203239. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az LL-F28249 vegyületek 23-oxo- és 23-imino-származékainak előállítására
1 HU 203 239 B 2 különösen alkalmasak a 0,005-2,0 tömeg% hatóanyagot tartalmazó készítmények. Az állatnak közvetlenül beadható takarmányadalékok mintegy 0,0002-0,3 tömeg% hatóanyagot tartalmaznak. Az üyen adalékanyagot olyan mennyiségben adjuk hozzá az állati takarmányhoz, hogy a végső állapotú takarmány a hatóanyagot a parazita megbetegedés kezelésére, előzésére, és/vagy ellenőrzésére szükséges mennyiségben tartalmazza. Bár a hatóanyag kívánt koncentrációja értelemszerűen a korábban említett számos tényező valamelyikétől, valamint a konkrét esetben használt hatóanyag müyenségétől függ, általában a találmány szerinti vegyületeknek a tápban való koncentrációja 0,001-0,02 tömeg% a kívánt antiparazitikus eredmények biztosítása céljából. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek úgy is alkalmazhatók, hogy az állatok bőrének felületére öntjük a vegyületeket oldat formájában. Általában üyen esetben a hatóanyagot egy alkalmas közömbös oldószerben, így például dimetü-szulfoxidban vagy propüén-glikolban oldjuk. A találmányt közelebbről a következő kiviteli példákkal kívánjuk megvilágítani. 1. példa 5-( O-terc-butil-dimetil-szilil)-LL-F28249 a Nitrogénatmoszférában 20 °C-on 500 ml metüénkloridban összekeverünk 70 g LL-F28249 a-t 82,04 g imidazoüal, majd az így kapott elegyhez 5 perc leforgása alatt hozzáadjuk 43 g terc-butü-dimetü-szüüklorid 400 ml metilén-kloriddal készült oldatát. Egy óra elteltével a reakcióelegyet vizsgálatnak vetjük alá nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel (HPLC), 50% metü-ciánt és 50% vizet használva gradiens-módszerrel 10 perc leforgása alatt Whatman Partisü CCS/Cg gyorsanalízises oszlopon 1 ml/perc átfolyási sebességgel. További 3 g terc-butü-dimetü-szilü-kloridot adagolunk, majd 3 óra elteltével termékanalízist végzünk. Az így kapott termék 92,3% menynyiségben az előáüítani kívánt vegyületet, 0,3% LLF28249 a-t és 1,16% diszüüezett anyagot tartalmaz. A reakcióelegyet metüén-kloriddal hígítjuk, majd 2 liter vízbe öntjük. A metüén-kloridos fázist elválasztjuk. A vizes fázist 2 liter metüén-kloriddal extraháljuk, majd az egyesített szerves fázisokat vízmentes nátriumszulfát fölött szárítjuk és vákuumban bepároljuk. így 116 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek szerkezetét tömegspektrometriai és mágneses magrezonancia spektroszkópiai (NMR) adatai alapján azonosítjuk. 2. példa 5-( O-terc-butil-dimetil-szilil)-23-oxo-LLF28249a Nitrogénatmoszférában 116 g 5-(0-terc-butü-dimetü-szüü)-LL-F28249 a 5 liter vízmentes metüénkloriddal készült oldatához 22 °C-on hozzáadunk 540 g nátrium-acetátot, majd 172,5 g piridíniumklór-kromátot (PCC). Egy óra elteltével további 15 g PCC-t adagolunk, hiszen az elvégzett HPLC-elemzés tanúsága szerint a reakció nem teljes. További 2 óra elteltével újabb 10 g PCC-t adagolunk, majd a reakcióelegyet összesen 5 órán át keverjük, ezt követően a reakcióelegyet 6 liter jeges vízbe öntjük, majd a metilén-kloridos fázist elválasztjuk. A vizes fázist metüénkloriddal extraháljuk, majd az egyesített szerves fázisokat vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és vákuumban bepároljuk. Az így kapott 197,8 g nyers terméket feloldjuk 2 liter dietü-éterben, majd a kapott oldatot leszűrjük. A szűrletet 1000- 1000 ml vízzel kétszer mossuk, vízmentes nátriumszulfát fölött szárítjuk és szárazra pároljuk. így 60 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelyet tömegspektrometriai és NMR erdményei alapján azonosítunk. A piridínium-klór-kromát helyett piridínium-dikromátot használunk az előzőekben ismertetett eljárás során, akkor szintén a cím szerinti vegyülethez jutunk. 3. példa 23-oxo-LL-F28249 a 1,5 liter metanolban feloldunk melegítés közben 60 g 5-(0-terc-butü-dimetü-szilü)-23-oxo-LLF28 249 a-t, majd 0 °C-ra való visszahűtés után hozzáadjuk 30 g p-toluol-szulfonsav 300 ml metanoüal készült oldatát. Az így kapott reakcióelegyet 3 órán át keverjük, majd 6 liter telített vizes nátrium-hidrogénkarbonát-oldat és 6 liter víz elegyébe öntjük. Keverés után az így kapott elegyet 4 liter etü-acetáttal extraháljuk, majd a fázisokat szétválasztjuk egymástól. A vizes fázist nátrium-kloriddal telítjük, majd 6-6 liter etü-acetáttal kétszer extraháljuk. Az első etü-acetátos fázist telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd egyesítjük a többi etü-acetátos extraktummal és vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk. Az etü-acetátot ezután vákuumban elpárologtatjuk, amikor 148.1 g mennyiségben sötét színű maradékot kapunk. Ezt a nyers terméket azután HPLC segítségével kromatografájuk 1200 g szilícium-dioxidon, eluálószerként 1 térfogat% izopropanolt tartalmazó metüénkloridot használva és a módszert ultraibolya detektorral, illetve 254 nm-es szűrővel követve. A 39-42. frakciókat összeöntjük, majd szárazra pároljuk így 12,65 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk. Elemzési eredmények a C36H50O8 képlet alapján: számított: C%=70,79, H%=8,25; talált: C%=70,33 H%=8,31. A cím szerinti vegyületet azonosítjuk továbbá tömegspektrometriai és NMR eredményei alapján. 1. és 2. referenciapéldák 23-(0-metii-oxim)-LL-F28249 a Szobahőmérsékleten 930 ml vízmentes dioxánhoz hozzáadunk 70 g 23-oxo-LL-F28249a-t, 11,8 g nátrium-acetátot, 11,8 g metoxi-amin-hidrokloridot és 2.1 ml ecetsavat. Az így kapott reakcióelegyet nitrogénatmoszférában 3 napon át keverjük Ha már HPLC 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
