151462. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rákellenes hatású antibiotikum előállítására
13 151462 14 Vizsgált baktériumtörzsek Mycobacterium smegmatis ATCC 607 Mycobacterium phlei Lyoni Bakteriológiai Intézet Mycobacterium parasmegmatis (A 75 — Lausanne) Escherichia coli ATCC 9637 Shigella dysenteriae Shiga L — Pasteur Intézet Salmonella typhimurium (Pasteur Intézet) Salmonella paratyphi A (Lacasse, Pasteur Intézet) Salmonella schottmuelleri (paratyphi B) Fougenc, Pasteur Intézet Bacillus Iactis aerogenes (Fac. Phie) Aerobacter aerogenes ATCC 8308 Alcaligenes faecalis ATCC 8749 Proteus vulgaris (Fac. Phie) Proteus X 19 Klebsiella pneumoniae ATCC 10.031 Serratia marcescens (A 476, Lausanne) Pseudomonas aeruginosa (Bass törzs, Pasteur Intézet) Brucella bronchiseptica (CN 387 — Wellcome Intézet) Pasteurella multocida (A. 125 — Pasteur Intézet) A 9.865 R.P. antibiotikumnak és három alkotórészének a rákellenes hatását laboratóriumban vizsgáltuk; ezek az anyagok igen aktívaknak mutatkoztak az egerek átoltható rákmeg- 45 betegedéseivel szemben. Különösen az alábbi kísérleti rákokkal szemben tapasztaltunk nagyfokú aktivitást: Ehrlich-féle astices-egérrák, „180" szarkoma, benzpirén-szarkoma és AKR lymphoblastosis-leukémia. Az említett négyféle 50 antibiotikum közül legérdekesebbnek a 13.057 R.P. antibiotikum bizonyult; ennek toxikusságát főképpen egereken vizsgáltuk; az anyag akut 50°/o-os fetalis adagja (DL50) szubkután beadás esetén: 55 DLS0 = 47 mg/kg s-c Meghatároztuk ennek az anyagnak szubakut (5 napon át napi egyszeri beadással történő kezelés esetén mutatkozó) 50%-os letalis adag- eo ját (DL50 ) intravénásán és szubkután beadás esetén: DL50 = 8,75 mg/kg i.v. DL50 = 13,65 mg/kg s.c. 65 9865 R.P. 13.057 R.P. 13.213 R.P. minimális baktéfiosztatikus koncentráció mcg/cm3 mcg/cm 3 meg /cm 3 0,13 1,2 0,21 0,041 5 0,035 0,069 2,2 0,09 >4,3 500 5,1 16 2000 13 31 100Ö 13 3,9 16 ' 16 1000 13 ;1 ' 9 120 7,8 1000 6,3 0,18 1,8 0,065 16 >2000 25 3,9 62 3,1 1 8,9 0,88 7,8 120 6,3 16 1000 12 62 6,3 0,24 1,8 0,07 A 9.865 R.P. antibiotikumot termelő mikroorganizmusok a Streptomycés-nemhez tartoznak; ezeket „Streptomyces 8899" és „Streptomyces 31.723" megjelöléssel jelöltük meg. E törzseket letétbe helyeztük a Northern Regional Research Laboratory intézetnél (Peoria, USA); ott e törzsek NRRL 3046 (az NRRL 3046 megfelel a Streptomyces 8899-nek), ill. NRRL 3045 szám alatt lettek nyilvántartásba véve. A fenti antibiotikumtermelő törzseket Algéria különböző vidékeiről származó talajmintákból tenyésztettük ki. A törzs elkülönítése az alábbi módon történt: A talajmintát steril desztillált vízben szuszpendáltuk, majd a szuszpenziót különböző koncentrációkra hígítottuk és mindegyik hígításból egy kis mennyiséget Petii-csészékben elhelyezett ágáros táptalajok felületére oltottunk. 26 C° hőmérsékletén történő néhány napi inkubáltatás után a mikroorganizmus-telepeket, amelyek a táptalajról elkülöníthetők, bőségesebben , elszaporított kultúrák nyerése céljából ferde ágáros táptalajra oltottuk át. A Streptomyces-törzsek azonosításának cél-7
