150517. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a 6-amino-penicillánsav kinyerésére
150.517 3 a vizes fázist 0,9 liter metilizobutilkarbinollal mossuk, majd pH-értékét 0,3 liter 2,5 n ammóniaoldat hozzáadása útján 3,3-ra állítjuk be. Ily módon nyerjük a kristályos 6-amino-penieillánsav első frakcióját, amelyet 15 perc múlva leszűrünk, vízzel mosunk és vákuum alatt megszárítjuk. Ebben az első frakcióban 60 g 6-amino-penicillánsavat kapunk, 89% tisztaságban. A két metilizobutilkarbinolos oldatot egyesítjük és kétszer kivonatoljuk 1,5 pH-értéken 0,45—0,45 liter vízzel. A vizes oldatokat egyesítjük a kristályos anyalúggal és ezt az elegyet 2,5 n ammóniaoldattal 6 pH-értékre semlegesítjük, majd csökkentett nyomás alatt 0,28 liter térfogatra pároljuk be. A koncentrátumot leszűrjük és 3 n sósavoldat hozzáadása útján 3,3 pH-értékre savanyítjuk; ily módon a 6-amino-penicillánsav második frakcióját nyerjük, amelynek mennyisége 12 g, tisztasága 44%. A kapott két frakciót egyesítjük és együtt átkristályosítjuk oly módon, hogy a termék-elegyet 0,15 liter desztillált vízben oldjuk, a pH-értéket 0,08 liter 2,5 n ammóniaoldattal 7-re állítva be. Az oldatot leszűrjük, majd 0,05 liter n-butanollal mossuk: a vizes fázist 0,07 liter 3 n sósavoldattal 3.3 pH-értékre savanyítjuk, majd 30 percig lassan keverjük. A kikristályosodott 6-amino-pinecillánsavat elkülönítjük, mossuk és megszárítjuk. Ily módon 54,4 g tiszta _6-amirio^penicillánsavat kapunk, amely az alábbi főbb fizikai jellemzőket mutatja: op. : 208—210 C° [“] d° = +268° (c = 0,3 n/10 sósavoldatban). 2. példa: Egy 6-amino-penicillánsavat termelő kultúra 100 liter szüredékéhez, amely 305 mg/liter 6-amino-penicillánsavat tartalmaz, 2 liter acetonban oldott 0,51 kg szalicilaldehidet adunk, az 1. példában leírthoz hasonló módon. A kapott vizes oldatot +5 C° hőmérsékletre hűtjük le, majd keverés közben hozzáadunk ‘50 liter etilacetátot; a pH-értéket 2 n sósavoldat hozzáadása útján 2,5-re állítjuk be. 15 perces keverés után az elegyet nyugalomban hagyjuk, majd az etilacetátos réteget külön választjuk és újabb 50 liter etilacetáttal a vizes fázist mégegyszer extraháljuk. A szerves oldószeres kivonatokat egyesítjük és derítjük, majd folytonos visszakeringtetéses bepárlóberendezésben, 20 C°-ot meg nem haladó hőmérsékleten csökkentett nyomás alatt 2 liter térfogatra pároljuk be. E térfogat elérésekor folytonos áramban 4 liter metilizobutilketont viszünk be a készülékbe olyan ütemben, hogy a bepárlás alatt álló elegy térfogata állandó maradjon, anélkül, hogy a hőmérséklet eközben 25 C° fölé emelkednék. E művelet befejezése után a kapott koncentrátumhoz keverés közben hozzáadunk 0,250 liter acetonos 15%-os nátrium-etilhexoát oldatot, majd 15 liter hexánt. A képződött csapadékot elkülönítjük, hexánnal mossuk, majd csökkentett nyomás alatt megszárítjuk. Ily módon 97 g mennyiségben kapjuk a 6-amino-peniciIlánsav szalicil-iminjének nátriumsóját nyers állapotban, amely 18% tiszta 6-amino-penicillánsavat tartalmaz; ez azt jelenti, hogy az iminsó tisztasága 30%. A kapott nyers termék az alábbi fizikai jellemzőket mutatja: op.: (Kofler szerint): 155—165 C° (bomb). = -|-50° + 10° (c= 1 vízben). 50 g fenti nyers imin-nátriumsót 1 liter vízben oldunk, az oldatot +5 C° hőmérsékletre hűtjük le, majd 0,05 liter 3 n sósavoklat hozzáadása útján 1,7 pH-értékre savanyítjuk. Az oldatot ezután leszűrjük, majd kétszer mossuk 0,25—0.25 liter n-butanollal és pH-értékét híg ammónia hozzáadása útján 3,4-re állítjuk be. Az oldatot csökkentett nyomás alatt, 20 C° alatti hőmérsékleten 0,3 liter térfogatra töményítjük be. A kikristályosodó terméket elkülönítjük, vízzel mossuk és megszárítjuk. Ily módon 0,99 g 6-amino-penicillán savat kapunk 93%-os tisztaságban. A butanolos oldatokat egyesítjük és 1,5 pH-értéken kétszer extraháljuk 0,125—'0,125 liter vízzel; a vizes oldatot 3,4 pH-értékig részlegesen semlegesítjük, majd egyesítjük a kristályosítási anyaglúggal. Az elegy térfogatát csökkentett nyomás alatt 0,02 literre csökkentjük és az így kivált 6-amino-penicillánsav második generációt elkülönítjük; 46%ban tiszta 6-amino-penicillánsavat tartalmazó terméket kapunk. Ezt a második generációt vízből kristályosítjuk át, az 1. példában leírthoz hasonló módon; ily módon 2,1 g 6-amino-penicillánsavat kapunk, 82%-os tisztaságban. 3. példa: 420 liter kultúra-szüredéket, amely 500 mg/liter 6-amino-penicillánsavat tartalmaz' az 1. példában leírthoz hasonló módon kezelünk, az aldehid hozzáadása előtt azonban a pH-értéket 7,5-re állítjuk be (aldehidként 4 kg szalicilaldehidet alkalmazunk), etilacetát helyett pedig metilizobutilketont használunk. Végül is 490 g nyers 6-amino-penicillánsav-szalicilimin-dibenziletiléndiaminsót kapunk, amely 74 g tiszta 6-amino-penicillánsavat tartalmaz. A fenti módon elkülönített termékből 311 g menynyiséget az 1. példában leírthoz hasonló módon kezelünk, amikor is, 23,3 g tiszta 6-amino-penicillánsavat kapunk első generációként (ez a termék 210 C°-on bomlás közben olvad), második generációként pedig 18,5 g 65%-os tisztaságú termékhez jutunk. 4. példa: 440 liter kultúra-szüredéket, amely 480 mg/liter 6-amino-penicillánsavat tartalmaz, a 3. példában leírthoz hasonló módon kezelünk, metilizobutilketon helyett azonban diklóretánt alkalmazva. Ily módon 273 g mennyiségben kapjuk a 6-amino-penicillánsav száliciliminjének nyers dibenziletiléndiaminsóját, amely 67 g tiszta 6-amino-penicillánsavat tartalmaz. Ezt a nyers sót átkristályosítással tisztíthatjuk a kövekező módon: 4 g sót 130 ml kloroformban oldunk, az oldatot leszűrjük, majd jégfürdőben lehűtjük. Ezután cseppenként hozzáadunk 130 ml étert, majd 15 perces állás után a kivált kristály óikat leszűrjük, éterrel mossuk és megszárítjuk.
