203795. lajstromszámú szabadalom • Eljárás DNS azonosítási vizsgálatok elvégzésére és tesztanyagként használható polinukleotidok előállítására
1 HU 203 795 B 2 mot sem tartalmaztak. Minden fragmentumot a különbözöl expozíciós időkkel készített eredeti autoradiogrammok alapján vettünk számításba, a nem teljesen szétvált, halványabb csíkokat, különösen a gél alsó része közelében - mivel ezek nem voltak megbízhatóan azonosíthatóak - figyelmen kívül hagytuk. Az első lépés X apaságának megállapítása volt, a hipervariábilis fragmentummintázatok alapján. Annak ellenére, hogy az apa DNS-e nem volt hozzáférhető, DNS- ujjlenyomatának legnagyobb részét rekonstruálni lehetett azokból a specifikus apai fragmentumokból, melyek M ujjlenyomataiból hiányoztak, de legalább az egyik vitán felüli utód (B, SI, S2) ujjlenyomatában jelen voltak. Az ily módon azonosított 39 fragmentumnak kb. fele jelen volt X ujjlenyomataiban is. Mivel nem rokon személyek DNS- ujjlenyomataiban ritkán vannak közös fragmentumok (lásd U személy, 6. ábra) ez az eredmény erősen arra utal, hogy X apja azonos B, SÍ és S2 apjával. Ha ezeket a specifikus apai fragmentumokat nem vesszük figyelembe X ujjlenyomataiban, azokból még 40 különböző azonosított fragmentum marad, melyek mindegyike megtalálható volt M ujjlenyomataiban. Ez viszont erős bizonyíték amellett, hogy X-nek M az édesanyja, vagyis B, S1 és S2 édestestvérek. Az előzőekben már kimutattuk, hogy annak átlagos valószínűsége, hogy egy személy DNS-ujjlenyomatában előforduló egyik fragmentum, egy másik véletlenszerűen kiválasztott személy ujjlenyomatában is előforduljon, észak-európaiak esetén: kb. 0,2. A megfelelő becsült érték az apa és M viszonylatában 0,26, ami arra utal, hogy a vizsgált ghánaiak esetén a DNS-ujjlenyomatok változatossága nem mutat szignifikáns különbséget az észak-európaiakéhoz képest. A következő becslések elvégzésekor azt az erősen általánosított feltételezést alkalmaztuk, hogy minden fragmentum véletlenszerű, kettős előfordulásának valószínűsége 0,26 (a számításokat a következőkben adjuk közre). Az első kérdés az, hogy vajon X rokona-e családjának. X DNS-ujjlenyomatai 61 értékelhető fragmentumot tartalmaznak, melyek mindegyike jelen van M és/vagy az apa ujjlenyomataiban. Amennyiben X nem rokon, akkor annak valószínűsége, hogy ujjlenyomatának bármelyik csíkja ezekben a szülőkben jelen van: 1—(1—0,26)2—0,45; annak valószínűsége pedig, hogy M és/vagy az apa ujjlenyomataiban X mind a 61 csíkja véletlenül előforduljon: 0,45SI-7*10‘“. Tehát X nyilvánvalóan a család rokona. A kővetkező kérdés az, hogy lehet-e X anyja olyan nő, aki nem rokona M-nek. X ujjlenyomatai 40 „anyai” fragmentumot tartalmaztak, melyek közül, becsléseink szerint, kb. 25 származik specifikusan az anyától, a többi fragmentum valószínűleg az apánál és az anyánál egyaránt előfordul, s ezért nem használható fel M anyaságának bizonyítására. X mind a 25 anya-specifikus fragmentuma megtalálható M DNS-ében. Annak valószínűsége tehát, hogy M és X nem rokonok, de véletlenül van 25 közös fragmentumuk: 0,26M-2*lO13. Tehát X és M nyilvánvalóan rokonok. Az utolsó és legnehezebb kérdés, hogy vajon M valamelyik leánytestvére, akinek DNS-e nem volt hozzáférhető, lehetett-e X anyja (az apa ebben az esetben természetesen M félje kellett, hogy legyen). Amennyiben annak átlagos valószínűsége, hogy egy fragmentum két nem rokon személy ujjlenyomatában egyaránt előfordul: 0,26, akkor annak valószínűsége, hogy két testvér ujjlenyomatában ugyanaz a fragmentum előfordul: 0,62. Annak valószínűsége tehát, hogy M X valódi anyjának testvére, és ujjlenyomataiban véletlenül fordul elő X mind a 25 anya-specifikus fragmentuma: 0,62M-3»10*. Ebből arra következtettünk, hogy minden ésszerű kétséget kizáróan, M X valódi anyja. Ezeket a bizonyítékokat a bevándorlási hatóság elé tártuk, akik ezután megszüntették a vizsgálatot X ügyében, és megadták számára a letelepedési engedélyt Nagy-Britanniában, lehetővé téve, hogy a fiú családjával maradjon. Ez a bonyolult eset jól szemlélteti, hogy DNS-ujjlenyomatok rokonsági kérdésekben még olyan esetekben is képesek egyértelmű, pozitív bizonyítékot szolgáltatni, amikor a család bizonyos kritikus tagjai nem elérhetőek. A bemutatott esetet egyszerűbbé tette az a tény, hogy X apja azonos volt a többi vizsgált testvérével, valamint az, hogy X egyetlen olyan apai fragmentumot sem örökölt, ami csak az ő DNS-ujjlenyomatában fordult volna elő, és testvéreiében nem (szabályos eloszlás esetén az apai fragmentumok 1/16-od része így kellett volna, hogy öröklődjön). Az ilyen csak X-re jellemező fragmentumok léte nyilvánvalóan gyengítette volna az X és M közötti rokonság melletti bizonyítékokat, de a gyakorlatban nem feltétlenül tette volna lehetetlenné a bizonyítást X DNS-e valószínűleg semmiképpen sem tartalmazna 5 ilyen apai fragmentumnál többet, a 25 anya-specifikus fragmentum mellett Annak a valószínűsége, hogy 30 azonosított fragmentum közül 25 véletlenül egyezzék meg X és M ujjlenyomatában, ha nem rokonok: 8*10u. Ugyanez a valószínűség 9* 10°, ha M X nagynénje. Ez a vizsgálat tehát rendkívül meggyőző, és képes világos bizonyítékokat szolgáltatni a legtöbb ilyen esetben az állítólagos rokonság mellett, vagy ellene. Hasonló esetekben általában a család összes érintett tagja elérhető a vizsgálat céljából, ilyenek például az apasági ügyek és a bevándorlással történő családegyesítések. A DNS- ujjlenyomatok csaknem minden ilyen esetben alkalmasak a vitás kérdések eldöntésére. A DNS-ujjlenyomatok mennyiségi elemzése M ujjlenyomataiban 61 azonosítható DNS-fragmentumot vettünk számításba, míg 39 specifikusan apai fragmentum létét tudtuk kimutatni az utódoknál. Mivel az apa heterozigóta DNS-fragmentumainak 1/8-a nem jelenik meg sem B, sem SÍ, sem S2 DNS-ében, így az örökölhető apa-spcifikus fragmentumok számának korrigált, becsült értéke: 39*8/7-45. Mivel M és az apa DNS-ujjlenyomataiban közel azonos számú értékelhető fragmentum kell, hogy legyen, ezért azoknak a fragmentumoknak a száma, melyek M és az apa DNS-ujjlenyomataiban egyaránt előfordulnak 61-45-16. Annak valószínűsége (x) tehát, hogy egy tetszőleges fragmentum az apa és M ujjlenyomataiban egyaránt előfor-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60. 16
