140848. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fokozott hatású véralvasztó anyag előállítására

Megjelent 1951. évi december hó 1-én. ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS 140848. SZÁM. 3Q h. 1—8, OSZTÁLY. — S-20368. ALAPSZÁM. Eljárás fokozott hatású véralvasztó anyag előállítására. Dr. Szent-Györgyi Albert egyetemi tanár, Budapest, Dr. Laki Kálmán egyetemi m. tanár, Budapest, Dr. Gerendás Mihály egyetemi m. tanár, Budapest és Richter Gedeon Vegyészeti Gyár R. T. Budapest, mint a Servita Gyógyszergyár és Vegyipari RT. budapesti cég jogutóda A bejelentés napja: 1946. december 20. Az orvosi gyakorlatban fontos szerepet játszó véralvasztó anyagot, a trombint, a vérből különítik el. Ez az anyag, melyet rendszerint állati vérből kiindulva kicsapási, elválasztási, elbontasi, tisztítási műveletek sorozata folyamán nyernek, tiszta állapotban fehér por és jellemző tulajdonsága, hogy a vérhez adva, a plazmában oldott alakban levő fibrinogent rostos gélállapotú fibrinné alakítja át. Azt találtuk, hogy a tetszés szerinti módon előállított trombin véralvasztó hatása meglepő módon, nagymértékben fokozható, ha ahhoz, illetve annak oldatához olyan adalékot adunk, melyben szabad — esetleg kötött — hidroxilgyököt tartalmazó szerves vegyületek vannak. E hidroxiltartalmú vegyületek lehetnek alifásak, pl. alifás alkoholok, mint etilalkohol, de eredménnyel alkalmazható számos különféle tiqusú aromás vegyület is, hacsak a molekulában OH-csoport vari. Különösen előnyös aktiváló hatást mutatnak az egy- vagy többéríéku fenolok, főként a kétértékű fenolok, pl. pirokateehin, mimellett a molekula az OH-csoportokon felül egyéb helyettesítéseket is tartalmazhat, sőt alifás kötésű OH-csoportja is lehet, mint amilyenek pl. a tiroxin, adrenalin. A véralvasztó hatás továbbá azáltal is fokozható, ha az előbbiek szerint aktivált vagy nem aktivált trombiníkészítményhez, kálciumsőt, illetve vizes kálciumsó-oldatot adunk. A kálciumsó hozzáadása történhet 'eílőzőleg, de lehetséges a hozzáadagolás közvetlenül a trombin-készítmény felhasználása előtt is. A fentismertetett aktiváló eljáráshoz használt trombint ugyancsak a találmány szerint igen előnyösen az alábbi módon állíthatjuk elő. A célszerűen állati eredetű, frissen kitermelt vérplazmát azonnal véralvadást gátló oldatba csurgatjuk, majd kalciumszegény vízzel, azaz oxaláttal csapadékot nem adó vízzel, pl. esővízzel vagy hólével, legalább 5-szörösére, célszerűen 10—15-szörösére felhígítjuk. Ezután sav hozzáadásával kicsapunk olymódon, hogy a savoidatot előzetes próbákkal olyan optimális pH-értékre állítjuk be, amelyik a használt vérből a legnagyobb protrombin tartalmú csapadékot adja. E csapadékban ' a véralvasztó anyagnak csupán az előanyaga, az ú. n. protrombin van jelen. Azt találtuk, hogy a protrombinnak a következő eljárási szakaszban trombinná való átalakításához — szemben az eddigi eljárással — nem szükséges a rendszerhez kinázkészítményt adnunk, különösen akkor, ha kicsapósavként ásványi ^savat, célszerűen sósavat használtunk. A továbbiakban úgy. járunk el, hogy a kapott csapadékot elkülönítés után kálciummentes, gyengén lúgos, legalább 7,2 pH-jú sóoldatban, pl. kalciummentes Ringer-féle oldatban feloldjuk, majd egyszerűen kálciumsóoldatot adunk hozzá. E kísérleti körülmények között a protrombin simán trombinná alakul át, amely folyamat befejezésekor az esetleg keletkezett fibrinalvadékot eltávolítjuk és utána a trombint kicsapószerakkel, pl. ketonokkal az oldatból kicsapjuk. A csapadékot kimosás után megszárítjuk. A kapott nyers trombin még tisztítható olyképpen, hogy abból a trombint ismételt, desztillált vizes oldással kioldjuk, az oldhatatlan résztől elválasztjuk, a közeget megsavanyítjuk, az eközben keletkező csapadékot pl centrifugálássa! eltávolítjuk és a visszamaradó tiszta oldatból a trombint aeetonna] kicsapjuk.