150955. lajstromszámú szabadalom • Eljárás primér hidroxil-csoportot tartalmazó szteroidok elkülönítésére, valamint tisztítására és kristályos állapotban való kinyerésére

Megjelent: 1964. július 1. MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ^ N> SZABADALMI LEÍRÁS ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL 150.955 SZÁM Nemzetközi osztály: C 07 c6 GO—832 ALAPSZÁM Magyar osztály: 12 o 25 SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Eljárás primer hidroxil-csoportot tartalmazó szteroidok elkülönítésére, valamint tisztítására és kristályos állapotban való kinyerésére Gyógyszeripari Kutató Intézet, Budapest Feltalálók: Tömörkény Endre oki. vegyész (50%), dr. Gyimesi Józseí oki. vegyész (25%), dr. Weisz Erzsébet oki. vegyész (25%), Budapest A bejelentés napja: 1961. október 30. Az irodalom szerint a mikrobiológiai átalakítás, illetve az átalakítás során nyert szteroidok kinyerésének menete vázlatosan a következő (amerikai szabadalom. 2 &02 769, 1952. július 8.): A kívánt átalakítás elvégzésére alkalmas mikroorganizmus megfelelő táptalajon növesztett tenyészetéhez adagolják az átalakítandó szteroidot, majd az átalakítás során képződött terméket, ill. termékeket szűrés után vízzel nem elegyedő oldószerrel több részletben kivonatolják a fermentléből. A kivonatok, melyek a szteroidok mellett természetesen a fermentációs folyadék oldószeroldékony alkatrészeit is tartalmazzák, ezután bepárlásra kerülnek, melynek során általában olajos maradékhoz jutnak, mely jó esetben egy vagy több oldószer hozzáadására kristályosodik, ritka esetben a végtermék kristályosan, tisztán válik ki. Sok esetben a nyert olajos termék tisztítása hosszadalmas, költséges és fáradságos művelet, ugyanis megcszlásos oszlopkromatográfia szükséges a termékek kritályosan történő kinyerésére. Hasonlóan nehézkes a kristályosítási anyalúgok feldolgozása is. Még előnytelenebb a helyzet, ha a mikrobiológiai átalakítás nem eredményez egységes anyagot, hanem a kívánt termék mellett egyéb melléktermékek is képződnek olyan mennyiségben, hogy az esetleg kristályosan, kinyerhető végterméket jelentős mértékben szennyezhetik, ugyanakkor a szennyezések némelyike tisztán kinyerve gyógyászatilag hasznos anyaggá alakítható. Így pl. Absidia-speciesekkel Reichstein-féle S-anyagból hidrokortizon és 11-epihidrokortizon keletkezik. A hidrokortizon közvetlenül hasznosítható, a 11-epihidrokortizon kortozinná, ill. prednizonná alakítható. Hidrokortizonból Corynebacterium simplexszel prednizolon mellett ismeretlen szerkezetű, káros szennyezést jelentő szteroidok is képződnek. E fermentáció szteroid termékeinek elválasztása igen fontos feladat. Az alkalmazható elválasztási lehetőségeket mérlegelve a frakcionált kristályosítás gyenge kitermelést jelent a tiszta anyagokra nézve, a még szóbakerülő megoszlásos oszlopkromatográfia pedig fáradságos, költséges művelet, üzemi alkalmazás szempontjából nem jöhet szóba. Vizsgálataink során azt találtuk, hogy primer hidroxil-csoporttal bíró szteroidokat tartalmazó kristályelegyek, extrakciós szárazmaradékok, kristályosíthatatlan anyalúg-szárazmaradékok alkohololdékony sókat (pl. vízmentes káleiumkloridot) tartalmazó csekély mennyiségű alkoholban feloldhatók, a szteroid komplexképző tulajdonsága miatt. Az alkoholos oldat szűrésével egyes alkoholban oldhatatlan, komplexet nem képező szenynyezések eltávolíthatók. A komplex megbontásakor (pl. klórozott szénhidrogén és víz hozzáadásával) az a meglepő jelenség tapasztalható, hogy egyrészt olyan esetben is kristályosodik a szteroid, amikor semmilyen más kristályosítási módszer nem vezet eredményre, másrészt a komplexet megszüntető oldószer mennyiségének változtatásával a szteroidok nagyfokú, némely esetben gyakorlatilag teljesen szelektív elválasztása és különkülön való kinyerése érhető el. Absidia-f aj okkal történő hidrokortizon előállításnál a Reichstein-féle S-vegyületből indulunk