Hidrológiai Közlöny 2007 (87. évfolyam)

6. szám - XLVIII. Hidrobiológus Napok: Európai elvárások és a hazai hidrobiológia Tihany, 2006. október 4–6.

29 HIDROLÓGIAI KÖZLÖNY 2007. 87. ÉVF. 6. SZ. A cianobaktérium és a szeszton liofilizátumokból 0,9 "Zoos NaCI alapú vizes extraktumot készítettünk, részben ultrahangos feltárással, részben többszöri fagyasztás/ kiolvasz2. táblázat. A Balatonból és a Kis-Balatonból gyűjtött tással. A sejtek feltárásának mértékét mikroszkópos vizsgálattal ellenőriztük. szeszton minták domináns cianobaktérium fajai Gyűjtés időpont Gyűjtési hely Domináns fajok 2006.07.04 Siófoki-medence (Tihany, MTA BLK.I Kisöböl) Microcystis sp. 2006.07.10 Keszthelyi-medence (Máriafürdő) Aphanizomenon sp., Cyl. raciborskii, Anabaena sp. 2006.08.11 Keszthelyi-medence (tóközép) Aphanizomenon sp., Cyl. raciborskii, Oscillatoria sp. 2006.08.22 Kis-Balaton (Kazetta) Microcystis sp., Aphanizomenon sp. 2006.08.22 Kis-Balaton (Kányavár) Aphanizomenon sp., Microcystis sp. 2006.08.22 Kis-Balaton (Pogányvár) Aphanizomenon sp., Microcystis sp. 2006.08.24 Szigligeti-medence (Fonyód) Aphanizomenon sp., Cyl. raciborskii A teszteket 96 férőhelyes „microplate" rendszerben végeztük. Az algatörzsek és a terepminták toxikusságát tisztított cylindrospermopsin, és microcystin-LR, valamint cylindrospermopsint termelő ausztrál Cylindrospermopsis raciborskii (AQS másnéven CR3) törzs (Valério és mtsai, 2005) toxikusságának összehasonlításával minősítettük. A tisztított toxin, valamint az algakivonatok 24 órás LC

5

0 értékét Finney (1971) probit analízise alapján határoztuk meg. Eredmények és értékelésük A referencia anyagok általunk meghatározott 24 órás LC

5O értékei közel azonosak voltak az irodalomban Artemia salina teszt esetén közölt toxicitási értékekkel (3. táblázat; Metcalf és mts., 2002). 3. táblázat. Tisztított algatoxinok, valamint a AQS (CR3) Cylindrospermopsis raciborskii törzs 24 órás LC

5

0 értékei Minta LC50 érték (24 h) Metcalf és mts. Jelen vizsgálat (2002) Tisztított toxinok (|ig ml"

1) Cylindrospermopsin 4,48 4,35 Microcystin-LR 4,58 5,21 Cylindrospermopsint termelő Cyl. raciborskii törzs* (mg ml 1 liofilizátum) AQS (CR3) 3,24 3,52 A természetes vízvirágzások során gyűjtött minták közül egyetlen, a tihanyi kisöbölből származó minta bizonyult toxikusnak. A kivonat 24 órás LC

5o értéke 6,2 mg liofilizátum ml"

1 kezelési médium volt. A toxikusság időlefutásának nyomon követése során kitűnt, hogy míg a döntően hepatotoxint termelő törzsek esetén a legnagyobb pusztulási arány 20 óra kezelést követően jelentkezett, az Anabaena spiroides ACT 9607 törzs esetén már a kezelés negyedik órájában a tesztállatok 56 %-a elpusztult (1. ábra). Az eredmény a törzs neurotoxikus hatását valószínűsítette. • Anabaena spiroides ACT 9607 * Aphanizomenon flos at/ue vegyes - A — Cylindrospermopsis raciborskii ACT 9503 100>> c rt 803 60N tn 3 a 400 £ 200 10 15 kezelési idő [h] 20 25 CSIRO gyűjtemény, 2004 A sórák (Artemia salina) akut toxicitási teszt alkalmazásával a Kis-Balatonból izolált Anabaena spiroides ACT 9607, valamint a Balatonból izolált Aphanizomenon flos-aquae vegyes tenyészet, az Aphanizomenon flos-aquae ACT 9605 és a Cylindrospermopsis raciborskii ACT 9503 tenyészetek esetében észleltünk erőteljes toxikusságot. Mérsékelt toxikusságot mutattak még az Anabaena aphanizomenoides ACT 9601 és a Cylindrospermopsis raciborskii ACT 9504 törzsek (4. táblázat). 4. táblázat. A sórák teszt alapján toxikusnak bizonyuló cianobaktérium törzsek 24 órás LC

5

0 értékei Törzs Cianobaktérium faj LC

5„ (24 h) (mg ml') ACT 9607 Anabaena spiroides 4,61 ACT 9601 Anabaena aphanizom. 10,30 ACT 9605 Aphanizomenon flos-aquae 6,15 Vegyes Aphanizomenon flos-aquae 4,52 ACT 9503 Cyl. raciborskii 5,27 ACT 9504 Cyl. raciborskii 12,70 1. ábra.. A sórák naupliák pusztulási arányának időfüggése az expozíció során A cianobaktérium kivonatokat a rendelkezésünkre álló analitikai ill. immunkémiai eljárásokkal saxitoxinok (Gerdts és mts., 2002), valamint anatoxin-a(s) azonosítására (Henriksen és mts., 1997) alkalmazott specifikus eljárásokkal is vizsgáltuk. A saxitoxinok csoportjához tartozó alkaloidákat egyetlen mintában sem észleltünk, ellenben az anatoxin-a(s) kimutatására alkalmazott in vitro acetilkolin észteráz gátlás vizsgálat három törzs esetében pozitív eredményt adott. Az Anabaena spiroides ACT 9607 törzs kivonata (4,6 mg lifiolizátum ml"

1) 50-80 %os enzimatikus gátlást eredményezett. Kisebb mértékű 35- ill. 40 %-os gátlást még két törzsnél észleltünk: a Cylindrospermopsis raciborskii ACT 9504 és Anabaena aphanizomenoides 9601 törzsek esetén, ami ugyancsak egy az anatoxin-a(s) toxinhoz hasonló alkaloida termelését valószínűsíti. Az általunk vizsgált törzsek közül az Anabaena aphanizomenoides ACT 9601, valamint az Aphanizomenon flos-aquae ACT 9605 toxicitását korábban Hiripi és munkatársai is tesztelték (1998) a szabvány egérteszt és az afrikai vándorsáskán (5. táblázat). A toxicitási adatok összevetése során kitűnt, hogy a sórák teszttel meghatározott 24 órás LC50 értékek az afrikai vándorsáska teszttel megegyező különbségeket mutat a két törzs toxikusságában, mindkét gerinctelen ellentétesen reagált a kivo-