203225. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kondenzált kinolin- és akridin-származékok előállítására
1 HU 203 225 B 2 Tenyészközeg: 10%-os borjúszénunmal kiegészített Eagles-féle minimális eszenciális közeg. Tenyésztés: 37 °C szén-dioxid-gáz inkubátor (5% szén-dioxid). A kísérlet kivitelezése: 0. nap: Kb. sejteket hígítottunk a tenyészközegben úgy, hogy a KB sejtek sűrűsége 2 x 104/ml legyen. 60 ml-es műanyag tálakban egyenként 3-3 ml sejtszuszpenziót oltottunk be. Standard adagonként két-két tálat alkalmaztunk. 1. nap: A közeghez hozzáadtuk a vizsgálandó hatóanyagokat olyan mennyiségben, hogy végső koncentrációjuk 100,30,10,3 és 1 pgW legyen. 4. nap: A sejteket tripszin segítségével lekapartuk a tálakról, és meghatároztuk a sejtek számát Corter-számlálóval. Értékelési kritérium: 5 Az amerikai egyesült államokbeli Nemzeti Rákkutató Intézet (NCI) meghatározása szerint azt a koncentrációt határoztuk meg, amelyik a kontrolihoz hasonlítva a sejtek növekedését 50%-kal (ED50) gátolta. Az a hatóanyag tekinthető hatásosnak, amellyel az 10 ED50 érték 4 pg/ml-nél kisebb hatóanyag-koncentrációval érhető el. A kapott eredményeket a következő táblázatban foglaltuk össze. 7. táblázat Rák elleni hatásvizsgálat eredménye (KB-se jtek növekedésgátló vizsgálata) A vizsgált Koncentráció Gátlás vegyület képlete (JLg/ml) (%) (1) 0,3 50 (2) (ismert) 1,15 50 (3) 0,3 50 Kontroll 0 0 2. vizsgálat Egerekbe beültetett rákos sejtek szaporodás gátlásával elérhető élettartam meghosszabítás és akut toricitás vizsgálat Az 1. vizsgálatban alkalmazott hatóanyagok gyógyászati hatását in vivo vizsgáltuk P-388 rákos sejtek- 35 kel beültetett egereken. Az így kapott eredményeket olyan eredményekkel hasonlítottuk össze, amelyeket hatóanyaggal nem kezelt egerekkel kaptunk. A kísérleti rendszer. Kísérleti állat: CDF egér (6 egér/csoport), 30 Rákos sejtek: P-388. Beültetett sejtek száma: 106 sejt/egér. Beültetés helye: i. p., Kezelés napja: 1. és 5. nap Adag: LD50 vagy maximum 400 mg/kg/nap. Értékelési kritérium: Azt a kezelést tekintettük hatásosnak, amelynél a kezelt csoport kontrollcsoporthoz viszonyított túlélése (T/C %) 120% vagy ettől több. A kontrollcsoport túlélési ideje általában 10 nap volt. A kapott eredményeket a következő táblázatban foglaljuk össze. 2. táblázat Egerekbe beültetett P-388 rákos sejtek szaporodásgátlásával elérhető élettartam-meghosszabítás vizsgálati eredmények A vizsgált Adag Élettartam vegyület képlete (mg/kg) meghosszabbodás (%) 25 111 (1) 12,5 203 6,25 300 400 130 (2) (ismert) 200 130 100 122 200 204 (3) 100 163 50 157 3
