203841. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikoplazma-vakcina előállítására
1 Hü 203 841 B 2 A fenti adatokból látható, hogy az Internet 6/85 hető meg, míg mind az R-törzs, mind az F-törzs megfitörzs lényegesen kevésbé okoz légzsák- és tojáskezde- gyelhető ennyi idő után. mény-károsodást, mint akár az R-törzs, akár az F- Hasonló kísérleteket végeztünk 4 hetes pulykákkal, törzs. Az eredményeket az alábbi táblázatban foglaltuk ösz-Emellett az is látható, hogy az Intervet 6/85 törzs a 5 sze. fertőzött csirkékben körülbelül 4 hét után nem figyel-Adagolt Adagolás után Légzsák Újralzolálhatóság készítmény eltelt napok száma károsodás <*) R-törzs 10 3,2 100 Intervet 6/85 10 0,2 100 F-törzs 10 2,6 100-(5 és fél hetes) 0,4 0 R-törzs 28 3,75 100 Intervet 6/85 28 0,5 0 F-törzs 28 2,6 100 (8 hetes) 0,2 0 Ismeretes, hogy pulykák különösen érzékenyek M. gallisepticumra, még az aránylag alacsony virulenciájú törzsekre is, mint például az F-törzs, amelyet csirkék esetén vakcinálásra használnak. A fenti eredmények azt mutatják azonban, hogy az új Intervet 6/85 törzs pulykákra nézve is alacsony virulenciájú, és gyakorlatilag nem okoz károsodást. Az Intervet 6/85 törzset virulencia-változásra nézve is megvizsgáltuk. E célból a törzset ötször passzáltuk csirkékben, a mikoplazmát újra izoláltuk légcsőtampon segítségével, amelyetmindigazúj csirkéknek adagoltunk. Az eredményeket az alábbi táblázatban foglaltuk össze. Virulenciafokozódást még 5 passzál ás után sem észleltünk Adagolt Passzálások Adagolás után eltelt Kor Légzsák Tojáskezdemény Újra izolálhatótörzs száma napok száma (hét) károsodás degeneráció *ág(#) Intervet 6/85 2 10 29 0,75 1,2 66-29 0,25 0,0 0 Intervet 6/85 3 10 35 0,0 1,0 20 Intervet 6/85 0 10 35 0,2 1,4 20 R-törzs 0 10 35 2,8 2,6 100-35 0,0 0,1 0 Intervet 6/85 4 10 39 0,4 1,4 20 Intervet 6/85 0 10 39 0,0 0,8 0 R-törzs 0 10 39 2,2 2,4 100 39 0,0 0,4 0 Intervet 6/85 5 10 41 0,4 1,4 20 R-törzs 0 10 41 2,2 2,2 100-41 0,0 0,4 0 A találmány szerinti eljárást a következő példákkal szemléltetjük közelebbről a korlátozás szándéka nélkül I. példa Élő vakcina előállítása Körülbelül 1 ml Mycoplasma gallisepticum Intervet 6/85 törzs oltószuszpenziót 10 ml módosított Adler tápközeggel összetétel és módosítás lásd 7. oldal 1-4. sor hígítunk, és 37 *C-on inkubáljuk Amikor a megfelelő növekedés bekövetkezik amelyet az adagolt fenol-vörös indikátor színének megváltozásával észleltünk a szuszpenziót friss módosított Adler tápközegbe oltjuk át 1:20 térfogatarányban, és a fenti módon inkubáljuk A tenyésztéseket addig ismételjük amíg megfelelő mennyiségű oltóanyagot nem kapunk az alkalmazott fermentor beoltásához (körülbelül 51 oltóanyag szükséges egy 1001-es fermentorhoz). 50 A fermentor beoltása után az inkubálást 24-30 óra hosszat, 7,5 pH-nál, 37 *C-on végezzük, konstans keverés és levegőztetés mellett. Ezután a sejteket centrifugálással összegyűjtjük és 10% sovány tejjel felvesszük amelyhez ampicillint 55 adtunk A kapott vakcinát fiolákba töltjük fagyasztva-szárít juk majd a fiolákat lezárjuk 2. példa Vakcináit kísérlet csirkékkel 60 Két, 10 csirkéből álló csoportot vakcináltunk aero-4
