203791. lajstromszámú szabadalom • Optikailag aktív foszfortartalmú ecetsavszármazékokat tartalmazó herbicid és növekedésszabályozó készítmény és enzimatikus eljárás ilyen vegyületek előállítására
1 HU 203 791 B 2 cióidő után (kb 88%-os átalakulás) a reakcióoldatot celliten leszűrjük, metanollal mossuk, az oldószert vákuumban 40 *C hőmérsékleten eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot metanolban felvesszük, a szilárd anyagot leszűrjük és a (+)-dimetil-foszfinoil-hidroxi-ecet- 5 sav-nátrium-sót hidegen kikristályosítjuk. Kitermelés: 3,9 g (+)-dimetil-foszfmoil-hidroxiecetsav-só, optikai foigatóképesség: [a]2P+14,2‘ (c-1,005, metanolban). 10 2. példa Az első példában leírtak szerint járunk el, kiindulási anyagként 2,36 g (10 mmól) (±)-hexil-észtert - 25 ml 0,1 mólos nátrium-foszfát-pufferben oldva - és 5 mg sertésmáj-észterázt alkalmazva. 150 óra reakció után 15 (50,5 %-os átalakulás) - a reakcióhőmérséklet 25 'G volt - a reakciót megszakítjuk. Kitermelés: 0,51 g (+)-dimetil-foszfmoil-hidroxiecetsav-Na-só, (58%), foigatóképesség: [a]iP+18,6‘ (c-1,059, metanolban). 20 3. példa Az első példában leírtak szerint járunk el, kiindulási vegyületként 8,77 (30 mmól) (±)-decil-észtert - 25 ml 0,1 mólos nátrium-foszfát-pufferben oldva (pH-7) - és 25 5 mg sertésmáj-észterázt alkalmazva. A reakciót 19 órán át végezzük, átalakulás 11 %-os. Kitermelés: 3,86 g (+)-dimetil-foszfinoil-hidroxiecetsav-Na-só (95% az átalakult termékre vonatkoztatva), forgatóképesség: [a]2P+20,4’ (c-1,0746, metanol- 30 ban), enantiomertisztaság: 86%. 4. példa Az 1. példában leírtak szerint járunk el, kiindulási anyagként 12 g (41 mmól) (±)-decil-észtert- 25 ml 1 mólos kálium-foszfátban oldva - és 10 mg sertésmáj-észterázt alkalmazva. A reakcióidő 19 óra, az átalakulás kvantitatív. Kitermelés: 5,84 g (+)-dimetil-foszfinoil-hidroxiecetsav-K-só (75%, metanolból való átkristályosítás után), forgatóképesség: [a]2>°-24,r (c-1,0043, metanolban), enantiomertisztaság: 97%. Az enantiomertisztaságot optikailag tiszta 1-feniletil-aminnal végzett diasztereomer sóképzés után protonrezonancia spektroszkópiával határozzuk meg. Hatástam példa Az (I) általános képletű vegyületek herbicidhatása ismert (1. 106 114 sz. európai szabadalmi leírás) és ismert az is, hogy ezek a vegyületek pl. az imidazolin típusú heibicidekhez hasonlóan az acetolaktát vagy 2- aceto-2-hidroxi-butirát szintézisére kifejtett gátló hatásuk révén hatnak mint herbicidek [1. La Rossa, R. A. és Falco, S. C. Trends Biotechnoi. 2, (1984), 360-361], A találmány szerinti eljárással nyert enantiomerek hatásának kimutatására E. coli és D.carota törzsekből kinyert 2-aceto-2-hidroxi-butirátot (AHB) és 2-acetolaktátot (AL) alkalmaztunk és a gátló hatásra vonatkozó eredményeket a következő 1. táblázatban foglaljuk össze; Racém vegyületként (±)-dimetil-foszfinoil-hidroxi-,ecetsavat alkalmaztunk. 1. táblázat Enzimforrás Szubsztrátum D.carota AHB IC» AL ICjo AHB IC50 E.coli AL IC50 Racém vegyület 19,4 pmól 8,2 pmól 14,9 pmól . 8,0 pmól 2. pl. szerinti vegyület 4. pl. szerinti vegyület 8,0 Jimól 2,7 pmól 8,3 pmól 3,6 pmól SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás (I’) általános képletű (+)-dialkil-foszfinoilhidroxi-ecetsav-származékok és sóik előállítására - a képletben R1 jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport és R2 jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport - azzal jellemezve, hogy egy (I) általános képletű racém vegyületet - a képletben R'és R2 jelentése a fenti és R3 jelentése 1-14 szénatomos alkilcsoport - hidrolázokkal vizes vagy vizes-szerves oldószeres közegben hasítunk és a savformában nyert (T) általános képletű vegyületet kívánt esetben sóvá alakítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hidroláz enzimként sertésmáj-észterázt alkalmazunk. 3. Az 1. vagy 2. igénypontok szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az (I) általános képletű vegyületeket 5-701% koncentrációban alkalmazzuk. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az (I) általános képletű vegyületet 20-501% koncentrációban alkalmazzuk. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 10-40 °C között reakcióhőmérsékletet alkalmazunk. 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 15-35 °C közötti reakcióhőmérsékletet alkalmazunk. 50 55 60 3
