Szemészet, 2002 (139. évfolyam, 1-4. szám)
2002-03-01 / 1. szám
139. évfolyam (2002) alapállományát képező kollagén lebontása révén, szaruhártya fekélyek kialakulásához vezethet.2 A normál könny nagy mennyiségű urokináz antigént tartalmaz, mely molekulatömege alapján feltehetően inhibitorkomplex formájában van jelen. Az uPA aktivitása viszont kismértékű és tPA nem detektálható. A könny-uPA valószínűleg a szaruhártya és a kötőhártya epithelsejtjeiből származik.8 Mivel plazminogén aktivátor-inhibitor (PAI) -1 antigént nem sikerült normál könnyben kimutatni, így valószínűleg más PAI játszhat szerepet a szem elülső szegmentjében keletkező uPA gátlásában, melynek forrása vagy a könnymirigy, vagy a szem elülső szegmentjében található sejtek. A szaruhártya és a kötőhártya epithelsejtjeinek károsodása fokozott uPA-szekréciót eredményezhet a könnybe. Patológiás esetekben általában fokozódhat a kötőhártya ereinek permeabilitása is. így egyrészt proteinázok proenzim formái, másrészt proteináz-inhibitorok kerülhetnek a könnybe. Az uPA képes a könnybe kerülő plazminogént aktiválni, míg az urokináz aktivitást a plazmin inhibitorok gátolják. A keletkező plazmin egyrészt inaktiválódhat, másrészt számos folyamatot elindíthat a szem elülső szegmentjében. Nagy uPA aktivitás esetén a folyamatosan termelődő plazmin felboríthatja az egyensúlyt a transudatióval a könnybe kerülő inhibitorok kimerítésével, ezért a könny proteolitikusan aktívvá válhat. A plazminogén aktivátor-plazmin rendszer aktiválódása a sebgyógyulási folyamatok során hasznos és kívánatos. Működésük révén valósulhat meg a szöveti és sejttörmelékek eltakarítása, valamint a károsodott kollagén és extracelluláris mátrix kijavítása. Ha az egyensúly felborul, elhúzódó sebgyógyulás vagy cornealis fekélyképződés lehet a végeredmény. A fenti folyamatok részletes összefoglalását mutatja az 1. ábra. Betegek, anyagok és módszerek Munkánk során 42 páciens (26 nő és 16 férfi, átlagéletkor 27, standard deviáció (SD) ±9 év, életkortartomány: 17-51 év) 77 szemén végeztünk PRK-beávatkozást. Hét személy kivételével (3 nő és 4 férfi), akik csak az egyik szemből történő mintavételre vállalkoztak, mindkét szem könnymintáit vizsgáltuk. A két szem fotorefraktív excimer lézerkezelése között 1, illetve 2 hét telt el. A tanulmányban való részvétel alapvető feltétele volt, hogy legalább 15 pl könnymintát tudjunk venni ingerlés nélkül 3 perc alatt. A mintavételt és betegeink adatainak kezelését az 1975-ös Helsinki Deklarációnak megfelelően végeztük. Kontrollként 20 páciensünk még nem operált szemének könnymintáit használtuk. Mindezek alapján 77 szem könnymintája (41 jobb, 36 bal) és 20 kontrollminta került analízisre. A műtét előtti refrakciós hibatartomány +5,0 D értéktől -10,0 D értékig terjedt, melynek átlag értéke -3,0±3,0 D. A műtét során 18 esetben került sor asztigmia korrekcióra is -1,0 D- -2,75 D refrakciótartományban, átlag -1,5±0,6 D. A avizsgált személyek közül 17 viselt korábban kontaktlencsét, 4±2 év átlagos hordási idővel. A refrakciós hibák kezelését excimer lézerrel (Keratom II ArF [193nm], Schwind, Kleinostheim, Németország) lokális érzéstelenítés mellett, minden esetben ugyanaz a szemész szakorvos végezte. A