203372. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hyaluronsav asszociátumok és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására, valamint kozmetikai készítmények
9 HU 203 372 B 10 2. példa Bőrgyógyászati és kozmetikai célokra alkalmas cink-hyaluronát oldat 100 ml térfogatú mérőlombikba 0,50 g nátrium-hyaluronátot mérünk be és 12,50 ml 0,100 mól.dm'3 koncentrációjú cink-klorid ionmentes vízzel készült oldatát adjuk hozzá. (Használhatunk eltérő koncentrációjú cink-klorid oldatot is, de a cink-klorid mennyiségeinek azonosnak kell lennie.) A nátrium-hyaluronátot ebben az ionmentes vízzel 50 ml-re kiegészített oldatában 12 órán át duzzadni hagyjuk, majd rázogatás közben feloldjuk, ezt követően ionmentes vízzel jelre töltjük. Ily módon 0,5 m/v%-os cink-hyaluronát oldatot kapunk. Az oldat készítéséhez használt nátrium-hyaluronát adatai: viszkozitás [t|] %-c0*: 16,5 dl/g fehérjetartalom: 0,8 tömeg% 3. példa Injekciós minőségű készítmények előállítására alkalmas cink-hyaluronát oldat A példában leírt műveleteket steril körülmények között végezzük. 100 ml térfogatú mérőlombikba 0,20 g purum pulvis minőségű nátrium-hyaluronátot mérünk be és 5,0 ml - kétszer desztillált vízzel (aqua deszt pro inj; pyrogénmentes, steril) készült - 0,100 mól.dm'3 koncentrációjú cink-klorid oldatot adunk hozzá, majd kétszer desztillált vízzel a térfogatot 50 ml-re egészítjük ki. Egy éjszakán át duzzadni hagyjuk a nátrium-hyaluronátot, ezt követően rázogatással feloldjuk, majd kétszer desztillált vízzel jelre töltjük. Az oldatot 0,45 fi. méretű membrán-szűrőn leszűrjük. Ily módon 0,2 g/v% cink-hyaluronátot tartalmazó oldatot kapunk. Az oldat készítéséhez használt nátrium-hyaluronát adatai: minőség: purum pulvis; pyrogénmentes, steril molekulatömeg: 1 850 000 fehérjetartalom: 0,07 tömeg% UV abszorpció A, 257: 0,133 \ ft: 0,075 viszkozitás fq] 13,7 dl/g HA tartalom: 98,12 tömeg% 4. példa Ionmentes cink-hyaluronát oldat 200 ml - a 2. példában leírt módon kapott - 0,50 m/v% cink-hyaluronát oldathoz keverés mellett úüO ml pro anal minőségű etanolt adunk, a kivált cink-hyaluronátot üvegszűrőn szűrjük, majd két ízben 50- 50 ml azonos minőségű etanollal mossuk, vákuumban szárítjuk. 0,88 g cink-hyalurónátot kapunk, amelyből - a 2. példában leírt módon - 0,50 m/v% cink-hyaluronátot tartalmazó oldatot készítünk. Ez a cink-hyaluronát oldat nem tartalmaz a nátrium-hyaluronát és a cink-klorid reakciójából származó nátrium-kloridot, azaz gyakorlatilag ionmentes. 5. példa Gyógyászati minőségű, ionmentes cink-hyaluronát vagy oldata E példában leírt műveleteket steril körülmények között végezzük. 500 ml - a 3. példa szerint kapott - cink-hyaluronát oldathoz keverés mellett 1500 ml puriss. minőségű etanolt adagolunk. Az adagolás befejezése után 30 percig keveijük még a rendszert, majd a kivált cink-hyaluronátot üvegszűrőn szűrjük, háromszor 100-100 ml puriss minőségű etanollal mossuk, vákuumban kíméletes és steril körülmények között megszárítjuk. 6. példa Ionmentes cink-hyaluronát 1 g nátrium-hyaluronátot 400 ml kétszer desztillált vízben feloldunk, majd keverés közben 200 ml 10 tömeg%-os HyamineR(puriss) 1622 [benzil-dimeül-/2-/2- /p-1,1,3,3 ,-tetrametil-butü-fenoxi/(etoxi)-etiV-ammóniumklorid] oldatot adunk. A keletkezett hyaluronsav-kvatemer-ammónium asszociátum csapadékot centrifugálással elválasztjuk, 100-100 ml kétszer desztillált vízzel mossuk, majd újból centrifugáljuk. A kimosott csapadékot 400 ml 2 m/v% cink-kloridot (pH = 5,0-5,4) és 400 ml n-butanolt tartalmazó oldószerpárban feloldjuk. A két fázist elválni hagyjuk, a vizes fázist - amely a cink-hyaluronátot oldva tartalmazza - 0,45 p pórusméretű membránszűrőn szűrjük, ezt követően háromszoros térfogatú etanollal a cink-hyaluronátot kicsapjuk, üvegszűrőn szűrjük, etanollal mossuk, végül kíméletes körülmények között nitrogénatmoszférában megszárítjuk. Hozam: 0,82 g cink-hyaluronát Szükség esetén a cink-hyaluronátból 0,50 m/v%-os oldatot készítünk, majd a 4. példában leírt módon tovább tisztítjuk. A kiindulásként használt nátrium-hyaluronát adatai: viszkozitás [Tf] 16,5 dl/g fehérjetartalom: 0,8 m/v% A példában leírt módon egyéb kvatemer-ammónium sóval képzett asszociátumból is készíthetünk cink-hyaluronátot, ilyen kvatemer-ammónium sók lehetnek például: a) tetradecil-oximetil-trimetil-ammónium-klorid (HU 188 537 sz. szabadalmi leírás), b) hexadecil-piridinium-klorid, c) cetil-piridinium-klorid, d) trimetil-ammónium-klorid stb. 7. példa Kobalt-hyaluronát A 6. példa szerint járunk el, azzal a változtatással, hogy a hyaluronsav-kvatemer-ammónium asszociátumát 2 m/v% kobalt(II)-klorid 6H20 és n-butanólt tartalmazó oldószerpárban oldjuk fel. 8. példa Cink-kloriddal izotonizált, 0,50 m/v% cink-hyaluronátot tartalmazó vizes oldat 0,50 g nátrium-hyaluronátot 100 ml térfogatú mérőlombikba viszünk és ahhoz kb. 50 ml 0,110 mól.dm~3 koncentrációjú cink-klorid oldatot adunk, majd egy éjszakán át duzzadni hagyjuk. Másnap rázogatás közben a nátrium-hyaluronátot feloldjuk, ezt követően a mérőlombikot 0,110 móldm'3 koncentrációjú cink-klorid oldattal jelig töltjük. Az oldat ozmózisnyomása ekvivalens nátriumklorid koncentrációban kifejezve 0,1491 mól.dnr3, pH = 5,0. Ha szükséges, a pH-t 2,00 ml/0,150 mól.dm'3 nátriumacctáttal 5,5-5,6-ra állítjuk. A pH beállítás után az oldat 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
