Szemészet, 2003 (140. évfolyam, 1-4. szám)
2003-06-01 / 2. szám
140. évfolyam (2003) 71 4. táblázat. Az egyes anyagoknál (DOPA, m-Tyr, o-Tyr) feltüntettük az adott anyagnak a három vizsgált beteg mintáiban mért, fenilalaninra korrigált görbe alatti területét Nem-diabeteses Diabeteses Kontroll Cataracta progrediens Cataracta progrediens DOPA/Phe 1,637 2,129 1,097 m-Tyr/Phe 0 0,426 0,597 o-Tyr/Phe 1,037 1,077 1,951 a lencse védekezőképességét. E védőmechanizmusban kis molekulasúlyú, úgynevezett chaperone-fehérjék (köztük a krisztallin), az ATP és a citoszkeletális rendszer fehérjéi kitüntetett szerepet játszanak.5 6’20 A lencse tudvalevőleg magas szárazanyag-tartalma, melynek 99%-a fehérje, szoros kölcsönhatásban van a vízzel. A lencse víztartalmának döntő része NMR-vizsgálatok szerint kötött víz, melynek részaránya a lencsén belül is változó.18 Cataractás lencsében kimutatták nemcsak az össz-víztartalom változását, hanem a kötött víz jelentős csökkenését is. Mindazok a változások, melyek a fehérjék vízoldékony és inszolúbilis frakciójában létrejönnek, egyidejűleg tükröződnek a kötött/szabad víz frakció arányeltolódásában. Ilyenkor a „denaturált” fehérje a vízzel való szoros kapcsolatát elveszti és a fehérje-fehérje asszociációk megváltozásával molekuláris aggregátumokat képez.1 Vizsgálati mintáink időskori lencsékből származtak. A fehérjetartalom a szolúbilis frakcióban szignifikáns csökkenést mutatott a kontrollokhoz képest a cataractás lencsékben. A cataracta-típusok között a vízoldékony fehérjék mennyiségében nem találtunk értékelhető különbséget. Az elektroforetikus vizsgálatok értékelése Azonos fehérjemennyiségeket elektroforetikusan analizálva a kontrollmintákat találtuk a legheterogénebbeknek. A 20-30 kDa közötti tartomány kiemelt figyelmet érdemel. A 20 kDa magasságában vándorló fehérjefrakciók kiemelkedő mennyiségük alapján feltehetőleg a-krisztallin alegységeknek felelnek meg. A kontrolifrakciókat összehasonlítva a betegek mintáival a legszembetűnőbb különbségek a 20-30 kDa közötti tartományban figyelhetők meg. A közepes molekulasúlyú tartományban (25-70 kDa) a kontroliminta szolúbilis fehérjéi gazdag mintázatot mutatnak, míg a cataractás minták vízoldékony frakciói nagyon szegények ezekben a fehérjékben, melyek között minden bizonnyal a citoszkeleton lazán kötött proteinjei is szerepelnek. Figyelemre méltó az elektroforetogramok nagy molekulasúlyú tartományában, közvetlen a gél felső szélén ábrázolódó festődés, amely a krisztallinok nagy molekulasúlyú (>800 kDa) aggregátumainak felelhet meg. Ez a gélben alig vándorló frakció a szolúbilis fehérjék között nem található. Fehérjevizsgálataink megerősítik azokat az irodalmi adatokat, melyek a cataractogenesis során a krisztallinok inszolubilizációjára, valamint a citoszkeleton átépülésére vonatkoznak. 3. ábra. Corneabankból származó donor lencse, nem-diabeteszes beteg cataracta progrediens, valamint diabeteses beteg cataracta progrediens miatt eltávolított lencséjének HPLC-analízise. Függőleges tengelyen a detektor által mért jel (voltban), vízszintes tengelyen az elúciós idő (percben) került feltüntetésre Szemlencsefehérjék elektroforetikus és nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás vizsgálata
