203276. lajstromszámú szabadalom • Készülék és eljárás vágott sebek vagy kötőszövetek hegesedési képességének meghatározására
HU 203276 B a lehető leggyorsabban megindíthatok. A sejt-mintavevő készülék klinikai felhasználása: Egy operáció végén, mielőtt a sebet lezárnánk, előre meghatározott alakra és méretre vágott cellulóz szivacsot, amely szilikon gumicső egyik végére van rögzítve, 0,9% só oldattal itatunk át, majd ezután a csövet a sebbe helyezzük be olymódon, hogy a cső nyitott végét steril körülmények között ragtapasz segítségével a bőrhöz erősítjük. A csövet a sebből bizonyos idő után könnyed húzással eltávolítjuk. A cső nyitott végét, amely a bőrön volt, a szivacs öblítése céljából szivattyúhoz kapcsoljuk, amely állandó térfogatú és kb. 2 ml izotóniás-citrát oldatot szállít adott időn, általában 5 mp-en keresztül. Az öblítő folyadékot, szállított mennyiségét és sebességét úgy választjuk meg, hogy a sejteket a szivacs felületéről és pórusaiból el lehessen távolítani anélkül, hogy a sejtek megsérülnének. Öblítés után egyenlő méretű (200 pj-es) mintaadagokat veszünk a sejtes szuszpenzióból és a mintákat sejtcentrifugában 1000 fordulat/perc sebességgel 7 percig centrifugáljuk. A lemezre átvitt mintákat levegővel megszárítjuk, abszolút-etanolban rögzítjük, és a May-Grünwald-Giemsa eljárással automatikus elszínező berendezésben elszínezzük. Ezekből az elszínezett lemezekből sejt különbözet számokat képezünk és a kapott eredményt összehasonlítjuk egészségesen operált betegekből kapott referencia anyaggal. A seb hegedősét akkor tekintjük normálisnak, ha az ún.biológiai hegesedés olyan mértékben halad előre, amilyen mértékben a paciens korának megfelelő gyógyulásra szükséges kronológiai idő előrehalad. Ha a biológiai hegesedés, amelyet ebben az esetben az egyes megfigyelési pontokban a sebben a sejtek abszolút mennyiségéből és az egyes cellatípusok arányából mérünk, nem halad előre a megkívánt mértékben a kronológiai gyógyulási idő alatt, akkor a seb hegedőse késik. Ha a biológiai hegesedési folyamat gyorsabban következik be, mint a kronológiai gyógyulás, akkor a seb hegesedése gyorsabban megy végbe, mint az ugyanabba a csoportba tartozó átlagé. A seb hegesedési sebességének meghatározásához szükség van megfelelő referencia anyagra és saját adp-programra. Példa Tegyük fel, hogy az 1 kapilláris csövet 47,8 óra után távolítottuk el a sebbe való behelyezés után. A kronológiai idő, amely a gyógyuláshoz szükséges, így ugyanannyi, azaz 47,8 óra. Az 1 kapilláris cső sejt-tartalmát, amely a kapilláris cső speciális kialakítása miatt a sebben lévő sejtek relatív mennyiségének és típusának felel meg, az MGG színező szerint a szokásos differenciál számítással számítjuk. A kapott értékek a komputer-terminálról vannak betáplálva, és a CELLCO adaptációs programmal dolgozzuk fel és a referencia anyaggal hasonlítjuk össze. Mindegyik tíz sejtarány speciális gyógyulási időt mutat, egyesek pontosabban, mint a többiek. A sejtarányok előre jósolt értékeit mint átlagértékeket vettük figyelembe az adp-programban. Tegyük fel, hogy a biológiai gyógyulási idő a példaként vett betegnél 44,7 óra. A különbség a gyógyulási idők kö5 zött -3,1 óra, több mint -2SD (-2,4 órai és így ezt a különbséget jelentősnek mondhatjuk. így a példaként vett beteg sebének hegesedése lassabb, mint az átlagosé ugyanabban a csoportban. Egy szorosabb összehasonlítás a sejtarányok között az adp-program segítségével a kapukban” 99%-os megbízhatósági határral számolva sok esetben szuggesztív információt ad a késleltetés elsődleges okairól. Bizonyos esetekben ekkor a hegesedést gyorsítani lehet megfelelő post-operációs kezelésekkel. Hangsúlyozni kívánjuk, hogy a sejtminta, amelyet a sebből nyerünk a találmány szerinti kapilláris cső segítségével, az előzőeken túlmenően vizsgálható igen sokféle biomedikális módszerrel abból a célból, hogy speciális problémákat oldjunk meg a beteg gyógyulását illetően. A legáltalánosabb inplantációs idő 48 óra. Hosszabb, vagy rövidebb periódusok alkalmazhatók, ha az öblítőfolyadéksebességét változtatjuk. 24 órás mintavételi periódusnál kisebb öblítési sebességeket alkalmazunk, míg 72 órás mintavételi periódus nagyobb sebességet igényel. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Készülék vágott sebek vagy kötőszövet hegesedési képességének meghatározására, amely a sebben maradó hajlékony kapilláris csőből (1) áll, és a sebbe helyezendő csővég a sejtek megtapadására és növekedésére szolgáló szivaccsal (2) van felszerelve, azzal jellemezve, hogy a kapilláris csőnek (1) legalább a sebben maradó vége legalább egy belső horonnyal (4,6) van ellátva és a szivacs (2) nedvességre expandáló viszkóz cellulóz szivacs, amely egymással közlekedő mikro- és makropórusokat tartalmaz. 2. Az 1. igénypont szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a mikropórusok eloszlása 5-15 pun nagyságrendbe esik és a makropórusok átmérőjének átlagos eloszlása 0,4-0,9 mm nagyságrendbe esik. 3. Az 1. igénypont szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a kapilláris cső (1) belseje négy, lényegében egyenlő méretű horonyra (4,6) van osztva. 4. A 2. igénypont szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a szivacs (2) keresztmetszete négyszögletes és a kapilláris csőben (1) az egyik horonytól (4) a szemben fekvő horonyig (4) ér, míg az oldalsó hornyok (6) a szivacs expandált állapotában is szabadon maradnak. 5. Az 1 -4. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a kapilláris cső (1) oxigént áteresztő szilikon-gumiból készül. 6. Eljárás seb hegesedési képességének meghatározására, amikor kapilláris csőre szerelt, sebsejteket gyűjtő eszközt, előnyösen szivacsot helyezünk a sebbe mintavétel céljából, azzal jellemezve, hogy a mintavétel után a szivacsot (2) előre meghatározott paraméterű öblítőfolyadékkal, öblítési sebességgel és előre meghatározott mennyiségű folyadékkal öblítjük, amely paraméterek azonosak a referencia kísérletben alkalmazott paraméterekkel, majd a sejtes szuszpenziót a cellák differenciális számolása céljából kezeljük és az így kapott eredményt a referencia értékekkel összehasonlítjuk. 6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