cornealis epithelium eltávolítására keratom kést használtunk, markerként Hoffer-trepánt alkalmaztunk, melynek átmérője szférikus korrekció esetén 6,0-6,5 mm, asztigmiás korrekció esetén pedig 7,5-8,0 mm volt. Az epithelium lekaparását a cornea perifériájáról a centrum felé haladva végeztük, nagyon óvatosan, hogy lehetőleg elkerüljük a Bowman-membrán sérülését. Az epithelium m aradékok eltávolításához steril szivartampont használtunk. Azoknál a személyeknél, akiknél csak szférikus korrekciót végeztünk az ablatiós zóna átmérője 6,0-6,5 (átlag 6,1 ±0,2) mm volt. Ahol szükség volt az asztigmia korrekciójára, az asztigmiás ablatiós maszk átmérője 6,0-8,1 (átlag 7,5±0,6) mm, az alkalmazott szférikus maszk átmérője pedig 5,3-6,0 (átlag 5,7±0,1) mm volt. Az ablatiós mélység 12-120 pm között változott, átlagosan 48±22 pm volt. A műtét után antibiotikumtartalmú szemcseppet, Ciloxan (Ciprofloxacin HCL 0,3%, Alcon) alkalmaztunk óránként az operáció első napján, melyet napi ötszöri cseppentés követett további 5 napig. Az első 5 nap után szteroidtartalmú Flucon (Fluorometholone 0.1%, Alcon) és műkönynyet tartalmazó Tears Naturale (Dextran/Hydroxypropyl Methylcellulose, Alcon) szer használatára tértünk át. Ezeket az első hónapban napi ötszöri, a második hónapban napi négyszeri, majd a harmadik hónapban napi háromszori cseppentés mellett alkalmaztuk. Betegeinket minimum 1 éven keresztül követtük, a mintavételek után 1, 3, 6 hónap és 1 éves kontrollok mellett. A haze értékelésére a tanulmányban a Hanna-féle stádiumbeosztást használtuk.7 Az értékelést végző személy nem rendelkezett előzetes ismerettel a könny plazminogén aktivátor aktivitásáról. A plazminogén aktivátor aktivitás analízisére a humán könnymintákat, PRK-kezelés előtt és után közvetlenül, valamint a 3. és 5. posztoperatív napokon gyűjtöttük, ingerlés nélkül. A mintavételt minden esetben a szemcsepp használata előtt végeztük, üvegkapillárissal (hossza: 10 mm, átmérője: 1 mm) a szemhéjszél alsó marginális vonalának közelében, a praecornealis könnyfilmből réslámpa alatt, vigyázva arra, hogy ne sértsük a kötőhártyát.14 Az összes mintát centrifugáltuk (1800-as fordulatszámon) közvetlenül a mintavétel után, és a felülúszót -80°C-on tároltuk felhasználásig. Kontrollmintáink esetében az operált szem mintavételeivel azonos időben és módon történt a könnyminták gyűjtése. A plazminogén aktivátor aktivitás mérésére spektrofotometriás módszert alkalmaztunk, humán plazminogén és plazmin specifikus kromogén peptidszubsztrát, D-valin-1- leucil-l-lizil-pNA (S-2251), felhasználásával.11 Ez a módszer elsősorban az urokináz típusú plazminogén aktivátor aktivitás meghatározására alkalmas. A kísérleti munka során alkalmazott szubsztrátot (S-2251), valamint plazminogént a Chromogenix (Milano, Olaszország) cégtől szereztük be. A PA-mérésekhez referenciaként használt urokinázt (Choay, Párizs, Franciaország) S-2444-es szubsztráttal kalibráltuk standard urokinázhoz (NIBSC, London, Anglia), Frieberg szerint.5 A specifikus aktivitása 100000 IU/mgnak adódott, ez megfelel a kereskedelemben kapható legtisztább preparátumok specifikus aktivitásának. A PLAZMINOGÉN AKTIVÁTOR AKTIVITÁS VÁLTOZÁSÁNAK JELENTŐSÉGE A KÖNNYBEN...
