203237. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetrahidrofolsav-származékok biológiailag aktív izomerjének előállítására frakcionált kristályosítással
1 HU 203 237 B 2 UV-spektrum 0,1 n HCl-ben; abszorpciós maximum 354 nm, e-23780 Lmól'1 .cm'1 (Mennyiség: 8 g) 2.3. 5-metil-(6S)-tetrahidrofolsav [5-Me-(6S')THF] előállítása A 2.2 szerint kapott [5,10-CH-(6R)THF]C1HQ.2H20 30 g-ját 25 g nátrium-bór-hidrid és 3,4 g Tris 300 ml vízzel kapott oldatában oldjuk és éjszakán át keverjük. A kapott oldatot sósavval 4-es pH- ra savanyítjuk, ekkor az 5-Me-(6S)-THF dihidrát formájában kikristályosodik. (Kitermelés: 24 g 5-Me-(6S)-THF dihidrát). A kristályokat kiszűrjük és vízzel mossuk. [a$—32,30 (c»l ,5; 0,1 n HC1) UV-spektrum 0,1 n HCl-ben; abszorpciós maximum 270 nm e-22880 Ijnól“1 .cm'1 5-Metü-(6S)-tetrahidrofolátot nyerünk 15 g [5,10- CH-(6R)-THF]C1.HC1 nátrium-ciano-bór-hidrid vizes oldatába való bevitelével. Kitermelés: 13 g. 2.4. Kalcium-5-metil-(6S)-tetrahidrofolát előállítása A 2.3 szerint kapott 5-Me-(6S)-THF.2H20 12 g mennyiségét lehetőleg kevéssé hígított nátronlúgban oldjuk, az oldatot aktívszénnel és szűrési segédanyaggal kezeljük, leszűrjük és feleslegben kalciumkloridot adunk hozzá. A képződő kalcium-5-metil(6S)-tetrahidrofolát-pentahidrát lassan kiválik. Miután 0-3°C hőmérsékleten kristályosodni hagytuk az oldatot, kiszűrjük a terméket, majd vízből átkristályosítjuk. [ot][) =+40° (a vízmentes vegyületre vonatkoztatva; cl,5; vízben) UV-spektrum 0,1 n HCl-ben: abszorpciós maximum 270 nm, e=21560 Ijnól“1 .cm"1 Ugyanazt a vegyületet kapjuk, ha az 1.1 szerint kapott [5,10-CH-(6R)-THF]ClÜQ-ot a 2.3 és 2.4 pontok szerint továbbalakítjuk. 3. példa Magnézium-5-metil-(6S)-tetrahidrofolát előállítása A 2.3 példa szerint kapott 5-Me-(6S)-THF 12 g mennyiségét fokozatosan feloldjuk a minimálisan szükséges mennyiségű 2 n nátronlúgban, majd feleslegben magnézium-kloridot adunk hozzá. Etanol hozzáadására a magnéziumsó kikristályosodik. Kihozatal 7 g. Ezen új vegyület vízben jól oldódik. [a]j) =42° (c-2; vízben) 4. példa 5,10-Metin-(6R)-tetrahidrofolsav-kloridhidroklorid előállítása 4.1. 5,10-Metin-(6RS)-tetrahidrofolsav-kloridhidroklorid frakcionált kristályosítása hangyasavból 25 g [5,10CH-(6RS)-THF]Cl.HC1.2H2O-ot 50 ml 35 °C-os hangyasavban oldunk, 0 °Cra hűtjük és a 2.2. példa szerint kapott termék nyomnyi mennyiségével beoltjuk. Néhány óra múlva a kapott [5,10-CH-(6R)THF]ClHCl-ot kiszűrjük. A (óR)-tartalom 79%. Átkristályosítással a (6R)-tartalmat 90% fölé emelhetjük. Kitermelés: 8 g [a&5=+35°(c=l; MDSO/2nHC18:2) 4.2. 5,10-Metin-(6R)-tetrahidrofolsav-kloridhidroklorid szelektív kristályosítása víz hozzáadásával 25 g [5,10-CH-(6RS)-THF }Cl.HC1.2H20-ot 50 ml 35° hőmérsékletű hangyasavban oldunk, 5 ml vizet adunk hozzá, 0°C-ra hűtjük és beoltjuk autentikus (6R)-izomerrel. Éjszaka állni hagyjuk, majd a kapott [5,10-CH(6R)-THF]Cl.HCl-ot kiszűrjük. A (6R)-tartalom 86,5%. Kitermelés: 9,5 g [a]^5-+34°(c=l; DMSO/2 n HC18:2) 4.3. 5,10-Metin-(6R)-tetrahidrofolsav-kloridhidroklorid szelektív kristályosítása vizes sósavból 10 g [5,10-CH-(6R) THF}Cl.HC1.2H2O-ot 50 °C hőmérsékleten 90 ml tömény sósavban oldunk, 10 ml vízzel hígítjuk, és rögtön beoltjuk autentikus kristálylyal. [5,10-CH-(6R)-THF]aHCl.H2O kristályosodik - ki; a (6R)-tartalom 87%. Kitermelés: 4 g. [a]p5=+340(c-1; DMSO/2nHC18:2) 5. példa Az 5,10-metin-(6RS)-tetrahidrofolsav belső sójának és erős savakkal alkotott sóinak, valamint az 5,10-metin-( 6R)-tetrahidrofolsav-bromidhidrobromidnak az előállítása 5.1. Az 5,10-metin-(6RS)-tetrahidrofoIsav belső sójának előállítása 200 g [5,10-CH-(6RS)-THF]Cl.HCl-ot 1000 ml hangyasavban oldunk, majd az így kapott oldatot 1100 ml anioncserélő gyantával (IRA-68) töltött oszlopon engedjük át. Az effluátumot csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A maradékot hangyasavban oldjuk és az oldatot több alikvotra választjuk szét. Egy alikvothoz etanolt adunk, ekkor a belső só kikristályosodik. A só feltűnően sárga színű. Vízben, szerves oldószerekben és poláros oldószerekben is (a hangyasav kivételével) nagyon kevéssé oldható. Az 5,10-CH-(6RS)-THF belső sóját úgy is megkaphatjuk, hogy a 2.1 példa szerint in situ kapott tömény 5,10-Ch-(6RS)-THF-oldatot egy egyszerűbb alkohol, például etanol vagy egy keton, például metfl-propilketon hozzáadásával kristályosítjuk. 5.2. Az 5,10-metin-(6RS)-tetrahidrof olsav erős savakkal alkotott sóinak előállítása Az 5.1 szerint kapott oldat alikvot mennyiségeihez hangyasavban a kívánt sav fölös mennyiségét adjuk, 6 10 15 20 25 30 35 40 45 60 55 60 5
