150735. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Hypertensin-II előállítására
2 150.735 adatok szerint [B. Riniker, R. Schwyzer: Helv. 44, 658 (1961) ugyanis a Z~-Val—Tyr— OH-nak H—Val — His — Pro — Phe OCH3-al a DCC-s módszerrel történő összekapcsolásakor kb. 30%ba.n keletkezik a nemkívánatos sztereoizomér termék a Z—Val—Tyr—Val—His—Pro—Phe—OCH3. Ezt a nemkívánatos mellékreakciót kiküszöbölendő a fenti védett hexapeptid kialakítására Z(C1)— _Val—Tyr—N2 H 3 -ból indultunk ki azidon keresztül valósítottuk meg a kapcsolást. Jelen eljárás tehát az irodalomban ismertekkel szemben azáltal, hogy mind a C-terminális, mind az N-terminális részek átmeneti megvédésére más védőcsoportokat, továbbá más kapcsolási módokat használ, több lépés kihagyásával, a közti termékek magas fokú tisztaságával és a végtermék különleges módszereket igénylő tisztításának elhagyásával, komoly műszaki előnyöket biztosít. Fent elmondottakat az alábbi példák szemléltetik. Az olvadáspont meghatározása a kapilláris módszerrel történik. R/1 = n-butanol-jégecet-víz — — 4:1:5 elegyben, R/2 = i-amilalkahol-ipiridin-víz = 1:1:2 elegyben történt futtatást jelent. Az előhívás Cl2 -f- benzidinnel történt. 1. példa: p-Klórbenziloxikarbonil-L-prolil-L-femlalanin metilészter 17,0 g p-klórbenziloxikarbonil - L-prolin absz. teírahidrofurános oldatához —20 C°-on, erős keverés mellett 8,4 ml trietilamínt, majd 5 perces keverés után 5,7 ml klórszénsavetilésztert csepegtetünk. Ezalatt 12,9 g L-fenilalaninmetilészter hidrokloridot 170 ml absz. tetrahidroí'uránban szuszpendálunk és 8,4 ml trietilamínt adunk hozzá. 15 perces rázogatás után a kivált tri etilamin hidrakloridot kiszűrjük és a szüredéket a fent elkészített vegyesanhídrid oldatához csepegtetjük, ugyancsak —20 C°-on. Adagolás után a reakciókeveréket további 1,5 óráig kevertetjük és a maradékot etilacetát-víz keverékében oldjuk. A szerves oldószeres fázist híg sósavval, NaHCOg-oldattal, majd vízzel kirázzuk és szárítás után az etilacetátot ledesztilláljuk. A visszamaradó színtelen olajat absz. éter-petroléter elegyéből kristályosítjuk. 18,0 g {67%) kristályos védett dipeptidésztert nyerünk, melynek op-ja 62—64 Cc; [a] D = —25.6° (c= 1; etanol), R/1 = 0,89; R/ 2 = 0,95. C23H25N2O5CI (444,90) Számított: N 5,1; Cl 8,0 Talált: 5,2 8,0 2. példa: p-Klórbenziloxikarbonil-L-Drolil-L-fenilalanin benzilészter 9,94 g p-klórbenziloxikarbonil - L - prolin absz. teírahidrofurános oldatához —20 C°-on 4,9 ml trietilamínt, majd 3,34 ml klórszénsavmetilésztert csepegtetünk. A nyert vegyesanhinriddel az 1. példában leírt módon 10,15 g L-fenilalaninbenzilészter-hídrokloridból készült észterbázist acilezünk. A feldolgozás után nyert színtelen olajat kloroíorm-petrol éterből kristályosítjuk. Termelés: 13,2 g (72,6%) dipeptid-benzilészter. Op. 88—91 C°. [a]D = —44° (c= 1; kloroform); R/' = 0,92; R/2 = 0,96. C29H29N2O5CI (520,94) Számított: C 66,9; H 5,6; N 5,4; Cl 6,8 Talált: 66,0 5,6 5,7 6,9 3. példa: p-Klórbenziloxikarbonil-L-valil-L-hisztidin metilészter 17,2 g p-klórbenziloxikarbonil-L-valint és 10,14 g diklórhidrátból frissen készített hisztidinmetilésztert oldunk 210 ml absz. dioxáiiban, és az oldathoz 13,2 g diciklohexilkarbodiimidet adunk. A karbamid-származék kiválása azonnal megkezdődik. Éjszakai állás után a géles oldatot felmelegítjük, a karmabid-származékot kiszűrjük, és a szüredékhez 600 ml vizet adunk. A kivált dipeptidésztert szűrjük, szárítjuk. Termelés 21,5 g (81,0%). Op. 159—162 C°; [&\D = —13,0° íc = 2; eíanol): C20H25O5N4CI (436,89) Számított: C 55,0; H 5,8; N 12,8; Cl 8,1 Talált: 55,0 6,2 12,8 8,3 4. példa: p-Klórbenziloxikarbonil-L-valil-L-hisztidin-hidrazid 21,5 g p-klórbenziloxikarbonil - L-valil-L-hisztidinmetilésztert 75 ml absz. metanolban melegen oldunk, majd 9,0 ml hidrazin hidrátot adunk hozzá. 2 órán keresztül visszacsepegő hűtő alatt forraljuk az oldatot, majd egy éjjelen át hidegen állni hagyjuk. Másnap a kivált hidrazidot szűrjük, mossuk metanollal és szárítjuk. Termelés 10,5 g dipeptidhidrazid, melyet etanolból kristályosíthatunk. Op. 171—173 C°. [a]D == —26.0° (c= 0,5; etanol); C19H25O4N7CI (436,89) Számított: C 52,4; H 5,8; N 19.2; Cl 8,1 Talált: 52,5 6,1 19,0 8,4 5. példa: p-Klórbenziloxikarbonil-L-valil-L-hisztidil-L-prolil-L-fenilalanin benzilészter A 4. példában leírt hidrazidból 10,44 g-t oldunk 72 ml n sósavban —5 C°-ra hűtjük, hozzáadunk 160 ml etilacetátot és ezen a hőfokon állandó keverés közben 1,68 g NaN02 -et tartalmazó oldatot csepegtetünk hozzá. További 5 perces keverés után az oldat pH-ját telített szódaoldattal pH 8-ra állítjuk, a vizes részt elválasztjuk, háromszor kirázzuk etilacetáttal, majd állandó hűtés közben az egyesített etilacetátos oldatot háromszor vízzel kirázzuk. Az etilacetátban oldott vizet kifagyasztással távolítjuk el és az így elkészített azid etilacetátos oldatához öntjük a 2. példában leírt p-klórbenziloxikarbonil - L-prolil-L-fenilalanin-benzilészter 12,5 g-jából készült L-prolil-L-fenilalaninbenzilészter etilacetátos oldatát, melyet a védett dipeptidbenzilészterből jégecetes —HBr-ot és tri-
