203243. lajstromszámú szabadalom • Eljárás cefalosporin származék előállítására
1 HU 203 243 B 2 Találmányunk tárgya eljárás (I.) általános képletű, orálisan vagy peritoneálisan alkalmazható cefalosporin-származékok, közelebbről a 7-(3-klór-izoxazol-5- ü)-acetfl-amino-3-(l-metü-lH,l,2,3,4-tetrazol-5-il) -tiometil-cef-3-em-4-karbonsav, továbbá farmakoló- 5 giaiiag hatásos sói és észterei előállítására. Az (I.) általános képletű vegyületek, ahol M jelentése: hidrogénatom, alkálifém- vagy alkáliföldfématom, vagy 1-5 szénatomszámú alkücsoport, előállítására két alapvetően eltérő eljárásváltozatot dől- 10 goztunk ki, melyek közül az a) változat a gyakorlatban előnyösen alkalmazható. Az a) eljárásváltozat szerint a (H.) képletű 3-kIórizoxazol-5-il-ecetsav kloridját, anhidridjét vagy észterét reagáltatjuk a (Hl.) általános képletű vegyülettel, 15 ahol X jelentése: hidrogénatom, alkálifém- vagy alkáliföldfématom, szerves bázissal alkotott kvartemer ammóniumion vagy általánosan ismert, lehasítható védőcsoport, majd a keletkezett (I). általános képletű vegyületet, ahol M jelentése a fentebb megadott, adott eset- 20 ben önmagában ismert módon sóvá vagy észterré alakítjuk. A b) eljárásváltozat szerint a (TV.) képletű 1-metfllH,l,2,3,4-tetrazol-5-ü-tiolt reagáltatjuk az (V.) képletű vegyülettel, ahol X jelentése a fentebb megadott, 25 majd a keletkezett I. általános képletű vegyületet, ahol M jelentése a fentebb megadott, adott esetben önmagában ismert módon sóvá vagy észterré alakítjuk. A félszintetikus béta-laktámok körében végzett kutatások során igen sok kísérletet végeztek széles anti- 30 mikrobiális spektrumú vagy speciális antimikrobiális hatásspektrumú vegyületek előállítására. Ezen molekulák között jelentős számmal vannak olyanok is, ahol a 6-amino-penicillánsav 6. szénatomjához, vagy a 7- amino-cefalosporánsav 7. szénatomjához - acetü- 35 amino-osoporton keresztül - szubsztituált vagy szubsztituálatlan izoxazol-csoportot építenek. Az üy módon előállított származékok közül több jelentős antimikrobiális hatást mutat. Ismert, hatásos és gyógyszerré fejlesztett moleku- 40 Iák többek között azok, ahol szubsztituált-izoxazol-4- ü-acetü-amino-csoportot építettek be a penicillin váz 6. pozíciójába. Ilyen molekulákat írnak le az USA-beli 2996501 lajstromszámú és a 3239507 lajstromszámú szabadalmakban, továbbá a 6432 Med. lajstrom- 45 számú francia szabadalmi leírásban. 3-amino-izoxazol-5-ü-acetil-amino-csoportot tartalmazó penicillin és cefalospirin molekulákat írnak le az USA-beli 4394504 lajstromszámú szabadalomban, amelyek az eddigieken túl izoxazolgyürűhöz vi- 50 szonyítva alfa helyzetű alkoxi-imino csoportot is tartalmaznak. A szabadalomban leírt molekulák jelentős Staphylococcus-ellenes hatást mutatnak. Az NSZK-beli 2155081 lajstromszámú közzétételi kát (3-szubsztituált-fenil)-izoxazol-5-ü-acetü-ami- 55 no-csoportot tartalmazó penicillin, és cefalosporin származékokat ír le. A megnevezett és vizsgált fenüizoxazol-származékok egyike sem mutat kiemelkedő antimikrobiális hatást a vizsgált mikroorganizmusokkal szemben, 60 A szintén NSZK-beli 2 409 949 lajstromszámú közzétételi iratban további ízoxazol-5-ü-acetü-amino származékokat írnak le. Az ebben leírt származékok esetén már elmarad az izoxazol gyűrűről a fenü-csoport, helyette új szubsztituensek jelennek meg. A bejelentésben leírt származékok egy részénél meghatározták az általános kemoterápiái és farmakológiái jellemzőket de a vizsgált molekulák között nem találtak a teszt mikroorganizmusokkal szemben kiemelkedő antibakteriális hatást mutató származékokat. Néhány származék esetében megadják a MIC értékeket, de ezek nem érik el a gyógyszerré fejlesztéshez feltétlenül megkívánt szintet. Kísérleteink során számos izoxazol-5-ü-cefalosporinszármazékot állítottunk elő. Az előállított vegyületek kemoterápiás szkrinje és a farmakológiai vizsgálatok azt a meglepő eredményt mutatták, hogy a 2409949 lajstromszámú NSZK-beli közzétételi iratban az oltalmi körbe tartozó egyik molekula az (I.) általános képletű 7-(3-klór-izoxazol-5-ü)-acetü-amino-3-(l-metü-lH,l,2,3,4-tetrazol-5-ü)-tiometü-cef-3- em-4-karbonsav, melynek előállítását, fizikai és kémiaijellemzőit a közzétételi iratban nem adták meg és a MIC értékeket sem közölték, kimagasló antibakteriális hatást mutat. [A 7-(3-klór-izoxazol-5-ü)-acetüamino-3-( 1 -metil-1 H, 1,2,3,4-tetrazol-5-il)-tiometü -cef-3-em-4-karbonsav molekula laboratóriumunkban a B-K218 kódszámot kapta, a továbbiakban ennek megfelelően jelöljük.] A B-K218 molekula antibakteriális hatásának szemléltetésére bemutatjuk a vegyület MIC értékeit a különböző mikroorganizmusokkal szemben és összehasonlítva a hasonló típusú, az orvosi gyógyászatban eddig sikerrel alkalmazott készítményekkel. Eredményeinket a következő oldalon az 1. táblázat mutatja. A felszívódási vizsgálatok során azt a nem várt, meglepő felfedezést tettük, hogy a B-K218 molekula, amely a MIC értékek alapján (II.) generációs cefalosporin-származéknak tekinthető, az ebbe a csoportba tartozó antibiotikumoktól eltérően olyan felszívódási indexet mutat, amelynek alapján a molekulát gyógyszerkészítménnyé fejleszthetjük. Az eredményt a 4. oldalon található 2. táblázat mutatja. Felszívódási index egerekben p.o. adagolásnál: Felszívódási indexs.c±D50mg/kg Akut toxicitási vizsgálatunk eredményeként azt kaptuk, hogy a B-K218 vegyület béta laktámokra jellemzően akut, egyszeri dózisban nem tekinthető toxikusnak. 2500 mg/tskg nem okozott elhullást az egerek között i.p., vagy p.o. adagolás esetén sem. LD50=2500 mg/tskg Vérszintre vonatkozó farmakokinetikai vizsgálatokat végeztünk a B-K218 vegyület felszívódására. CFLP egerekben i.p. és p.o. adagolás után. Egyidejűleg 20 egeret kezeltünk a B-K218 vegyület megfelelő töménységű vizes oldatával (i.p. 20 mg/kgts esetén 2
