203790. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dipeptidek előállítására enzimatikus úton
1 HU 203 790 B 2 (d)egy (VII) vagy (VIII) általános képletí, egyenes vagy elágazó szénláncú amino-foszfonsav vagy amino-szulfonsav - a képletekben x értéke 1-2, és z értéke 2-4 -lehet, élesztőből származó, vagy állati, növényi, vagy egyéb, mikrobiológiai eredetű - adott esetben immobilizált - szerin- vagy tiol-karboxipeptidáz jelenlétében, pH 5 és 10^ közötti, adott esetben szerves oldószert és/vagy sót tartalmazó vizes oldatban vagy szuszpenzióban, majd kívánt esetben lehasítjuk az adott esetben jelen lévő oldallánc-védőcsoportot vagy Y védőcsoportot és/vagy kívánt esetben a kapott dipeptidszármazékot sóvá vagy hidráttá alakítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy karboxipeptidázként élesztőből származó karboxipeptidáz-Y-t használunk. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan karboxipeptidáz-Y-t használunk, amelyet polimergyanta-vázhoz kapcsolt benzil-szukcinil-csoportokat tartalmazó affinitási gyantán affinitási kromatográfiás eljárással tisztítottunk. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy karboxipeptidázként Pénicillium janthinellumból származó karboxipeptidáz S-l-et, vagy S-2-Őt, Aspergillus saitoiból vagy Aspergillus oryzae-ból származó karboxipeptidázt, narancslevélből vagy narancshéjból származó karboxipeptidáz C-t, Citrus natsudaidai Hayata-ból származó karboxipeptidáz Cn-t, bablevélből származó fazeolint, vagy csíráztatott árpából, malátából, csíráztatott gyapotnővényből, pardicsomból, görögdinnyéből vagy Bromolein (ananász) porból származó karboxipeptidázt használunk. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy karboxipeptidázként immobilizált enzimet használunk. 6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakciót 0-70% szerves oldószert tartalmazó vizes oldatban vagy diszperzióban játszatjuk le. 7. A 6. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szerves oldószerként alkanolt, dimetil-szufloxidot, dimetil-formamidot, dimetoxi-etánt, etilénglikolt vagy etil-acetátot használunk. 8. Az 1-7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szubsztrátkomponensként egy (II) általános képletű D- vagy L-aminosav-észtert használunk, amely adott esetben hidroxilcsoporttal szubsztituált. 9. Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy nukleofilkomponensként egy (IV) vagy (V) általános képletű aminosavat vagy aminosavamidot - a képletekben B jelentése L-aminosavmaradék -használunk. 10. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy nukleofilkomponensként egy (VI) általános képletű észtert - a képletben B jelentése amino-karbonsav-maradék és R4 jelentése 1-3 szénatomos alkilcsoporthasználunk. 11. Az 1-10. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a termékben lévő C-terminális Y védőcsoportot enzimatikus úton hasítjuk le, előnyösen ugyanazon karboxipeptidáz enzimmel, amelyet a kapcsolási reakcióban is használtunk. 12. Az 1-11. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a termékben lévő egy vagy több oldallánc-védőcsoportot enzimatikus úton hasítjuk le, előnyösen egy észteráz vagy egy lipáz vagy egy proteolitikus enzim segítségével. 5 10 15 20 25 30 35 14
