Hidrológiai Közlöny 2000 (80. évfolyam)
5-6. szám - XLI. Hidrobiológus Napok: "Vízi ökoszisztémák (taxonómia, biodíverzitás, biomonitorozás, élőhelyek frakmentációja, inváziós fajok biológiája)" Tihany, 1999 október 6-8.
351 Thamnotoxkit teszi eredményei között a korreláció igen erös jelenleg vizsgálati anyagunkban (r:0,%7), míg az egérteszt és össz-microcystin tartalom között sokkal gyengébb (r:0,473), hasonlóan a Thamnotoxkit teszt és össz- microcystin között a korrelációs együttható csak 0,680. Úgy tűnik, hogy a cianobaktériumok vizes kivonatai a microcystineken kívül tartalmaaiak még olyan vegyületeket, amelyek toxikusak mind az egerekre, mind a kisrákokra. A 8. német Planklolhrix agardhii minta esetében például a toxicitás sokkal kifejezettebb, mint az össz-microcystin tartalom alapján számított érték. A toxicitás alapján a 8. minta 7,69 mg/g MC-LR-t kellene tartalmazzon, a valóságban azonban 3,60 mg/g összmicrocystint tartalmaz. A 3. táblázatban összefoglaltuk az egérteszt, a Thamnocephalus platyurus teszt, a májsejt teszt valamint a HPLC analízis eredményeit. A brazil mintákat (4 5. minta) vizsgálták fehér mustár teszttel (BGST) is. A BGST teszt érzékenysége egy nagyságrenddel kisebb, mint a Thamnotoxkit teszt érzékenysége (Padisák et al., 1998). Jelen vizsgálatokban a májsejt teszt egy nagyságrenddel érzékenyebb volt, mint a Thamnotoxkit teszt, azonban a neurotoxinokat nem jelzi, míg a Thamnotoxkit teszt érzékeny a neurotoxinokra is (Törökné, in press, b). Az irodalmi adatokat átnézve a következőket tudjuk összegezni (-/. táblázat) tiszta MC-LR-rel szembeni érzékenységre: A zebrahal embriók érzékenysége 3 nagyságrenddel kisebb, mint a Thamnocephalus platyurus lárváké. A microcystin-LR-rel szembeni két legérzékenyebb teszt a májsejt kultúra teszt és a Thamnotoxkit teszt. 3. táblázat Az egérteszt, a Thamnotoxkit teszi, a májsejt teszt és HPLC analízis eredményeinek összehasonlítása, (n. v.: nem vizsgáltuk) Table 3: Comparison of mouse-test, Thamnotoxkit-test, rat hepetocyte test and HPLC analyses (n. v. : not tested) MLDaz l'hamnot MájÖsszSt Szervezet egértesztox teszt sejt microben LC* teszt cvstin (mg/g) (mg/mL) (mg/m I,) (mg/g) t Microcystis aeruginosa 20 0,22 n.v. 1.71 2 Microcystis aeruginosa 50 0.89 n.v. 6.60 3 Microcystis aeruginosa 25 0.49 n.v. 780 6 Microcystis sp n.v. 1.65 0.22 1.56 7 Planktothrix aghardii n.v. 0.53 0.08 3.60 8 Planklolhrix rubescens n.v. 0.25 0.026 2.40 4. táblázat Különböző teszt metodikák érzékenységének összehasonlítása microcystin-LR-rel szemben. Table 4: Comparison of sensitivity different test methods for microcystin-L R Szervezet LC»or EC» in pg/mL References Thamnocephalus platvurus 0.1 Törökné (in press, a) Sinapis alba (fehér mustár) 3.0 Kós el at (1995) 3 Daphnia faj 9.6-21.4 DeMott e/a/. (1991) Diaplomus birgei (Copepoda) 0.45-1 DeMott et al. (1991) Danio rerio (zebrafish) embriók > 10 Oberemm et al. (in press' Patkány májsejt kultúra 0.2 Fastner et al. (1995) Irodalom Codd G. A. and Bell S. G. (1998). Toxic Cyanobactena - The Global View, in: Proceedings of the 1998 Hater TECH Meeting, Brisbane, Australia, Apr. 27-28.AWWA, Artarmon, NSW, Australia, pp. 1-14 DeMott W.R., Zhang QX, Carmichael WW. (1991). Effects of toxic cyanobacteria and purified toxins on the survival and feeding of a copepod and three species of Daphnia. Limnology and Oceanography 36(7): 1346-1357. Falconer I. R. (1993) Measurement of toxins from blue-green algae in water and foodstuffs In: Algal Toxins in Seafood and Drinking Water, I.R.Falconer (ed.), Academic Press, London, pp 165-175. Fastner J., Heinze R., and Chorus I. (1995). Microcystin-content hepatotoxicity and cytotoxicity of cyanobacteria in some German waterbodies. Wat. Sei. Tech. 