203565. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kis molekulatömegű heparin, heparán-szulfát, dermatán-szulfát és sóik, valamint ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 203 565 B 2 C Táblázat A 121067 sz. európai szabadalmi leírás szerint Példa száma Reakcióidő (óra) Kiindulási heparin koncentráció (%) Hőm. CQ Tisztasága) % MT Hozam % 1. 20 1,43 50 4500 87,5 2. 24 40 75,9; 90,5 3946 88 3. 24 1,43 40 85,2; 88,2 5590 90 4. 24 2,5 70,7; 88,5 5986 75 5a.aszkorbinsav/Cu 24 0,2 40 ♦ 9260 84 5b.aszkorbinsav/H7 07 11,700 90 5c.Cu/H707 24 0,2% 40 9150 94 5d.Cu%02 24 1 10936 76 5e.Cu/H707 12,5 12400 76 Megjegyzések: a) A tisztaság megadásánál az első érték a hexózaminnak a kiindulási mért mennyiségére vonatkoztatott %-os értékén alapul, a második érték az -SO3H csoport hasonló értékén * A termék olyan szennyezett, hogy nem nyerhető ki. A táblázatban közölt eredményekből látható, hogy a kapott minták egyikének tisztasága sem haladja meg a 90,5%-ot. A reakcióidő 20-24 óra. A réz és H202 alkalmazásával az adott körülmények között végrehajtott reakció 9150-12400 dalton közötti molekulatömegű fragmentumok képződéséhez vezet, azaz a fragmentumok molekulatömege igen magas, megközelíti a kiindulási anyagét (13500 dalton). D Táblázat LMW-heparin jellemzői és előállítási körülményei a találmány szerint Példa száma Reakcióidő (óra) Termék Konc. % Hőm. CQ Tiszta% MT Hozam % 1. 2 Hep 15,25 45-60 98 4200 83,6 2. 1 Hep 9,52 35-50 100 3480 91,5 3. 2,5 Hep 10 35-60 100 4600 84,5 4. 2 LMWHep 12,5 65-70 1700 78,2 5. 1 Ds 10 25-47 71 6. 0,67 Hep 5 60 7950 92 7. 1 HS 6,6 40 100 61 12. 1 DS 10 38-40 100 4800 61 13. 1 DS 5 38 100 6000 59 Az ismert a a találmány szerinti eljárás összehasonlításából látható, hogy a találmány szerinti eljárás alkalmazásakor a reakcióidő lényegesen rövidebb, és a tennék jóval tisztább. Farmakológiái vizsgálatok A Heparin jól ismerten antitrombotikus és antikoaguláns aktivitással bíró anyag, míg a depolimerizációs eljárásokkal nyert LMW-heparin nem bír többé antikoaguláns aktivitással, de antitrombotikus aktivitással igen. Ez az oka annak, hogy az LMW-heparin előállítását találmányi jellegűnek és hasznosnak tartjuk. Másrészt a dermatán-szulföt CDS) nem bír in vitro aktivitással, szerkezete a heparinétól igen eltérő. Ha a technika állásából nyilvánvaló következtetésnek tűnne is a találmány szerinti gyökös depolimerizálási eljárás dermatán-szulfát esetén való alkalmazása, ami önmagában sem állítható; sem a nyerhető fragmentumok szerkezete, sem farmakológiai aktivitásuk nem 50 lenne előrelátható. Vizsgálatokat folytattunk a dermatán-szulfát kis molekulatömegű fragmentumainak gyógyszerhatási és farmakokinetikus viselkedésére vonatkozóan, és nem várt, értékes, előre nem látható eredményekre ju- 55 tottunk a natív és a kis molekulatömegű dermatánszulfát gyógyszertani vonatkozásait illetően. A 13. példában leírt módon a természetes dermatán-szulfátból (OP 352) kis molekulatömegű dermatán-szulfátot (OP 370) állítunk elő 61%-os hozammal. 60 A termék fizikai jellemzői a 8. táblázatban láthatók. 12
