203544. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3,18-dihidroxi-9,13-epoxi-labdán-származékok előállítására
1 HU 203 544 B 2 A találmány tárgya eljárás új 3,18-dihidroxi-9,13- epoxi-labdán-szánnazékok és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására. E vegyületeknek hemosztatikus (vérzéscsillapító) hatásuk van. 3,18-dihidroxi-9,l 3-epoxi-labdán-származékok, közelebbről a 9,13-epoxi-3,15,16,18-tetrahidroxilabdán előállítási eljárását ismerteti az SU A 99 459 számú publikált szovjet szabadalmi bejelentés. Ennek értelmében a 9,13-epoxi-3,15,16,18-tetrahidroxi-labdánt úgy állítják elő, hogy a Lagochilus inebrius növény föld feletti részét diklór-etánnal 80-85 °C-on extrahálják, majd a végterméket elkülönítik. Ez az eljárás más 3,18-dihidroxi-9,13-epoxi-labdán-származékok előállítását nem teszi lehetővé. A találmány célja eljárás kidolgozása új, az eddigieknél erősebb hemosztatikus hatású vegyületek előállítására. Azt találtuk, hogy egyes 3,18-dihidroxi-9,13-epoxi-labdán-származékok jelentős hemosztatikus hatással rendelkeznek. Ennek alapján a találmány tárgya eljárás az (I) általános képletű, új 3,18-dihidroxi-9,13-epoxi-labdánszármazékok előállítására - a képletben R jelentése (a) vagy (b) képletű csoport. Az (I) általános képletű vegyületeket a találmány szerint úgy állítjuk elő, hogy 9,13-epoxi-3,15,16,18- tetrahidroxi-labdánt forró szerves oldószerben katalitikusán dehidrogénezünk, majd a végterméket elkülönítjük. A végtermék hozamának növelése céljából célszerű a kiinduló anyagként alkalmazott 9,13-epoxi- JJ5,16,18-tetrahidroxi-labdánt a dehidrogénezés előtt 2%-os vizes kénsavoldat jelenlétében acetonnal kezelni. Kívánatos továbbá katalizátorként aktivált Raney-nikkel használata. Szerves oldószerként előnyösen toluolt alkalmazunk. A találmány szerinti eljárás kivitelezése során a 9,13-epoxi-3,15,16,18-tetrahidroxi-labdánt, a szerves oldószert (például benzolt, toluolt vagy valamilyen ketont) és a dehidrogénező katalizátort, előnyösen aktivált Raney-nikkelt reaktorba helyezzük, majd a reakciót az adott oldószer forráspontján játszatjuk le. A katalitikus dehidrogénezés reakciójának befejezése után a végterméket úgy különítjük el, hogy a katalizátort kiszűrjük, a szűrletet nátrium-hidroxiddal, majd tömény kénsavval kezeljük (savas kémhatás eléréséig). Az ekkor kivált csapadékot szerves oldószerrel, például dietü-éterrel extraháljuk. A kivonatot 5 semleges kémhatásig mossuk, utána a dietil-étert ledesztilálljuk, és átkristályosítás után végtermékként 3.18- dihidroxi-9,13-epoxi-labdán-l 5,16-olid-ot kapunk. Ha végtermékként 9,13-epoxi-3,16,18-trihidroxi- 10 labdán-15-karbonsav-nátriumsó-trihidrátot kívánunk elkülöníteni, akkor a 3,18-dihidroxi-9,13-epoxi-labdán-15,16-olid etanolos oldatát vizes nátronlúgoldattal 9-es pH-értékig lúgosít juk, utána az oldatot bepároljuk, és a maradékot etanolból átkristályosítjuk. 15 Az (I) általános képletű vegyületek (a továbbiakban esetenként: a találmány szerinti vegyület) hemosztatikus hatását in vivo és in vitro kísérletekben, biokémiai tesztekkel, valamint tromboelasztográffal vizsgáltuk. E kísérleteinket kutyákon, nyulakon és fehér patká- 20 nyokon végeztük. A vizsgálandó vegyületet egy dózisban intravénás vagy szubkután úton 1, 5, 10, 25 és 50 mg/kg-testsúly (a következőkben röviden: mg/kg) mennyiségben adagoljuk. Vizsgálat céljára a vért a szabaddá tett combvénából a vegyület beadása előtt, 25 majd a beadagolás után 10, 30, 60,90 és 120 perccel vettük le. A tromboelasztográf küvettájába a vért 0,36 ml mennyiségben, a biokémiai vizsgálatok céljára 10 ml-ig terjedő mennyiségben vettük le (tartósítószerként 1,34%-os nátrium-oxalát oldatot használ- 30 tunk, amelyet 1:9 arányban adtunk a vérhez). A találmány szerinti vegyület 1 és 5 mg/kg mennyiségben, intravénásán adagolva, kutyákon a tromboelasztogram (a következőkben rövidítve: TEG) indexét lényegében nem változtatták meg. 35 Egy másik kísérletsorozatunkban a 9,13-epoxi-3.16.18- trihidroxi-labdán-15-karbonsav-nátriumsótrihidrátot 10 mg/kg mennyiségben adagoltuk az állatoknak. Megfigyeltük, hogy e vegyület a kutyák véralvadási folyamatát elősegítette. 40 A következő kísérletsorozatunkban a 9,13-epoxi-3.16.18- trihidroxi-labdán-l 5-karbonsav-nátriumsótrihidrátot az állatoknak 25 mg/kg mennyiségben adagoltuk. Az így kapott adatokat statisztikai módszerrel eldolgoztuk és az 1. táblázatban összegeztük. 45 1. táblázat 9,13-Epoxi-3-16-18-trihidroxi-labdán-15-karbonsav-nátriumsó-trihidrát hatása kutya TEG-értékeire (adag: 25 mg/kg; 10 állatból álló csoport) Sorszám TEG-értékek A véralvadási reakció ideje R,mm 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 6 7 1. Számtani középérték, M 23,0 10,0 12,0 9,0 11,0 2. Négyzetes középeltérés, ± 8,70 3,0 3,50 2,20 2,68 2
