140848. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fokozott hatású véralvasztó anyag előállítására
140848. /. példa. 0,1 g tetszés szerinti eredeti trombinport, 10 cm3 desztillált vízbeü oldunk. A kapott oldatot 5—5 cm3 -nyi részekre osztjuk és az egyik próbában 10 mg. pirokatechint oldunk. Az oldatok aktivitása azt mutatja, hogy a pirokatechint nem tartalmazó oldat 60 mp, a pirokaetchint tartalmazó oldat pedig 20 mp alatt alvaszt, vagyis a találmány szerinti eljárással készült oldat háromszoros hatásosságot mutat. 2. példa. Az 1. példa szerinti trombinoldat egyik felében annyi CaCl2 -ot oldunk, hogy a koncentráció 1/40 mol/1 legyen. A kálciumsót tartalmazó oldat 30 mp, az ellenőrző oldat 60 mp alatt álvaszt, tehát a kálciumsóadalék kétszeres hatást eredményez. A kálciumsó mellett természetesen az 1. példa szerinti aktiváló anyagot is alkalmazhatjuk. 3. példa. Az 1.—2. példa alapanyagául szolgáló trombint az alábbiak szerint állítjuk elő. 50 1 frissen kitermelt és oxalátoidattal az alvadástól megvédett vérből az alakos elemeket centrifugálással eltávolítjuk, llymődon- 25 1 plazmához jutunk. A plazmát sósavval savanyítjuk meg és a szokásos módon próbákkal állapítjuk meg, hogy mekkora az a sósavmennyiség, amely a legnagyobb mennyiségű csapadék keletkezésére vezet, ha a desztillált vízzel 10-szeresre hígított oldatot sósavval megsavanyítjuk. Ez a mennyiség a Jeten esetben 500 cm3 n sósav. Savanyítás után a plazmát 10-szeres mennyiségű desztillált vízbe csurgatjuk, a csapadékot centrifugálás útján összegyűjtjük, az oldattól elkülönítjük, majd 6,5 1 kálciummentes Rmger-féle oldatban feloldjuk. E protrombin-oldathoz 225 cm3 2%-os CaCl 2 oldatot adunk. A trombinképződés 3 perc múlva megindul és maximumát a 8.—10. percben éri el. Az esetleg képződött alvadékot összetörjük és a trombinlevet kisajtoljuk. Ebből a léből a trombint 8 1 acetonnal kicsapjuk. A csapadékot centrifugán összegyűjtjük, majd 1,5 1 száraz acetonnal összekeverve ismét centrifugaijuk. A csapadékot megszárítjuk, a kapott száraz por tartalmazza a trombint. E porból mozsárban való dörzsölgetéssel a trombint dsztillált vízzel kioldjuk, mégpedig több, egymásután következő kezeléssel, úgyhogy pl. 20 g száraz port először 100, azután 60, 40, 50, 50 cm3 desztillált vízzel kivonatolunk. A trombint tartalmazó vizes oldatokat dekantáljuk, összegyűjtjük és a bennelévő zavarosságtól centrifugálással megszabadítjuk. Az így kapott trombinoldathoz 1/50 rész 5 pH-jú normál acetátpuffer-oldatot adunk. Elkeverjük és a keletkezett, trombint nem tartalmazó csapadékot centrifugálással eltávolítjuk. A trombin-tartalmú oldathoz kétszeres mennyiségű acetont adunk, azzal összekeverjük és hideg A kiadásért felel a Tervga: szobában éjjelen át a csapadékot leülepedni hagyjuk. Az acetonos oldatot leöntve, a csapadékot centrifugálással elkülönítjük, Száraz acetonban kimossuk és megszárítjuk. E tisztítási módszerrel elérhető, hogyha a kiindulási por mg-ként 2 koagulációs egységet tartalmazott, akkor a tisztítás után nyert - por mg-ként 50—100 koagulációs egységet tartalmaz. A tisztulás tehát 5ft-szeres, míg ugyanaikkor a kitermelés legalább 60%. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás fokozott hatású véralvasztő anyag előállítására, azzal jellemezve, hogy trombinhoz, illetve annak oldatához hidroxil-gyököt tartalmazó szerves vegyületeket adunk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy hidroxiltartalmú vegyületként alifás alkoholokat, előnyösen etilalkoholt használunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy hidroxiltartalmú vegyületként egy vagy többértékű fenolokat, főként kétértékű fenolokat, előnyösen pirokatechint, vagy fenolszármazékokat, pl. tiroxint használunk. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganato^sítási módja, azzal jellemezve, hogy hidroxil" tartalmú vegyületként egyidejűleg alifás és aromás hidroxil-csoportokat tartalmazó vegyületeket, pl. adrenalint használunk. 5. Az 1.—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás változata, azzal jellemezve, hogy hatástfokozó adalékként az 1.—4. igénypont bármelyike szerinti eljáráshoz használt adalékok mellett vagy helyet kálciumsót használunk. 6. Az 1.—5. igénypont bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módija, azzal jellemezve, hogy a hatástfokozó adalékot közvetlenül a trombinkészítmény felhasználása előtt alkalmazzuk. 7. Eljárás az 1.—6. igénypont bármelyike szerinti eljáráshoz használt trombin előállítására, azzal jellemezve, hogy a célszerűen állati eredetű, frissen kitermelt vérplazmát véralvadást gátló oldatba csurgatjuk, oxaláttal csapadékot nem adó vízzel, pl. desztillált vízzel legalább 5-szörösre, célszerűen 10—15-szörösre felhígítjuk, ezután ásványi sav, pl. sósav hozzáadásával kicsapunk, a csapadékban lévő protrombint kálciummentes, gyengén lúgos, legalább 7,2 pH-jú sóoldatban feloldjuk, majd kálciumsóoldat hozzáadásával, kináz-készítmény hozzáadásának mellőzésével, a protrombjnt trombinná alakítjuk át, melyet kicsapószerekkel, pl. ketonokkal az oldatból kicsapunk, kimosunk és megszárítunk. 8. A 7. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a kapott nyers trombint vízzel kioldjuk, az oldatot megsavanyítjuk, a keletkező csapadékot eltávolítjuk és a visszamaradó tiszta oldatból a trombint acetonnal kicsapjuk, kimossuk és megszárítjuk. iasági Könyvkiadó vezetője. Újpesti nyomda. — 4516. — Fv. a nyomda igazgátója.
