203363. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2',3'-didezoxi-2',2'-difluor-nukleozidok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 203363B részletekben hozzáadunk 1,79 g (33 mmól) szilárd nátrium-metilátot, miközben a reakcióelegy hőmérsékletét (-20 °C)-on tartjuk. A reakcióelegyet 3 órán át (-20 °C)-on kevertetjük, majd 2 g ecetsav hozzáadásával semlegesítjük. A keveréket csökkentett nyomáson 40 °C-on bepároljuk. A maradékot vízzel és etilacetáttal keverjük össze. A szerves réteget elkülönítjük, vízzel és telített nátrium-klorid oldattal mossuk, nátrium-szulfát fölött szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott maradékot szilikagélen kromatografáljuk és 4:1 hexán:etilacetát eleggyel eluáljuk. A termék-frakció kat egyesítjük és csökkentett nyomáson bepároljuk. 10.4 g l-(terc-butü-dimetil-szililoxi)-5-benzoil-2- dezoxi 2,2-difluor-ribózt kapunk. Tömegspektrum: m/c= 389= P+l; m/e= 331= P terc-butil. 10,4 g (27 mmól) előbbi köztiterméket és 0,05 g 4-dimetil-amino-piriőint 220 ml száraz piridmben oldunk és az oldathoz nitrogén atmoszfér ában hozzáadunk 4,6 g (3,7 ml, 27 mmól) fenil-klór-tionokarbonátot. A reakcióelegyet egy éjjelen át szobahőmérsékleten kevertetjük. A reakcióelegyet vákuumban 50 C-on betöményítjük. 14,2 g 1 -(terc-butil-dimetü-szüiloxi)-3-(0-fenil-karbono-tiooxi)-5 -benzoil-2-dezoxi-2,2-difluor-ribózt kapunk, amelyet további kezelés nélkül használunk fel. Tömegspektrum: m/e= 467=P-terc-bu tii. 14,24 g (27 mmól) előbbi köztit érmékét és 0,05 g 2,2’-azo-bisz(2-metilpropionitrill) 280 ml száraz toluoiban oldunk és az oldathoz nitrogén atmoszférában hozzáadunk 14,32 ml (54 mmól) tributil-ónhidridet. A reakcióelegyet 4,5 órán át 85 °C-on tartjuk. A reakcióelegyet bepároljuk; így 30,57 g nyers l-(terc-butU-dimeül-szilüoxi)-5-benzoil-2,3-dide zoxi-2,2-difluor-ribózt kapunk, amelyet további kezelés nélkül használunk fel. ‘íí NMR (CDCI3,300 MHz); delta: 0,15 (m, 6H. SÍCH3), 0,95 (m, 9H, terc-butil), 2,45 (m, 2H, 3’A&B), 4,5 (m sorozat, 3H, 4’ & 5’ A&B), 5,2 (m, 1H, 1’), 7,8 (m, sorozat, 5H, benzoil). 1,0 g (2,7 mmól) előbbi köztiterméket 15 ml tetrahidrofuránban oldunk és az oldathoz hozzáadunk 5.4 ml (5,4 mmól) 1,0 N tetrahidrofurános tetrabutil-ammónium-fluorid oldatot. A reakcióelegyet 2 órán át szobahőmérsékleten kevertet jük. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot etilacetátban oldjuk, az oldatot vízzel mossuk, nátrium-szulfát fölött szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott olajat szilikagél oszlopra visszük fel és grádiens eluciót végzünk (5% etüacetátot tartalmazó hexán — 25% etilacetátot tartalmazó hexán). A termék-frakciókat egyesítjük és csökkentett nyomáson bepároljuk. 0,15 g 5-benzoil-2,3-didezoxi-2,2-difluor-ribózt kapunk. Tömegspektrum: m/e= 258= 0P. 0,23 g (1,5 mmó!)6-klór-purint 10 mi tetrahidro- 1 uránban oldunk és az oldathoz hozzáadunk 0,40 g (1,5 mmól) trifenil-foszfint és 0,26 g (1,5 mmól) azodikarbonsav-dietilésztert. Ehhez az oldathoz hozzáadunk 0,26g (1,0 mmól) előbbi köztiterméket, tetrahidrofurános oldat alakjában. A reakcióelegye t szobahőmérsékleten kb. 12 órán át kevertetjük. Az oldószert vákuumban ledesztilláljuk és a mara-17 dékot szilikagélen kromatografáljuk. Az eluálást 2:1 hexán:etilacetát eleggyel végezzük. