A Magyar Hidrológiai Társaság XXIV. Országos Vándorgyűlése (Pécs, 2006. július 5-6.)

2. szekció: A VÍZIKÖZMŰVEK HELYZETE - Dr. Vasdinyei Rita, Bogyóné Asztalos M.,Törökné Kozma A., Fodor József Országos Közegészségügyi Intézet: Cianobaktériumok toxintermelésének vizsgálata molekuláris módszerekkel

Anyag és módszer A vizsgálathoz felhasznált cianobaktérium törzsek 1. táblázat. Cianobaktérium törzsek Faj Törzs jele, OKI száma C. raciborskii NIVA; OKI2 C. raciborskii NIVA; OKI62 C. raciborskii NIVA; OKI122 C. raciborskii „Székesfehérvár”; OKI5 C. raciborskii „Székesfehérvár” ; OKI15 C. raciborskii BGSD 266; OKI42 C. raciborskii ACT 9205; OKI121 C. raciborskii AWT 205; OKI191 Plankthotrix V/4262/64; OKI 259 Plankthotrix 3033; OKI236 Aphanizomenon ovalisporum „Izrael” ; OKI102 Aphanizomenon flos-aquae 2281; OKI141 Aphanizomenon flos-aquae 2282; OKI142 Aphanizomenon „Zámoly”; OKI60 A törzsek cylindrospermopsin-termelésének mérése A cylindrospermopsin mennyiségi meghatározását liofilizált biomasszából, HP 1090/II. típusú HPLC készülékkel végeztük. A készülékhez diódasoros detektor csatlakozik. Az elválasztást Teknokroma C18 Nucleosil 100 (250x4) típusú oszloppal, ODS Guard Cartridge (10x4mm), 5µm típusú előtétoszloppal, 40°C-on, 0,5 ml/perc áramlási sebességgel, izokratikusan, 5% metanol / 95% 0,1% trifluorecetsav eluensekkel végeztük. A cylindrospermopsint 262nm-en detektáltuk. A DNS és az RNS izolálása A DNS izolálása Master Pure

TM DNA Purification Kit (Epicentre), az RNS izolálása Master Pure

TM RNA Purification Kit (Epicentre) segítségével, a gyártó utasításait betartva történt. PCR: A PCR-hez felhasznált primerek az 2. táblázatban, a reakcióelegy összetétele a 3. táblázatban látható. Referenciatörzsként a nagymértékben cylindrospermopsin-termelőnek bizonyuló C. raciborskii AWT205 és A. ovalisporum „Izrael” törzseket alkalmaztuk. 2