151223. lajstromszámú szabadalom • Kataláz előállítása mikroorganizmusokból B12-vitamin melléktermékeként
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1962. VII. 06. Közzététel napja: 1963. IX. 23. Megjelent: 1965. V. 01. (Sí—835) 151223 Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: C 12 k Decimal osztályozás: Dr. Simon Ágoston orvos-mikrobiológus, Budapest Kataláz előállítása mikroorganizmusokból Bi2-vitamki melléktermékeként 1 A kataláz enzim iparilag értékes anyag, amelyet számos területen alkalmaznak, elsősorban az élelmezési iparban. Kataláz előállítására ikülönféld nyersanyagokból indulnak ki, így állati szövetekből (vér, 5 máj stb.), vagy mikroorganizmusok (pl. penészgombák) tenyészetéből. Ismeretes, hogy más mikroorganizmusok is tartalmaznak katalázt, tehát elvileg alkalmasak kataláz ipari előállítására is. 10 Természetesen különös előnyt jelent, ha a katalázt melléktermék gyanánt nyerhetjük ki más ipari termékek eddig értéktelennek tekintett hulladékából. Ennek azonban az a legfőbb akadálya, hogy a kataláz igen bömlékony és 15 a legtöbb fizikai vagy kémiai műveletnél inaktiválódik. A kataláz ugyanis érzékeny savakkal szemben (pH 5 alatt), lúgokkal szemben (pH 8 felett), magas hőmérséklettel szemben * (50—60 C° felett) a legtöbb oldószerrel és kü- 20 lönféle sejtmérgekkel szemben. Jelen találmány tárgya olyan eljárás, amely jó hatásfokkal vonja ki a mikroorganizmusok testéből a B12 -vitamint, anélkül azonban, hogy közben a sejtekben visszamaradó katalázt ká- 25 rosodás érné. A B12 -vitamin szokásos kinyerési módja abban áll, hogy a sejteket különféle vegyi anyagok jelenlétében (cianidok, szulfitok stb.) hőkezelésnek vetik alá. A hőkezelés egymagában is 30 inaktiválja a katalázt, az említett Vegyszerek-" kel szemben pedig külön is rendkívül érzékeny a kérdéses enzim. Ismeretesek olyan eljárások is, amikor a Bj^-vitamint nem vízzel, hanem szerves oldószerekkel vonják ki melegítés közben. A kataláz azonban ilyen körülmények között is nagyrészt elbomlik. A találmány tárgyát képező módszer lényege az, hogy a fermentációs léből szűréssel, centrifugálással vagy más módon elkülönített baktérium vagy mikroorganizmus-tömeget 20—-40%-os vizes etanollal esetleg más vízzel elegyedő alkohollal vagy ketonnal) kezeljük 20— 40 C° közti hőmérsékleten. Azt találtuk, hogy az irodalmi adatokkal ellentétben az említett szerves oldószerek ilyen híg oldata szobahőmérsékleten is feltárja a mikroorganizmusokat és gyakorlatilag teljes egészében kioldja belőlük a bennük fehérjéhez kötve jelenlevő B-vitamint, anélkül, hogy a katalázt inaktiválnák. Ilyen óvatos körülmények közt való feltárás azonban hosszabb időt vesz igénybe, ezért célszerű a mikroorganizmus-tömeget a híg alkoholos oldattal több órán át kevergetni, vagy éjszakán át állni hagyni. Utána az oldószert elkülönítjük az üledéktől, ,a kivonatolás tökéletessé tétele érdekében pedig a műveletet 1—2-szer megismételjük, de most már felesleges az oldószert hosszabb ideig kevergetni a kivonandó mikroorganizmus-tömeggel. 151123
