203789. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antikokcidiális és növekedést serkentő hatású policiklusos savas éter-típusú antibiotikumok előállítására
1 HU 203 789 B 2 82,6 (1), 80,2 (1), 78,5 (1), 75,2 (1), 74,8 (1), 74,6 (1), 66.4 (1), 60,3 (3), 57,9 (3), 56,9 (3), 44,5 (1), 39,0 (1), 36,9 (1), 36,8 (2), 35,9 (2), 35,4 (2), 35,2 (2), 35,1 (1), 35.0 (1), 31,3 (2), 30,9 (2), 30,5 (1), 28,2 (3), 27,1 (2), 26.1 (2), 25,0 (3), 21,0 (3), 18,3 (3), 16,7 (3), 15,3 (3), 13.4 (3), 13,1 (3), 11,2 (3), 10,7 (3), és 10,6 (3). A teljes feimentlevet tartalmazó nagy fermentertankok feldolgozását úgy végezzük, hogy a kb. 4000 liter térfogatú teljes feimentlevet 1800 liter metil-izobutil-kenonnal extraháljuk, majd az oldószeres réteget Podbielniack extraktorban elkülönítjük és vákuumban süni sziruppá töményítjük be. A koncentrátumot kétszer eldörzsöljük azonos térfogatú tiszta metanollal, elkülönítjük a metanolban nem oldható olajat és a metanollal eldörzsölt anyagot vákuumban sziruppá töményítjük be. Ezt kétszer extraháljuk hexánnal, és az egyesített hexános kivonatot acetonitrillel. Az acetonitriles kivonatot eltesszük, az anyag későbbi kinyeréséhez. A hexános oldatot vákuumban betöményítjük, majd részletekben szilikagélen kromatografáljuk. A szilikagélről való deszorbeáltatást szűrőtölcséren végezzük, először hexánnal, majd metilén-kloriddal, etil-acetáttal és végül acetonnal. A metilén-kloridos és etil-acetátos kivonatokban jelen levő aktív frakciókat betöményítjük, a maradékot hexánban oldjuk és savas vízzel mossuk, majd 1%-os vizes N-metil-D-glukamin-oldattal extraháljuk. A vizes fázist nátrium-kloriddal kisózzuk és kétszer extraháljuk azonos térfogatú etil-acetáttal. A szerves rétegeket egyesítjük, aktív szénnel kezeljük, szűrjük, pH-9,0 nátrium-foszfát-pufferrel mossuk, nátrium-szulfát fölött szárítjuk, vákuumban betöményítjük és éterből kristályosítjuk. 50,8 g nátriumsót kapunk, amely azonos a kisebb léptékű fermentáció során kapott termékkel. 2. példa Az (I) képletű vegyidet szabad sav alakjának előállítása Az (I) képletű vegyület szabad sav alakját úgy állítjuk elő, hogy a nátriumsó klorofoimos oldatát erőteljesen kirázzuk azonos térfogatú pH-2 sósavoldattal, rázótölcsérben. A fázisokat szétválasztjuk és a klorofoimos réteget vízzel mossuk, majd vákuumban bepároljuk. így a szabad savat kapjuk; op.: 87-90 °C [a]2?—6,9° (ol, metanol). Elemzési eredmények; a C45H780h*0,5H20 képletre számított C 63,43 H 9,34%; talált: C 63,35 H 9,53%. 3. példa Az(I) képletű vegyidet nátriumsójának előállítása Az előző példa szerint előállított szabad savat (45 mg) 100 ml kloroformban oldjuk. Hozzáadjuk 0,5 g nátriumkarabonát 100 ml vízzel elkészített oldatát és a kapott keveréket rázótölcsérbe visszük át, majd több percen át erőteljesen rázzuk. A klorofoimos réteget elkülönítjük és a vizes réteget friss kloroformmal mossuk. Az egyesített klorofoimos kivonatokat nátrium-szulfát fölött szárítjuk, szűrjük és bepároljuk. 41 mg nátriumsót kapunk, op.: 230-235 °C. Elemzési eredmények: a C^H-nOuNa képletre számított C 62,47 H 8,97%; talált C 62,20 H 9,14%. 4. példa Az(I) képletű vegyület rubidiumsójának előállítása Az (I) képletű vegyület rubidiumsójának előállítására 30 mg szabad savat 50 ml kloroformban oldunk. Az oldathoz 35 mg rubidium-karbonátot adunk 25 ml vízben és az elegyet 2 órán át kevertetjük. A szerves fázist elkülönítjük és a vizes réteget azonos térfogatú kloroformmal extraháljuk. Az egyesített klorofoimos kivonatokat bepároljuk; így fehér színű szilárd anyagot kapunk. A rubidiumsót éterből kristályosítjuk, lassú bepárlással. A kapott kristályok röntgendiffrakciós vizsgálatát J. B ordner végezte el. 5. példa Az (I) képletű vegyidet káliumsójának előállítása Az (I) képletű antibiotikum káliumsójának előállítására 130 mg szabad savat 100 ml kloroformban oldunk. Az oldathoz 100 mg kálium-karbonátot adunk, 100 ml vízben oldva és a kapott elegyet több percig kevertetjük, majd rázótölcsérbe visszük át és több percig erőteljesen rázzuk. A szerves fázist elkülönítjük és vákuumban bepároljuk. Fehér por alakjában kapjuk az (I) képletű vegyület káliumsóját. Op.: 255-260 °C [a]F—19,6° (c-1, kloroform). Elemzési eredmények: a C45H77O14K képletre számított: C 61,34 H 8,81%; talált: C 60,91 H 8,83%. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás az új (I) képletű vegyület - amely képletben Me jelentése -CH3-csoport - és gyógyászati szempontból elfogadható kationos sói előállítására, azzal jellemezve, hogy az Actinomadura sp. ATCC 53708 törzset süllyesztett, aerob körülmények között tenyésztjük egy asszimilálható szén- és nitrogénforrást tartalmazó vizes táptalajban, és a keletkezett (I) képletű vegyületet vagy sóját kívánt esetben kinyerjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az (I) képletű vegyületet vagy sóját kinyerjük a fermentléből. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az (I) képletű vegyületet nátrium- vagy káliumsója alakjában állítjuk elő. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az (I) képletű vegyületet vagy sóját kicsapott formában, micéliumot tartalmazó keverék alakjában nyerjük ki a fermentléből szűréssel. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az (I) képletű vegyületet vagy sóját nyers alakban nyerjük ki, a teljes fermentlé porlasztva vagy fagyasztva szárításával. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 8
