150735. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Hypertensin-II előállítására
150.735 etilaminos kezeléssel állítottunk elő. Éjszakai állás után az etilacetátos oldatot 3%-os NaHCOa oldattal, majd vízzel kirázzuk és szárítás után az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. A maradék habot petroléterrel eldolgozzuk és szárítjuk. 9,1 g (50,3%) védett tetrapeptidésztert nyerünk igen nyújtott olvadásponttal: 80—140 C°; [a]D = —29,8° (c=l; metanol); R/1 = 0,84; R/ 2 = 0,92; C4oH4r>07 N R Cl (757,26) Számított: 11.1 Talált: 11,3 A teljesen azonos módon készült p-klórbenziloxikarbonil-tetrapeptid metilészter jellemző adatai: op. 80—140 C°, !>]D = —50,6° (e=- 1; metanol); R/1 = 0,84; R/ 2 = 0,95; C34H4t07N,3 Cl (681,17) Számított: C 60,0; H 6,1; N 12,4; Cl 5,2 Talált: 59.7 6,4 12,3 5,2 6. példa: Az 5. példában leírt védett teirapepíidberizilészterből 8,0 g-t 40 ml jégeeetben oldunk és hozzáadunk 40 ml 25%-os jégeeetes B'Br oldatot. Egy óráig 20' C°-on tartjuk, majd 300 ml absz. éterrel kiesapjuk a : tetrapeptidbenzilészterbrömhidrátot, melyet absz. éterrel többször átmosunk, majd 120 ml vízben oldunk. A vizes oldat pK-jál szilárd szódával 8-ra állítjuk és a kivált csapadékot n-butanol : kloroform — 1 : 1 elegyébe átrázzuk. A szerves oldószeres fázist elválasztás után szántjuk, majd vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot petroléterrel eldolgozzuk és szűrjük. így 4,1 g {62,1%) szabad tetrapeptidbenzileszíerí nyerünk, mely kromatográfiásan egységes. Op. 68—70 C°, [*1D== —36,8° (c= 1: kloroform). 7. példa: p-Klórbenziloxikarbonil-L-valil-L-tirozinm etilészter 7,8 g p-klórbenzilpxikarbonil-L-valiiii és 5,3 g L-tirozinmetilésztert oldunk 60 ml absz. tetrabidrof uránban, majd 6,3 g diciklohexíikarbodiimidet adunk hozzá. Szobahőmérsékleten egy éjjelen át tartó állás után a diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, mossuk és a tetrahidrofuránt vákuumban ledesztilláljuk. A maradékot etilacetátban oldjuk és 2 n sósavval, 5%-os NaHCO.-i oldattal, majd vízzel kü'ázzuk. Szárítás után az etilacetátot ledesztilláljuk, és a visszamaradó fehér port petroléterrel eldolgozva leszívatjuk. 9,6 g (76,2%) védett dipeptidésztert nyerünk, mely metanolból kristályosítható. Op. 173—174°, [i) rf = +52" (o= 1; kloroform); Ry2 = 0,84; R/ :! -= 0,97; Ca 3H2 7 Or,N 2C1 (462,92) Számított: C 59,7; H 5,9; N 6,1; Cl 7,7 Talált: 59,9 6,0 6,3 7,8 8. példa: p-klórbenziloxikarbonil-L-valil-L-tirozin-hidrazid A 7. példában leírt védett dipeptidészterből 9,45 g-t oldunk 94,5 ml absz. metanolban és 4,7 ml hidrazinhidráttal 2 órán keresztül visszacsepegő hűtő alatt forraljuk. A kivált kristályokat lehűtés után leszívatjuk, mossuk absz. metanollal és szárítjuk. Termelés 8,25 g (87,2%)) védett dipeptidhidrazid, (op. 230—231°), amit 50%,-os dioxánból vagy absz. etanolból kristályosíthatunk. A tiszta termék op.-ja 240--2420. [a]/;0 == —9,1° (c == 1; jégecet); C02H27O5N4CI (462,94) Számított: C 57,0; H 5,9; N 11,9; Cl 7,7 Talált: 56,8 6,1- 11,5 8,0 9. példa: p-klórbenfiloxikarbonil-L-valil-L-tirozil-L-valil-L-hisztidil-L-prolil-L-fenilalanin-benzilészter A 8, példában leírt hidrazidből 1,4 g-t oldunk 0,72 ml konc. sósav és 7 ml dimetílforrnamid elegyében. Teljes oldódás után 0,21 g szilárd nátriummírit minimális mennyiségű vizes oldatának 2 ml dimetiiformaroiddal hígított elegyét csepegtetjük hozzá —-5 C° alatti hőmérsékleten. 20 percig ezen a hőfokon kevertetjük, majd 1,26 m] trietilamint adunk hozzá (pH-8). Ezután 1,77 g L-valil-L-hisztidil-L-prolil-L-fenilalaninbenzilészter 5 mi dimetilformamidos oldatát adjuk hozzá és szobahőfokon 20 órát állni hagyjuk. Másnap a dimetilíormamid iedesztülálása után nyert maradékot oldjuk butanol-kloroform 1 : 1 arányú elegyében, híg NaHCO^ oldattal, majd vízzel kirázzuk és szárítás után vákuumban szárazra pároljuk. A maradék petroléterrel eldörzsölhető, halvány sárga por. Nyeredék 2,8 g (91,5%) védett hexapeptid benzilészter. Op. 113 C° (felhabzik). !a]D = —32,5" (c-= 2; etanol): Rf! = 0,94; Rf 2 = o,93: 10. példa; L-valil-L-tirozil-L-vali.!-L<-hisztidil-L-p.folil-L-íenilalaninbenzilészter A 9. példában leírt védett hexapeptidbenzilészterből 5,3 g-t 26, 5 mi jégecetes HBr-dal kezelünk. 1 órai rázogatás után a hexapeptidészterdibrómhidrátot absz. éterrel kicsapjuk, többször mossuk absz. éterrel, majd 120 ml vízben oldjuk. A tisztavizes oldat pH-ját szilárd Na2COj-tal pH 7,5-re állítjuk és a kivált anyagot butanol-kloroform 1 : 1 arányú elegyében átrázzuk. Az oldatot mossuk híg NaHCO.3 oldattal, majd vízzel. Szárítás után az oldószert vákuumban ledesztilláljuk-és a maradékot petroléterrel eldolgozva szűrjük. 3,4 g (77,0%) kromatográfiásan egységes hexapeptidbenzilészíerhez jutunk, Op. 98—103 C°. [xfo = --42,4° (e= 1; metanol) Ry1 = 0,78: R/2 = 0,89: CAGHSSOBNK (850,99) Számított: N 13,2 Talált: 13,2
