203343. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, optikailag aktív transz 1-etil-oktahidro-indolo-[2,3-a]-kinolizin-1-il-alkánkarbonsavamid-származékok és az azokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 203 343 A 2 nyok dekapitálása után a teljes agyat eltávolítottuk és tízszeres térfogatú jéghideg 0,25 mólos szaharóz oldatban homogenizáltuk. A homogenátumot 15 000 g-vel 10 percig +4 *C-on centrifugáltuk HI-SPIN centrifugán, majd a felülúszót összegyűjtöttük, és 78 000 g-mal 60 percig +4 *C-on centrifugáltuk MSE Superspeed centrifugán. A csapadékot 0,15 mólos KC1 oldatban szuszpendáltuk. Az ily módon előállított mikroszómát szárazjég-acetonban lefagyasztottuk, majd felhasználásig - 70 *C-on tároltuk. Az inkubációs elegy összetétele a következő volt; 50 mmól TRIS- HCI pH:6,8; 0,2 mmól FeCh; 1 mmól KH2PO4; 0,5 mmól AP; 0,2 mg mikroszóma, valamint a vizsgálandó vegyületek. Az inkubációs idő 20 perc, az inkubálás hőmérséklete 37 *C volt. A lipidperoxidációt 0,4 mmól NADPH adásával indukáltuk. (A vak minták nem tartalmaztak NADPH-t.) A reakció leállítását 0,375 ml leállító oldattal végeztük, melynek összetétele a következő: 40% TCA:5 mól HC1-2:1. A malondialdehid képződést tiobarbitursav segítségével határoztuk meg. A reakció leállítása után a mintákhoz 1 ml 1%-os tiobarbitursavat mértünk és 10 percre kb. 100 'C-os vízfürdőbe tettük. Ezután a mintákat 2000 g-mal 10 percig +4 *C-on centrifugáltuk. A színes felülúszó extinkció értékeit 535 nm-en HITACHI 150-20 spektrofotométeren mértük meg. A vegyületeket 30 pmól koncentrációban vizsgáltuk és a hatást gátlás%-ban fejeztük ki. Ezeket a gátlás% értékeket a következő táblázatban tüntettük fel. vegyület gátlás% 1. példa szerinti 63 2. példa szerinti 24 3. példa szerinti 57 4. példa szerinti 93 5. példa szerinti 82 A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek gasztrocitoprotektív hatást egyáltalán nem mutatnak. Ezt az bizonyítja, hogy az előzőekben ismertetett tesztekben vizsgálva, >100 mg/kg dózisban orálisan egyáltalán nem mutattak gátlást. A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek által mutatott antioxidáns - lipidperoxidációt gátló - hatással a 191 495 számú magyar szabadalmi leírásban felsorolt egyéb hatások nincsenek közvetlen összefüggésben. A találmány szerinti eljárásban kiindulási anyagként használt (II) általános képletű vegületeket a 177 500 számú magyar szabadalmi leírásban ismertetettek szerint állíthatjuk elő. Az R-CH2-CH2-NH2 általános képletű aminok könnyen hozzáférhető, többnyire kereskedelemben kapható termékek. A (H) és (ül) általános képletű vegyületek reakcióját oldószer nélkül, vagy valamilyen magasabb forráspontú aromás szénhidrogénben, így például xilolban, klórbenzolban, 140-160 *C hőmérsékletben, valamilyen nemesgáz vagy nitrogéngáz atmoszférában hajtjuk végre. A reakcióidő általában 4-10 óra, a reakció lefutását vékonyréteg-kromatogaráfiával követhetjük. A találmány szerinti eljárással előállított (I) általános képletű vegyületeket a szokott módon, valamilyen alkalmas oldószerből való kristályosítással, vagy oszlopkromatográfíával tisztítjuk. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek szerkezetét az elemanalízis eredmények és a spektrometriás adatok egyértelműen igazolják. Az (I) általános képletű vegyületeket kívánt esetben valamilyen szervetlen vagy szerves savval savaddíciós sóvá alakíthatjuk a szokásos módon. Szervetlen savként például sósav, hidrogén-bromid, kénsav, perhalogénsavak, például perklórsav; szerves savként például hangyasav, ecetsav, propionsav; továbbá alkilszulfonsavak, így metánszulfonsav, etánszulfonsav; valamint aminosavak, így aszparaginsav, glutaminsav alkalmazható. Az (I) általános képletű hatóanyagot a gyógyászatban szokásos, parenterális vagy enterális adagolásra alkalmas, nem toxikus, iners szilárd avagy folyékony hordozóanyagokkal és/vagy segédanyagokkal összekeverve gyógyászati készítményekké alakíthatjuk. Hordozóanyagként például vizet, zselatint, laktózt, keményítőt, pektint, magnézium-sztearátot, sztearinsavat, talkumot, növényi olajokat, mint amilyen a földimogyoróolaj, olívaolaj stb. alkalmazhatunk. A hatóanyagot a szokásos gyógyászati készítmények formájában, így különösen szilárd alakban, például gömbölyített vagy szögletes tabletta, drazsé, kapszula, így zselatin kapszula, pirula, kúp stb. formájában készíthetjük ki. A szilárd vivőanyag mennyisége széles tartományon belül változhat, előnyösen körülbelül 25 mg és 1 g közötti érték. A készítmények adott esetben szokásos gyógyászati segédanyagokat, például tartósítószereket, stabilizálószerket, nedvesítőszereket, emulgeálószereket, stb. is tartalmaznak. Elkészítésük szokásos módszerekkel, például - szilárd készítmények esetében - a komponensek szitálásával, keverésével, granulálásával és préselésével történhet. A készítményeket további szokásos gyógyszertechnikai műveleteknek, például sterilezésnek is alávethetjük. A találmányt közelebbről az alábbi kiviteli példákkal szemléltetjük anélkül, hogy igényünket ezekre a példákra korlátoznánk. 1. példa (+)-3-[la-etil-l,2,3,4,6,7,12,12bß-oktahidro-indoIo (2,3-a)-kinolizin-1 ß-il]-propionsav-triptamid-metanolát a, R-3-indolil) 9,5 g (27,8 mmól) (+)-la-etil-lß-(metoxikarboniletil)-l,2,3,4,6,7,12,12bß-oktahidro[2,3-a]kinolizint és 4,91 g (30,7 mmól) triptamint 140 *C-on, argon áramban keverünk 4 óra hosszat. 80 *C-ra lehűtve 100 ml metanolban feloldjuk, és kristályosodni hagyjuk. Kitermelés; 8,8 g (67%) cím szerinti vegyület. Olvadáspont 103 *C. [a]5°—28* (c-1, CHjOH/CHClj) Elemanalízis eredmények a CmHkH^CHjOH összegképlet alapján (500, 66): 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
