Fogorvosi szemle, 2007 (100. évfolyam, 1-6. szám)
2007-10-01 / 5. szám
262 FOGORVOSI SZEMLE ■ 100. évf. 5. sz. 2007. nőtt populáció csak igen kis százaléka az, amely semmilyen parodontológiai érintettségben nem szenved, gyakorlatilag nemtől függetlenül (1A. ábra). Az eredmények azt is világosan mutatják, hogy az állapot az életkor előrehaladtával egyre romlik (76. ábra). A hypodontia egy szintén a Semmelweis Egyetemen végzett vizsgálat szerint ugyancsak a népesség jelentős részét érinti. A közel 1900 gyermek és serdülő részvételével elvégzett reprezentatív vizsgálat eredményei szerint a bölcsességfogakat nem számítva az esetek 16%-ában találtak csírahiányt, még a legalább hat fog hiányára kiterjedő oligodontia is több mint 1% fölötti értéket mutatott [9], Ezek a nemzetközileg elfogadott kritériumoknak megfelelő epidemiológiai munkák jó A. Átlagos CPITN értékek Magyarországon OfKO.Ol, 2p<0.1, 3p<0.0001) %-os megoszlás a populációban maximum CPI fokozat szerint méretű fragmentumból áll. Közel 70 mintából izoláltunk DNS-t a parodontitis és hypodontia vizsgálatokban. Ezek a DNS-ek mind felhasználhatóak további vizsgálatokban, mivel a kontrollként alkalmazott konstitutívan expresszálódó génnel, a ß-actinnal végzett vizsgálatban mind pozitív eredményt adtak. A polimorfizmus-vizsgálatainkat minden esetben az irodalomban már korábban leírt kísérleti körülményekhez hasonlóan kezdtük, ezt tekintettük alapnak. Az ellenőrzések során több leírt primer oligonukleotid szekvenciája nem bizonyult pontosnak, ezért azokat a tényleges nukleotid szekvenciának megfelelően megváltoztattuk. Több helyen a PCR-reakciók körülményei sem voltak megfelelőek, ezért azokon is változtattunk. 1. ábra. Reprezentatív felmérés eredménye a felnőtt magyar népesség parodontális állapotáról a parodontális állapot nemek szerinti megoszlása (A.), illetve az életkor függvényében (B.) alapot szolgáltatnak a továbblépésre, molekuláris epidemiológiai kutatások folytatására. Ilyen kutatások megalapozására tesz kísérletet a jelen tanulmány. A genetikai vizsgálatok templátját minden esetben a DNS adja. Ezért is fontos, hogy megfelelő mennyiségű, intakt DNS-t izoláljunk a nyálkahártyakaparék-mintákból. Vizsgálataink korai szakaszában a minták egy része sérültnek bizonyult. A DNS degradáció kivédésére módosítottunk a mintavételi és tárolási protokollon, és minden esetben a mintavétel után a kaparékmintákat a feldolgozásig -20 °C-on tároltuk. A 2. ábra 1., 2. és 3. jelű mintái egy-egy sérült DNS képét mutatják, míg a 4., 5. és 6-os minták a módosított protokoll szerinti ép, jó minőségű DNS-eket mutatják az izolálást követően. A polimorfizmus vizsgálatokra alkalmas intaktnak tekinthető DNS mérete 20-30 kilobázis körül van. A degradálódott DNS, mint az a képen is megfigyelhető az 1., 2. és 3. mintáknál, sok kisebb így mindegyik vizsgált polimorfizmus kimutatására alkalmas reakciót optimalizáltunk. Bizonyos esetekben a restrikciós enzimek helyett is más enzimet választottunk, mert azokat alkalmasabbnak, specifikusabbnak találtuk. Minden vizsgált potenciális SNP helyen találtunk mindkét allélváltozatra példát, az alacsony mintaszám ellenére is. Példaképpen minden vizsgálatra egy reprezentatív futtatási képet tüntettünk fel a 3. ábrán, bemutatva mindkét allélváltozatot, illetve a heterozigóta eseteket is. A futtatási képek az eddig a laboratóriumunkban beállított PCR-RFLP eredményeket kívánják bemutatni, feltüntetve a vad, ritka és heterozigóta allétokra jellemző példákat. A 3. ábra A-H képei a parodontológiai megbetegedésekkel kapcsolatba hozható néhány gén vizsgálatainak eredményeit mutatják. Az IL-1 a -889 termék mérete 99 bp, mely az Ncol restrikciós enzimmel tör