32(4), 165- 170. Jones G. J., Falconer I. F. and Wilkins R M. (1995). Persistence of cyclic peptide toxins in dried cyanobacteria! crusts from Lake Mokoan, Australia. Envirom. Toxicol. Water Qua! 10, 19-24. Kós P., Gorzó Gy., Surányi Gy., Borbély Gy. (1995). Simple and efficient method for isolation and measurement of cyanohacterial hepatotoxins by plant tests (Sinapis alba L). Analytical Biochemistry 225, 49-53. ' Kotak B. G., Keneftck S. /.., Fritz D. I... Rousseaux C. G., Prepas F.. E . Hrudey S. E. (1993) Occurrence and toxicological evaluation of cyanohacterial toxins in Alberta lakes and farm dugouts. - Water Research 27, 500-506. Lawton L A., Edwards C„ CoddG. A. (1994). Extraction and high- performance liquid chromatographic method for the determination of microcystins in raw and treated waters. Analyst 119, 1525-1530. Namikoshi M„ Sun F., Choi B. W„ Rinehart K. L., Carmichael W. W. , Evans If. R. and Beasley, V. R (1995) Seven more microcystins from Homer lake cells: application of the general method for structure assignment of peptides containing dehydroamino acid units. J. Organic Chemistry 60, 3671-3679. Oberemm A., Becker G. A., Codd G.A., Steinberg C. (1999). Effects of cyanohacterial toxins and aqueous crude extracts of cyanobactena on the development offish and amphibians Envir. Toxic, in press Padisák J., Barbosa F. A. R., Borbély G„ Borics G., Chorus I., Espindola E. L. G„ Rocha O., Törökné A. A... Vasas G. (1998). Phytoplankton composition, biodiversity and a pilot survey of toxic cyanoprokaryotes in a large cascading reservoir-system (Tiet? basin, Säo Paulo State, Brazil) Verh. Internat. Verein. Limnol. 27. Törökné K. A., Nagy G. (1997): Rutinteszt elővizsgálatok cianobakténum (kékalga) toxinok detektálására Hidrológiai Közlöny 77: 71-72. Törökné K. A. (1999a). A new culture-free microbiotest for routine detection of cyanohacterial toxins. Envirom. Toxicol. Water Qual. in press Törökné K. A. (1999b). The potential of the Thamnotoxkit microbiotest for routine detection of cyanobacterial toxins. In: Toxicity Screening and Biomoniloring, Guido Persoone, Colin Janssen, Wim de Coen (eds), Publisher Klüver Academic/Plenum Press, in press Vasconcelos V. KI. , Sivonen K., Evans W. R., Carmichael W. IV., Namikoshi M. (1995) Isolation and characterization of microcystins (heptapeptide hepatotoxins) from Portuguese strains of Microcystis aeruginosa fCütz. emend Elekin. Archiv fur Hydrobiologie 134, 295305. Vezie C„ Brient L., Sivonen K., Betru Cr., Lefeuvre J.-C., Salkinoja-SalonenM., (1997). Occurrence of microcystins containing cyanobactcnal blooms in freshwaters of Brittany (France) Archiv fur Hydrobiologie 139,401-413. Toxicity of some cyanobacterium populations from different countries Törökné-Kozma, A„ László, E., Chorus, I 2, Fastner, J., 2, Heinze, R., Padisák, J., Barbosa, F. A. R. 4 Abstract: The Thamnotoxkit F™ was evaluated for detecting cyanobacterial toxins as they may be hazardous to human health if they reach drinking water networks or if people are exposed through recreational activity. This test kit is a 24-hour bioassav using larvae of the freshwater anostracan crustaccan Thamnocephalus platyurus hatched from cysts. Nine freeze-dried Microcystis and Planktothrix sp. samples from freshwaters of Hungary, Germany and Brazil were tested with the Thamnotox test, rat hepatocytc test, mouse test and analysed for microcystins by high performance liquid chromatography (HPLC). It can be concluded that the Thamnotox test is an alternative simple, cost-effective method that may replace the mouse bioassav used previously for determination of cyanobacterial toxicity. Keywords: cyanobacterial toxins, microcystins, Thamnocephalus platyvrus, monitoring