Hidrológiai Közlöny, 2015 (95. évfolyam)
2015 / 5-6. különszám - LVI. Hidrobiológus Napok előadásai
97 lyi horgászegyesület honlapja. A tudósítások szerint különböző méretű és fajú halak (pl. Sander lucioperca, Hy- pophthalmichtys nobilis R. Ctenopharingodon idella Valenciennes, Cyprinus carpio L., Silurus glanis L.) tetemeiből több mint egy tonnát gyűjtöttek össze, de beszámoltak a parton elhullott állatok (macskák) maradványairól is. A tározóból vett vízminták a mikroszkópos morfológiája (fonalas cianobaktérium, terminális heterociszta) Cylindrospermopsis raciborskii tömegtermelését (3.2 x 104 filament/ml) bizonyította (1. ábra C.). A 2iápif §1ípSs sjh \ /t, ' \ - ’ . ábra A. C. raciborskii hazai előfordulási adatok (Padisák 1997, Vasas és mtsai, 2010 alapján); B. Vízvirágzást követő halpusztulás 2012 november 12-én a Fancsika I tározóban; C. A tározóból izolált Cylindrospermopsis raciborskii filamentumok 2. A Fancsika tóból származó minták idegredszeri hatásai A FKM B DJ, | 20 mV MJHVrW "ÍÖs Kontroll FKM mosás 2. ábra. A. Helix pomatia idegsejtjein a Fancsika tározóból származó (FKM) minta és a lokálisan injektált acetilkolin (ACh) egyaránt serkenti a sejt spontán működését. B. Az acetilkolin által kiváltott választ (kontroll) az FKM kivonat (0,25 mg szárazanyag/ml) reverzibilisen csökkenti. Az RPas sejtek felszínére mikropipettával juttatott (50 -100 pl, 0,5-1 mg szárazanyag/ml) Fancsika környezeti minta (FKM) valamint az algavirágzás során elkülönített C. raciborskii izolátum (FLI) vizes kivonata egyaránt az acetilkolinhoz hasonlóan depolarizálta a neuronmemb- ránt és fokozta a neuronok spontán működését, vagyis növelte az akciós potenciálok frekvenciáját (2. ábra A.). Az acetilkolin által kiváltott serkentő membránválasz (depolarizáció amplitúdója) ugyanakkor kisebb volt az FKM kivonat jelenlétében (2. ábra B.). Az eredmények alapján feltételezhetjük, hogy a Fancsika minta neuroak- tív komponensei a neuronmembrán acetilkolin recaptorain hatnak, kapcsolódásukkal egyrészt acetilkolin válaszhoz hasonló (agonista) membránhatást fejtenek ki, másrészt gátolják újabb ACh molekulák kapcsolódását a receptorhoz (antagonista hatás). A Fancsika tározó vízmintájából készített (FKM) kivonat az izolált idegrendszert tartalmazó kamrába 10-15 percig perfuzióval applikálva (0,05 szárazanyag mg/ml küszöbkoncentrációtól) csökkentette a sejtek acetilkolin válaszát, és 1 mg/ml koncentrációnál a válasz csaknem teljes gátlását okozta (3. ábra. A). Ugyanilyen hatása volt az algavirágzás során a vízből izolált és laboratóriumban tenyésztett C. raciborskii hasonlóan készített (FLI) vizes kivonatának is (3. ábra B). Korábbi vizsgálataink már megelőzően kimutatták a balatoni, 1995-ben történt C. raciborskii algavirágzás során gyűjtött és az MTA ÖK Balatoni Limnológiai Intézetében izolátum- ként azóta is fenntartott ACT 9505 törzs kivonatának (3. ábra C) illetve a kereskedelemben kapható Oscillatoria sp. PCC 6506 (anatoxin-a ill homoanatoxin-a neurotoxi- nokat termelő) törzsének ugyancsak ACh agonista és az ACh választ gátló hatását (Vehovszky és mtsai, 2012). A gátlási tesztek eredményeinek dózis-hatás viszonyai a- lapján az egyes minták hatásosságát is összehasonlíthattuk. A Fancsika tározóból készített (FKM) minta gátló hatása (EC50=0,397 mg/ml) a balatoni (ACT 9505) kivonathoz volt azonos nagyságrendű (EC5o = 0,734 mg/ml), de mindkettő kiesbb mértékben gátolta az ACh választ mint a kereskedelemben kapható, bizonyítottan neuroto- xint termelő PCC 6506 törzs kivonata (EC50=0,073 mg/ ml). ABC kontroll FKM mosás kontroll FLI mosás kontroll ACT mosás mértékben csökkenti az ACh válasz amplitúdóját, majd fiziológiás oldattal történő kimosás részben visszaállítja a választ. A Fancsika (FLI, 0,25 mg/ml) és balatoni (ACT, 0,5 mg/ml) C. raciborskii izolátumok kivonatai hasonlóan csökkentik az acetilkolin választ (B, C). Az ábrákon az ACh válasz amplitúdókat a kontroll (fiziológiás oldatban mért) válasz százalékában fejeztük ki. Összefoglaló, következtetések Megfigyeléseink alátámasztják azt a feltételezésünket, hogy a Balatonban 1995-96 folyamán ill. illetve Fancsika tározóban 2012-ben algavirágzást okozó C. raciborskii törzsek egyaránt neuroaktív hatóanyagokat termelnek, melyek nagy valószínűséggel azonos targeten, a neuronok acetilkolin receptorain (AChR) fejtik ki hatásukat. Az acetilkolin receptorokon ható neurotoxinok: anato- xin-a, homoanatoxin-a más fonalas cianobaktériumok ( Anabaena, Aphanizomenon, Oscillatoria, Cylindrosper- mum stb) egyes európai törzseiben bizonyítottan jelen vannak (Chorus és Bartram, 1999), de C. raciborskii által termelt anatoxin-a vagy homoanatoxin-a jelenlétét tudomásunk szerint még egyetlen esetben sem detektáltak