Szemészet, 1971 (108. évfolyam, 1-4. szám)
1971-08-01 / 3. szám
teszik lehetővé a praeparatum jó felfekvését és az alsó és felső tápláló oldat izolálását. A kamra alkalmas akár több makro-, illetve mikroelektród egyidejű elhelyezésére. Az irodalomból ismert átáramoltatásos kamrák rendszerint csak pigment-hám nélküli izolált retinával végzett vizsgálatokra alkalmasak. A fent ismertetett kamra viszont egyaránt alkalmas különböző typusú praeparatümokkal, valamint különböző méretű retinákkal végzett vizsgálatokra. Hidegvérű praeparatum esetében egy sor physiologiai kísérlet számára egyszerűbb kamra is megfelel (3/A ábra). Az ábrán látható kamra falában rögzítődik az indifferens elektród, a kamra biztosítja a tápoldat tárolását és továbbítását a retinához, valamint a praeparatum thermostálását. A regisztráló elektródokkal szembeni fő követelmény, hogy ne polarizálódjanak, stabilak, párban potential-különbség nélküliek legyenek, vagyis elhanyagolható feszültségforrást képezzenek. Továbbá legyenek kis ellenállásúak (~20 К ohm) és könnyen kezelhetők. Az elektród a vizsgálat során nem hathat a vizsgálandó objektumra, pl. nem léphet fel ion-csere az elektród és a retina között. A kálóméi elektródok elkészítése, kezelése, a velük való mérés nehézkes, méretük a retinához képest nagy, nem teszik hozzáférhetővé a retinát' mikroszkóp, fényingerlés és egyéb manipuláció számára. Az izolált retinával kapcsolatos elektroretinographiai kísérletekben jobban megfelelnek az ezüstklorid (Ag-AgCl) elektródok. Mivel a jó elektród a kísérleteknek az egyik legfontosabb (és legkényesebb) kelléke, az alábbiakban részletesen ismertetjük az egyik bevált Ag-AgCl typusu elektródunkat (3/B ábra). Árnyékolt coaxialis huzal végére egy 30 mm hosszú, 1 mm átmérőjű színezüst huzalt forrasztunk. Erre az ezüst elektródra centrálisán egy 15 mm hosszú (alsó átmérő 9,5 mm) kónuszos gumidugót húzunk fel. A gumidugó felső pereme egy fémgyűrűben van rögzítve. A fémgyűrű tartóruddal csatlakozik a manipulátorhoz, mely az elektród háromirányú finom mozgatását biztosítja. A gumidugóra kívül feketére festett és lakkozott 30 mm hosszú, 10 mm belső átmérőjű üveghengert erősítünk. Az üveghenger másik vége 5 mm vastag gumidugóval van lezárva, ebben az alsó gumidugóban 1 mm belső átmérőjű agar-agarral töltött hajlított üvegcső rögzítődik. Az agar-agar 1 milliméteres félgömbben végződik és ez a félgömb érintkezik a retinával. Az üveghengerbe az ezüst elektród 15 mm hosszan nyúlik be, a végén az ezüst felületét elektrolysis útján ezüstkloriddá alakítjuk át. Az ezüst elektród többi részét lakkal vonjuk be. Az üveghenger physiologiás sóoldattal van megtöltve úgy, hogy szintje mindenkor az elektród ezüstklorid részénél magasabban legyen. Az üveghenger alját 3 mm vastagságban bolus alba réteg tölti ki. Ez az elektród a gyakorlatban megfelel a regisztráló elektródokkal szemben támasztott követelményeknek, egyenáramú (DC) regisztrálási követelményeknek is. Könnyen kezelhető, az üveghengerből az alsó kis dugó kivétele után az agart tartalmazó üvegcső hetente újra tölthető. Az ezüst elektród a henger levétele után tisztítható, az ezüstklorid réteg megfelelő időközönként felújítható. Az elektród végét elektrolysis útján az alábbi módon alakítjuk át ezüstkloriddá [6]: Sötétben, illetve gyenge megvilágítás vagy vörös fény mellett 0,9% NaCl-oldatot tartalmazó pohárba merítjük a két elektród nem lakkozott végét. A két elektród összekötve alkotja az anódot ( + pólus); katódként a pohárba merített szénrudacska (zseblámpaelemből) vagy egy darab ezüst huzal szolgálhat. Kis áramsűrűséget 0,1 — 10 A/m2 használjunk. Például 9 V öt másodperc alatt megfelelő ezüstklorid réteget alakít ki az ismertetett 1 mm átmérőjű ezüst elektródpár esetében. Az elektródokat fénytől védetten kell tárolni ugyancsak 0,9% NaCl oldatban. Az ezüstklorid réteget ezenkívül óvni kell a kiszáradástól és mechanikai sérüléstől. Mikroelektródos vizsgálatoknál az alsó üvegcsöves dugót mikropipetta befogóval cseréljük fel. Fényingerlő és regisztráló berendezés A retina megvilágításának mértékét (E) luxban intact retina és enucleált bulbus praeparatum esetében Le Grand (1957) képlete szerint számíthatjuk ki E = Di -B-S -Th ahol D = a szem törőképessége (1/cm-ben); B — a fényforrás erőssége (candela/m2); 8 — a pupilla méret (cm2); T/. = a szemközegek fényáteresztő képessége. Az izolált retina kísérletekhez természetesen felhasználható bármely elektroretinographiai, illetve elektroencephalographiai vizsgálatokra alkalmas elektrophysiologiai felszerelés. A kísérleti kutatómunka jelenkori feladatai azonban az apparaturával szemben olyan igényeket támasztanak, amelyeknek a klinikai rutin elektrophysiologiai vizsgálati módszerek több vonatkozásban nem felelnek meg teljesen [23, 25]. Ezzel kapcso-208