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert ledesztilláljuk. 50 mg alfa,béta-l-(6-klór-9H-purin- 5 9-il)-5-benzoil-2,3-didezoxi-2,2-difluor-ribózt kapunk. Tömegspektrum: m/e= 395= P+l. 50 mg (0,127 mmól) előbbi köztitermék-keveréket 9 ml metanolban oldunk és az oldatot kb. 0 °C-on 10 vízmentes ammóniával telítjük. A reakcióedényt leforrasztjuk és a keveréket hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni. Az elegyet kb. 12 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük és az illékony anyagokat csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. 40 mg kere- 15 sett terméket kapunk keverék alakjában. Tömegspektrum: m/e= 271 = P. A találmány szerinti vcgyületekkel érzékeny daganatokat — emlősökben — kezelhetünk. Ennek keretében az ilyen kezelésre rászoruló emlősnek az 20 (I) általános képletű vegyüktből a tumorellenes ha tás szempontjából megfelelő mennyiséget adago lünk be. Az eljárás szerint a vegyület az emlősöknek különböző módokon adható be, ideértve az orális, rektális, transzdermális, szubkután, intravénás, int- 25 ramuszkuláris vagy intranazális utat. A „daganatellenes hatás szempontjából megfele lő mennyiség”, a leírásban használt értelemben, az (I) általános képletű vegyület olyan megfelelő mennyiségére vonatkozik, amely képes kemoterápi- 30 ás hatás kifejtésére emlősökben, különösen emberben. Az aktív vegyületek tág dózistartományban hatásosak. A napi dózis pl. rendszerint a kb. 0,1-kb. 1200 mg/kg testtömeg tartományba esik. Felnőttek esetében előnyben részesítjük azt a kezelési mód- 35 szert, amely szerűit a kb. 0,1-kb. 50 mg/kg tartományba eső mennyiséget alkalmazunk, egyedi vagy osztott dózis alakjában. Magától értetődő azonban, hogy a ténylegesen beviendő vegyület-mennyiséget az orvos határozza meg a tényleges körülmények 40 alapján, amilyenek pl. a következők: a kezelendő betegség, a bevitelre kerülő konkrét vegyület, a választott adagolási mód, a kor, a testtömeg, a beteg egyedi reakciója, és a beteg tüneteinek súlyossága. Ezért a megadott dózis-tartományok nem tekinthetők 45 úgy, hogy ezek bármilyen vonatkozásban korlátoznánk a találmány szerinti oltalmi kört. A leírásban használt értelemben az „érzékeny daganat” rendellenes szöveti növekményt jelent emlősökben, amely alkalmas az (I) általános képletű 50 vcgyületekkel való kezelésre. Az (I) általános képletű vegyületek aktívak tumorokkal (szilárd és nemszilárd típusúakkal) szemben és hatásukat oly módon fejtik ki, hogy cito toxikus jellegük révén a gyorsan osztódó sejtek növekedését befolyásolják. Né- 55 hány példa azokra a tumorokra, amelyekkel szemben az (I) általános képletű vegyületek hatásosak: L1210V limfocita-leukémia; 6C3HED, CA755, P1534J, X5563 mielóma stb. A találmány szerinti jellegzetes vegyületek daga- 60 natellenes hatásának kimutatását egy standard szűrési technikával végezzük, amelyeket a szakterületen potenciális tumorellenes hatású vegyületek vizsgálatára alkalmaznak. Ezeket a szűrési technikákat használták fel pl. olyan, a kereskedelemben 65 hozzáférhető rákellenes anyagok tumorgátló aktivi-18 10
