203321. lajstromszámú szabadalom • Eljárás difenil-szulfid-származékok és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 203321 B 13 14 ül. táblázat: IL-2 termelés vizsgálata Vegyület 1. cpm (beütés/perc) Vizsgálat száma 2. 3. 4. Értékelés N’-{4-[(4-fluor-fenil)-szulfonil]-f enil}-N -N-dimetü-acetamid in-mono(hidrogén-klorid) 19945 N.V. N.V. N.V. ++ N’,N”’-[szulfonil-bisz(p-fenilén]-bisz-[N,N-dimetil-acetamidin] N.V. 17051 N.V. N.V. +++ Kontroll 3151 1920 23878 90570 N.V.: nem vizsgált ++: 4-7-szeres Kontroll: kezeletlen, normál egér +++: 8-10-szeres növekedés +: normálhoz képest 1-3-szoros IV. Anti-SRBC antitest vizsgálat A vizsgálandó vegyületeket orálisan adjuk az 0 napon, 200 vagy 600 mg/kg dózisban. A 4. napon intraperitoneálisan 0,1 ml 10%-os birka vörösvértest (RBC) szuszpenziót adunk. Tíz napmúlva a fenti módon kezelt egerekből kinyerjük a lépsejteket, 50 ml-ben 4xl06 vagy 2xl06 lépsejtet 50 ml, 15% birka HBC-t és 1:4 hígításban tengerimalac komplementet tartalmazó szuszpenzióval elegyítünk. A kapott elegy 100 ml-ét táplemezre helyezzük és 37 °C- on 30-45 percen keresztül inkubáljuk. Az antitest- 25 képző sejtek számát úgy határozzuk meg, hogy megszámoljuk a képződött szemmel látható plakkokat. IV. táblázat: Anti-SRBC antitest képződése Vegyület 1. PFC/107lépsejt Vizsgálat száma 2. Értékelés N’,N”’-[szulfonü-bisz(p-fenilén]-bisz[N,N-dimetil-butiramidin] N.V. 1765 +++ N’,N”’-[szulfonil-bisz(p-fenilén]-bisz[N,N-dimetil-propionamidin] N.V. 726 N.S. N’-{4-[(4-fluor-fenü)-szulfonil]-fenü}-N-N-dimetil-propionamidin 1933 N.V. ++ N’-{4-[(4-fluor-fenil)-szulfonil]-fenil}-N-N-dimetil-acetamidin 2138 N.V. ++ N’-{4-[(4-fluor-fenil)-szulfonil]-fenil}-N-N-dimetil-acetamidin-mono(hidrogén-klorid) 1167 Kontroll 1276 N.V. 830 N.S. ± N.T.: nem vizsgált N.S.: nem szignifikáns Kontroll: kezeletlen normál egér ++: normál kontrolihoz képest 1,5-szörös emelkedés PFC: plakk-képző sejtek száma +++: normál kontrolihoz képest 2,0-szeres emelkedés V Telepképződés stimuláló faktor előállítása Egér csontvelősejtek előállítása Egerek combcsontját eltávolítjuk és a velősejte- 60 két 23-as méretű tűvel leszívatva összegyűjtjük és 5 ml RPMI 1640 tápközeget tartalmazó csövekbe szétosztjuk. Az alikvotokat 2%-os ecetsavoldatban 0,2% kristályibolya festéket tartalmazó oldattal hígítjuk és a combcsontonkénti magvas sejtek számát 65 vérsejtszámlálóval, közvetlen számlálással meghatározzuk. CSF indukálásra kifejtett halás egérben Az egérszérumokat telepképződést stimuláló faktor (CSF) szempontjából normál csontvelősejttenyészetekben vizsgáljuk. A CFS-t olyan rendszerben vizsgáljuk, amelyben 5xl04 normális 8
