 3:1:1 rendszerekben. Kimutatás: klór-módszer. k) L-propil-L-izoleucil-glicinamid: 9,35 g .(22,3 millimól) .N-karbobenziloxi-L-prolil-L-izoleucil-glicinamidot 200 .ml metanolban 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5