203554. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 5-amino-8-(fenil-, vagy szubsztituált fenil)-3H,6H-1,4,5a,8a-tetraaza-acenaftilén-3-onok és a vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 203 554 B 2 Vegyület Dózis mg/kg Túlélők (%) 5-{[(4-klór-fenil)-metil]-amino}-8-[3-(trifluor-metil)-fenü]-3H,6H-l,4-5a,8a-tetraaza-acenaftüén-3-on 100 55 5-[(2-hidroxi-etil)-amino]-8-fenü-3H,6H-l,4-5a-8a-tetraaza-acenaftilén-3-on 100 60 5-(metü-amino)-8-fenil-3H,6H-l,4,5a,8a-tetraaza-acenaftüén-3-on 100 95 5-(butil-amino)-8-[3-(trifluor-metfl)-fenil]-3H,6H-l,4-5a,8a-tetraazaacenaftilén-3-on 100 57,5 5-[(2-hidroxi-etü)-amino]-8-[3-(trifluor-metU)-fenü]-3H,6H-l,4-5a,8atetraaza-acenaftüén-3-on 100 80 5-{[(2-metü-fenil)-metü]-amino}-8-[3-(trifluor-metü)-fenü]-3H,6H-l,4-5a,8a-tetraaza-acenaftüén-3-on 25 50 100 47.5 52.5 70 5-(etil-amino)-8-(3-(fluor-fenil)-3H,6H-l,4-5a,8a-tetraaza-acenaftüén-10 55 3-on 100 55 Egy másik in vivo tesztet végeztünk, amely emlősökben a csökkent idegfunkcióval kapcsolatos, ez volt az oxigénhiány-indukálta amnézia-teszt. Ezt a tesztet 25 arra alkalmazzák, hogy meghatározzák az oxigénhiány által előidézett amnézia-csökkenést egéren gyógyszer hatására, a gyógyszert nem kapott fiziológiás sóoldattal kezelt kontroll állatokhoz viszonyítva. Egy sokk-motivált, egyszeri kísérletet végeztünk 30 egy-lépéses passzív elkerülési eljárást alkalmazva. 25 Royal Hart és Taconic Farms 9 hónapos korú egerekből álló csoportokat egy kétkamrás doboz első kamrájába helyeztünk és hagytuk, hogy önkényesen átlépjenek a hátsó kamrába. Ahogy az egér a hátsó kamrába 35 lépett, egy ajtó automatikusan becsukódott az állat mögött, és a lábába enyhe elektromos sokkot vezettünk (0,4 mA 4 másodpercig). A láb-sokk után az egereket először oxigénhiányos környezetbe helyeztük 12 másodpercre (0% oxigén), és ezáltal gyorsan eszmélet- 40 lenség lépett fel. Ezután 15% oxigént tartalmazó hipoxiás környezetbe helyeztük az állatot 4 percre, és ezáltal lassan feléledt az egér. Az egész tesztet 24 óra múlva megismételtük, és minden esetben teljesen felgyógyultnak mutatkoztak az egerek az előző oxigénhiányos és hipoxiás kezelésből. Valamennyi tesztvegyületet intraperitoneálisan adagoltuk, 10-200 mg/kg-os dózisban (az előző tesztek aktív dózisától függően), 30 perccel a tréning és a tesztelés előtt. A kontroll állató-^ kát intraperitoneálisan csak fiziológiás sóoldattal oltottuk be 0,01 cm3/testtömeg g dózisban. Feljegyeztük a tréning és tesztelés céljából azt az~ időt, amely eltelt aközben, hogy az állat a hátsó kamrába lépett. Feltehetőleg minél inkább emlékszik az állat a sokkolásra, annál jobban fellép a gátló hatás, hogy belépjen a hátsó kamrába, és annál inkább hosszabbodik az az idő, hogy ismét belépjen. 30%-os javulás a fiziológiás sóoldat-kontrollhoz képest lényeges hatásnak minősül. A találmány szerint előállított reprezentatív vegyületekkel kapott teszt-eredmények a n. táblázatban találhatók. II. táblázat Oxigénhiánnyal előidézett passzív elkerülési amnézia-teszt Vegyület Dózis mg/kg %-os javulás 5-(2-metü-propü-amino)-8-[3-(trifluor-metü)-fenü]-3H,6H-l,4-5a,8atetraaza-acenaf tüén-3 -on 50 100 43,5 158,0 5-amino-8-[3-(trifluor-metü)-fenü]-3H,6H-l,4-5a,8a-tetraaza-acenaftilén-3-on 5 10 100 45.8 51.8 53,5 5-(butil-amino)-8-fenü-3H,6H-l,4,5a,8a-tetraaza-acenaftilén-3-ón 25 64,3 5
