Szemészet, 1979 (116. évfolyam, 1-4. szám)
1979 / 3. szám
létén történő szárítás után a vizsgálandó betegek szérumának 1 : 10, 1 : 100 arányú hígításával fedtük a készítményeket. 30 perc inkubálás után 2x15 percig mosás következett PBS-ben, majd a metszeteket fluoreszceinizotiocianáttal jelzett polivalens antihumán globulinnal kezeltük. Harminc perc inkubálás után ismét mosás következett. Fluoval fluoreszcens mikroszkóppal 100x és 250x nagyítást használva értékeltük a metszeteket. A vizsgált savóban jelenlevő antitestek kötődését a ductus falához élénk fluoreszcencia jelezte. LDA reakció módszere Célszervként cadaver nyálmirigyet használtunk. Az indirekt immunfluoreszcencia vizsgálatánál leírt módon készítettük a metszeteket, illetve a betegek szérumának I : 10, 1 : 100 arányú hígításával kezeltük azokat. Mosás után lymphocyta szuszpenzióval fedtük a készítményt. A lymphocytát humán tonsilla palatinából nyertük Ficoll-Uromiro szeparálás során. A lymphocyta szuszpenzió sejtszámát 107/ml-re állítottuk be. Harminc perc inkubálás után 2x15 perces mosást, szárítást, majd May- Grünwald-Giemsa festést végeztünk, de a metszetek festés nélkül is értékelhetők. Mikroszkóppal, I50x-es nagyítás mellett azt a készítményt tekintettük pozitívnak, amelyben látóterenként legalább 50 lymphocytát lehetett megszámolni. Eredmények Tíz Sjögren-szindrómás beteg szérumában indirekt immunfluoreszcens módszerrel 7 esetben tudtunk nyálmirigy-ellenes antitestet kimutatni (1. ábra). Direkt immunfluoreszcens vizsgálatot egy betegünk parotisából nyert biopsziás anyagból végeztünk. A direkt vizsgálat során a parotis ductus epithelhez kötött antitest jelenlétét észleltük. Tíz betegünk közül 6 esetben volt pozitív az LDA reakció, azaz kooperáló típusú antitest volt jelen (2. ábra). Egy beteg szérumában könnymirigy-ellenes antitestet találtunk indirekt immunfluoreszcens vizsgálattal (3. ábra). A kétféle antitest kimutatási módszert párhuzamosan végeztük, ezért az eredmények összehasonlítására is módunk volt (I. táblázat). I. táblázat Az immunfluoreszcens és LDA vizsgálatok eredménye Sorszám Betegek 1F LDA í. F. B.+ 2. M. I. + + 3. R. I.-4. Cs. G. + + 5. Sz. Gy. + + о. D. I. + + 7. H. I. + + 8. N. I. +-9. L. .1.-10. G. I. + + Megbeszélés Az immunpatológiai kórképek közé sorolható Sjögren-szindrómában keringő szervellenes antitestek kimutatása, tulajdonságuk megismerése közelebb vihet a tünetegyüttes patomechanizmusához és esetleg etiológiájának tisztázásához 171
