Szemészet, 2002 (139. évfolyam, 1-4. szám)
2002-12-01 / 4. szám
139. évfolyam (2002) 239 Anyag és módszerek A kísérletek a Semmelweis Egyetem I. sz. Szemészeti Klinikáján történtek. A kísérletek lebonyolítása és az állatok tartása megfelelt a nemzetközi szabályoknak (NIH, No. 85-23, 1985), a kísérleti protokollt a Semmelweis Egyetem Etikai Bizottsága jóváhagyta. A kísérleteket kilenc darab, egyéves szürke nyúl mindkét szemén (18 szem) végeztük. A műtétek általános anesztéziában történtek, melyet intramuszkuláris xylazine (5 mg/kg) és ketamine hydrochlorid (50 mg/kg) alkalmazásával értünk el. Az RK-t operációs mikroszkóp alatt, gyémántkés segítségével hajtottuk végre. Nyolc szabályosan elrendezett, a legmélyebb stromarétegekig terjedő bemetszést ejtettünk a szaruhártyán, 3 mm átmérőjű centrális optikai zónát szabadon hagyva. Két héttel később a szemeken excimer lézerkezelést végeztünk Aesculap-Meditec MEL60 193-nm ArF excimer lézerkészülékkel (energiasűrűség: 250 mJ/cm2, ismétlési frekvencia: 20 Hz). A központi 6 mm átmérőjű területről hokikéssel lekapartuk a hámot, majd elvégeztük a PRK-kezelést 54 pm mélységben (-6,0 D-s korrekciónak megfelelően), 6 mm átmérőjű, saját készítésű papírmaszkon keresztül. Három nyúl 1-1 szemén nem történt lézerkezelés, ezek kontrollként szolgáltak. Három-három állatot az RK-t követő 3, 4, illetve 6 hét elteltével (vagyis PRK után 1, 2, illetve 4 héttel) túlaltattunk, mindhárom csoportba 1-1 kontroll szem került. A corneákat eltávolítottuk, a belőlük készített metszeteket hematoxilin-eozinnal festettük és fénymikroszkóp alatt vizsgáltuk. Az egyik corneából, melyen jelentős elváltozásokat találtunk, készített néhány metszetet PAS-sal is megfestettünk. Eredmények PRK után 1 héttel (RK után 3 héttel) (1. ábra) a lézerkezelés helyén, az RK-bemetszések hegei között egyenetlen, megvastagodott epitheliumot észleltünk. A kezelt területen az epithelium alapja szabálytalan és a bazális hámsejtek magjai kerekebbek, mint a nem kezelt részeken. A subepithelialis stroma egyes részeken gazdag fibrocytában, máshol kifejezetten sejtmentes (1. a-c. ábra). A PRK-kezelés régiójában, a radiális bemetszéseknek a lézerkezelés területére benyúló része alatt abnormális, többrétegű endotheliumot találtunk. Az egyik corneában. ahol az endothelium különösen vastag, az excimer lézerrel kezelt terület alatt a szomszédos stromalamellák között rések megjelenése és a stroma kiszélesedése, vagyis stroma-oedema észlelhető; a műtéti terület szélein túl viszont a stroma vastagsága normális (1. a., d. ábra). Ebből a szaruhártyából néhány metszetet PAS-festéssel is megfestettünk, és nem találtunk PAS-pozitív anyagot az endothelsejtek körül. Az egyik corneában levált epitheliumból képződött nyúlvány áll ki a felszínből, amelyet két párhuzamos, többrétegű sejtoszlop alkot, melyek egyesülnek a végüknél néhány metszetben. Ezeknek a nyúlványoknak az alapjánál subepithelialisan szemcsés, sötéten festődő extracelluláris anyag lerakódása észlelhető. Két héttel a PRK után (4 héttel az RK után) a lézer keratectomia területén az enyhén egyenetlen epithelium vastagsága csaknem normális. A subepithelialis stromát megnövekedett számú keratocyta népesítette be. Az endothelium részben normális a PRK-kezelés területén, de különböző hosszúságú szakaszokon egy vagy több réteg oedemás sejtsorból áll. Ezen területek felett stroma-oedema látható. Az egyik szaruhártyában egy RK-bemetszés mellett levált epitheliumból álló nyúlványt találtunk (hasonlót az előző 2. ábra. Szaruhártyából készült metszet (H-E), 2 héttel a PRK (4 héttel az RK) után. A levált epithelium redőt képez egy radiális bemetszés szomszédságában. A hám alapja és a subepithelialis stroma között a levált epithelium mindkét végénél szemcsés extracelluláris anyag látható (nyíl). A bazális hámsejtekben intracelluláris oedema jelei észlelhetők (nyílhegyek). A jelölés 10 pm-t jelent. Excimer lézeres keratectomia hatása radiális keratotomián átesett nyúlcorneán
