203583. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bakteriális fertőzések ellen védő emberi monoklonális antitest-készítmények és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 203583B A jelen találmány immunológiai technikák alkalmazásával foglalkozik olyan új anyagok előállításához, amelyek bakteriális fertőzések kezelésében és diagnosztizálásában használhatók, és főleg olyan humán monoklonális antitestek előállításával és alkalmazásával foglalkozik, amelyek képesek védelmet nyújtani különböző baktérium-nemzetségek által okozott fertőzések ellen. Gram-pozitív és gram-negatív baktériumok egyaránt okozhatnak életet fenyegető betegségeket a fertőzött betegekben. Ezek a bakteriális fertőzések gyakran okoznak jelentős megbetegedést és halálozást. Az Uyen fertőzések megnövekedett gyakoriságúak koraszülött gyermekeknél, idősebb betegeknél, és olyan betegeknél, akik orvosilag súlyosnak ítélt körülmények között vannak, pl. égés, sebészeti trauma, lassan gyógyuló sebek, vagy rosszindulatú betegségek következményeiben szenvednek. Ezek a fertőzések tipikusan kórházi eredetűek (vagyis kórházban szerzettek), és főként azokban a betegekben fordulnak elő, akik ismételt kórházi ápolásnak voltak kitéve sebészeti beavatkozással, véredényen belüli sérüléssel, vagy immunszuppresszív szerekkel vagy antibiotikumokkal végzett hosszú időtartamú gyógykezeléssel. Ezen kívül az újszülöttek, akiknek immunrendszere éretlen, nyilvánvalóan erősen fogékonyak a születés előtti fertőzésre és agyhártyagyulladásra, amelyeket főleg gram-negatív és gram-pozitív baktériumok okoznak. A leggyakrabban megtalálható organizmusok a gram negatív és gram pozitív betegségekben az Escherichia coli (W. coli), Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae), Serratia marcescens (S. marcescens), Enterobacter aerogenes. és cloacae (E. aerogenes/cloacae), Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa), Neisseria meningitis (N. Meningitidis), Streptococcus B csoport, és Staphylococcus aureus (S. aureus) (Sonnenwirth A. C: „The Enteric Bacilli and Simüar Gram-Negative Bacteria (Abél-bacüusok és hasonló gram-negatív baktériumok), a „Microbiology” című könyv 2. kiadásának 753-790. oldalán, szerkesztették Davis BD., Dulbecco R., Eisen H. N., Ginserberg H. S., Wood W. B. és McCarty M., kiadó: Harper and Row, (1973); McCabe W. R.: „Gram-Negative Bacteremia” (Gram-negatív bakterémia), Adv. Intem. Med. 19, 135-138 (1974); Kreger és munkatársai: „Gram-Negative Bacteremia HI. Reassessment of Etiology, Epidemiology, and Ecology in 612 Patients” (Gram-negatív bakterémia HI. A kóroktan, járványtan és ökológia becslése 612 betegben) Am. J. Med. 68,332-343 (1980); Robbins J. B. és munkatársai „Escherichia coli KI Cassular Polysaccharide Associated With Neonatal Meningitis” (Az újszülöttek agyhártyagyulladásával társuló Escherichia coli KI tokos poliszacharid) NewEnglJ. Med. 290,1216-1220 (1974); Hughs J. M. és munkatársai: „Nosocomial Infection Surveülance 1980-1982” (Kórházi fertőzések áttekintése 1980-1982), Morb. Mórt. Weekly Report, 32,1SS- 16SS /1983/). Ezek közül a fertőzések közül bizonyos gram-negatív baktériumok általában sok, de nem mindegyik szerotípusa okoz bakterémiát a felnőtt népességben, üyen gram-negatív baktériumok pl. az E. coli, K. pneumoniae, E. aerogenes/cloacae, P. aeruginosa, és S. marcescens. A felnőttekkel el1 lentétben az immunológiaüag éretlen újszülöttek különösen fogékonyak a szeptikémiára és meningitiszre, amelyet pl. az E. coli tokos törzsei, a N. Meningitidis B csoport, a Hemophilus influenzae B típus és a Streptococcus B. csoport öt törzstípusa okoz. Bár más baktériumok is előidézhetik ezeket a fertőzéseket, a fentebb idézett baktériumok alkotják a fentebb említett vérfertőzésekből nyert izolátumok zömét. Az antibiotikumok jelentik már régóta az első számú gyógyászati eszközt a gram-pozitív és gramnegatív fertőzések szabályozásában és kiirtásában. Afertőzések folyamatos előfordulása és súlyossága, az antibiotikumokra rezisztens baktériumtörzsek folytonos felbukkanása, és bizonyos antibiotikumok velejáró toxicitása azonban jelzik az antibiotikum terápia korlátáit. Ezek a megfigyelések serkentik a kutatást más megelőző és gyógyászati megközelítések irányában. Általános az a nézet, hogy az élő baktériumokon hozzáférhető (külső részükön található) szerkezetekkel reaktív antitestek lehetővé teszik a baktériumok elpusztítását sokféle mechanizmus révén. Ezek között a mechanizmusok között találhatjuk a következőket: (1) a baktérium közvetlen lízise szérum komplement jelenlétében; (2) bakteriosztázis, a tápanyag-gyűjtő receptorok elzárásával; (3) a baktériumok opszonizációja és ezt követő fagocitózisa szérum komplement jelenlétében vagy távollétében; vagy (4) a baktériumok gazdaszövethez való hozzákapcsolódásának megakadályozása (Mims CA.: „Recovery from Infection” (gyógyulás fertőzésből), a „The Pathogenesis of Infectious Disease” (A fertőző betegségek kórfejlődése) című könyvben; szerkesztő: Mims C.A.; kiadó: Academic Press; 198- 222 oldal /1982/). Azoknál a baktériumoknál, amelyeknek felületi szénhidrát molekulái vannak, pl. lipopoliszacharidok (LPS) és/vagy tokok, úgy tűnik, hogy az antitest az opszonizációs mechanizmus útján a leghatékonyabb (Kaijser B. és munkatársai: „The Protective Effect Against E. Coli of O And K antibodies of Different Immunoglobulin Classes” (Különböző immunglobulin osztályok O és K antitestjeinek védő hatása E. Coli ellen), Scand. J. Immunoi. 1, 276119121). Ennek megfelelően azok az antitestek, amelyek ezekre a hozzáférhető szénhidrát szerkezetekre irányulnak, hatékony eszközt nyújtanak a baktériumok kiküszöbölésében. Általában azok az emlősök, amelyek betegséget okozó baktériumoknak vannak kitéve, antitesteket termelnek, amelyek az LPS-re vagy a kapszulára fajlagosak. Ezek az antigének kémiailag eltérő szerkezetek, amelyek gyakran ismétlődő oligoszacharid molekulákból állnak, és amelyek jelenléte meghatározza a baktériumtörzs szerotípusát. Mivel gyakran ezek az immunológiailag uralkodó bakteriális antigének, a szerotípus-fajlagos antitestek (anti-LPS vagy anti-kapsziüa) a leginkább tanulmányozottak a potenciálisan gyógyászatiig alkalmazható antitestek közül. Ezeknek az antitesteknek a korlátozott kereszt-reaktivitása miatt, és a patogén gram-pozitív és gram-negatív baktériumokon levő szénhidrátantigének láthatóan nagyon eltérő természete miatt rendkívül nehéz és költséges lenne olyan gyógyászati kiszerelést létrehozni, amely csak szerotípus-faj-2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
