203893. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált 3-piperazinil-1-dezoxi-15-dezoxo-1,15-epoxi-rifamicin-származékok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 203 893 B 2 5 g 3-[4-(2,4,6-trimetil-benzil)-piperazin-l-il]-rifamicin-SV, 50 ml száraz piridin és 4,5 ml pivaloil-klorid elegyét 30 percen át 50 *C hőmérsékleten tartjuk. Ezután az oldószert vákuumban lepároljuk. Az olajos maradékot etil-acetátban oldjuk és 2 n sósavoldattal, pH-7 értékű pufferoldattal és nátrium-klorid-oldattal mossuk. Vízmentes nátrium-szulfát felett történő szárítás után az elegyet bepároljuk és a sárga maradékot éter-hexán-elegybdl átkristályosítjuk. Ily módon 1,8- -di-(0-pivaloil)-3-[4-(2,4,6-trimetil-benzil)-piperazin-l-il]-rifamicin-SV-t nyerünk, melynek olvadáspontja 203-204 ”C. Mért molekulatömeg (tömegspektrum): 1081 (CmHmNjOm). 2. példa 10,7 g 1. példa szerinti termék 200 ml tetrahidrofurános oldatához szobahőmérsékleten keverés közben részletekben annyi szilárd tetrabutil-ammónium-fluorid-trihidrátot adunk, míg a kezdeti vörös szín sárgába megy át. Ezután vizet adunk hozzá, citromsavval megsavanyitjuk és a reakcióelegyet etil-acetátban felveszszük. Az etil-acetátos extraktumokat vízzel, majd nátrium- klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot éterből kikristályosítjuk. Ily módon 1-dezoxi-lS-dezoxo-Eló-epoxi-S-^-P^.ő-trimetil-benzilj-piperazin-l-il]-rifamicin-SV-t kapunk, azaz olyan (I) általános képletú vegyületet, ahol Rí hidrogénatom, R2 acetilcsoport és R3 metilcsoport. Az anyag citromsárga, hosszú prizmás kristályokat alkot, melyet metanol-víz-elegyből átkristályosítunk. Op.: 175 'C. Mért molekulatömeg (tömegspektrum FD): 895 (C51H63N3O11). UV- spektrum 0,01 n alkoholos sósavoldatban: maximumok (nm e): 241/37240,298/23000,330 (váll), 437/9920. A termék a (B) képletnek felel meg. 3. példa A 2. példa végtermékének dioxán-1 n nátrium-hidroxid-oldat 1:1 arányú elegyével készített oldatát szobahőmérsékleten 21 órán át állni hagyjuk. Ezután az elegyet vízzel hígítjuk, citromsavval megsavanyítjuk, a reakció termékét etil-acetátban felvesszük és etil-acetát-éter elegyből kikristályosítjuk. Ily módon a 25-dezacetil-3-[4-(2,4,6-trimetil-benzil)-piperazin-l-il]-l-dezoxi-l5-dezoxo-l,l5-epoxi-rifamicin-SV-t nyerjük, azaz olyan (I) általános képletú vegyületet, ahol Rí hidrogénatom, R2 hidrogénatom és R3 metilcsoport. A termék sárga, kristályos anyag, olvadáspontja 190- 195 'C (bomlás közben). Mért molekulatömeg (tömegspektrum, FD): 853 (C49HÍ3N3O10). A termék a (C) képletnek felel meg. 4. példa A 3. példa termékének piridinnel készített oldatához 10 egyenértéknyi pivaloil-kloridot adunk és az elegyet szobahőmérsékleten állni hagyjuk, míg vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat szerint a reakciótermék már nem tartalmaz kiindulási anyagot. Ezután nagyvákuumban gyorsan szárazra pároljuk, a maradékot metilén-kloridban felvesszük, a metilén-kloridos extraktumot egymás után citromsavoldattal, pH-7 értékű pufferoldattal és telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd szárítjuk és bepároljuk. így vörös maradékot kapunk, mely a 25-dezacetil-8-(0-pivaloil)-3-[4- (2,4,6-trimetil-benzil)-piperazin- 1-il]-1 -dezoxi-15- -dezoxo-l,15-epoxi-rifamicin-SV, azaz olyan (I) általános képletú vegyület, ahol Rí pivaloilcsoport, R2 hidrogénatom és R3 metilcsoport. Mért molekulatömeg (tömegspektrum, FD): 937 (C34H71N3O11). 'H-NMR-spektrum (CDCI3, 360 MHz): a piyaloilcsoport jele 1,41-nél jelentkezik (s, 9H, CH3C-). A termék a (D) képletnek felel meg, ahol Rí pivaloilcsoport. 5. példa 4 g 8-0,N-dipivaloil-3-[4-(2,4,6-trimetil-benzil)-piperazin-1- il]-rifamicin-S-t (előállítása a WO 87/02361 sz. PCT nyilvánosságra hozatali irat szerint) fénytől védve 70 ml izopropanolban zárt edényben 4 órán át 100 *C hőmérsékleten melegítünk. Ezután az oldószert vákuumban lepároljuk és a sötétvörös maradékot 600 g szilikagélen (Kieselgel, Merck) petroléter:etil-acetát (3:2) eleggyel kromatografáljuk. Az első két zónában lévő anyagot elöntjük, az azokat követő vörös frakció az 1. példa szerinti termék. Az oszlopon visszamaradt további anyagot etil-acetátmetanol (9:1) eleggyel eluáljuk és még egyszer kromatografálva tisztítjuk. Az eluátum bepárlása után kapjuk az 1. példában jellemzett 8-(0-pivaloil)-1 -dezoxi-15-dezoxo-1 ^-epoxi-3 - -[4-(2,4,6-trimetil-benzil)-piperazin-l-il]-rifamicin-SV-t. 6. példa 250 mg hatóanyagot, például olyan (I) általános képletű vegyületet, ahol Rí pivaloilcsoport, R2 acetilcsoport és R3 metilcsoport, tartalmazó kapszulákat például a következőképpen állíthatunk elő: Összetétel (1000 kapszulára): hatóanyag 250,0 g kukoricakeményítő 50,0 g polivinil-pirrolidon 15,0 g magnézium-sztearát 5,0 g etanol szükség szerint A hatóanyagot és kukoricakeményítőt összekeverjük és a polivinil-pirrolidon 50 g etanollal készített oldatával megnedvesítjük. A nedves masszát 3 mm lyukméretű szitán áttörjük és 45 'C hőmérsékleten szárítjuk. A száraz granulátumot 1 mm lyukméretű szitán törjük át, és 5 g magnézium-sztearáttal keverjük. Az elegyet 0,320 g-os adagokban 0 méretű teleszkópos kapszulákba töltjük. Hasonló módon alkalmazhatjuk a többi, a példák szerint előállított vegyületet hatóanyagként. 7. példa 250 g, az 1-5. példák bármelyike szerint előállított hatóanyagot és 1750 g finoman eldörzsölt kúpalapmasszát (például kakaóvajat) alaposan elkeverünk, majd megolvasztunk. A keveréssel homogenizált 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
