203113. lajstromszámú szabadalom • Eljárás adriamicin és sói előállítására
3 HU 203 113 B 4 IR-spektrum v Sí (cm1): 3420 (OH, NHj), 1715 (C=0), 1615,1580(00), 1270,1265,1170(-OSO2CF3) 'H-NMR-spektrum (DMSO-d«/rMS) 8 (ppm): 1,17 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-6’), 1,68 (1H, dd, J = 11,8 Hz, 3,4 Hz, H-2’e), 1,90 (1H, széles t, J = 11,8 Hz, H-2’a), 2,09 (1H, dd, J = 13,3 Hz, 5,7 Hz, H-8a), 2,29 (1H, széles d, J = 13,3 Hz, H-8e), 2,83 (3H, d, J = 18,4 Hz, H-lOa), 3,07 (1H, d, J = 18,4 Hz, H-lOe), 3,34-3,40 (1H, m, H-3’), 3,99 (3H, s, -OCHj), 4,19 (1H, széles q, J = 6,5 Hz, H-5’), 4,94-4,99 (1H, m, H-7), 5,28-5,30 (1H, m, H-l ’), 5,25 (1H, d, J = 19,8 Hz, H-14), 5,33 (1H, d, J = 19,8 Hz, H-14), 5,58 (1H, s, -OH), 7,65-7,70 (2H, m, H-2, H-3), 7,70-7,78 (2H, széles s, - NHj), 7,92 (1H, d, J = 3,7 Hz, H-l), 13C-NMR-spektrum (DMSO-d*) 8 (ppm): 20,6 (c-6’), 32.2 (C-2’), 35,7 (C-10), 39,8 (C-8’), 50,7 (C- 3’), 60,5 (-OCHj), 68,9 (C-14), 70,2 (C-4\ C-5’), 73,4 (C-7), 83,1 (C-9), 103,2(0-1’), 114,5,114,6 C-5a, C-lla), 122,9 (C-3), 123,6 (C-l), 123,7 (C-4a), 137,6 (C-lOa), 138,4, 138,8 (C-12a, C- 6a), 138,8 (CFj, JCT = 320,4 Hz), 140,1 (C-2), 158,3 (C-ll), 159,9 (C-6), 164,7 (C-4), 190,1, 190.2 (C-5, C-12), 211,1 (C-l 3). (2) Adriamicin-hidrogén-klorid előállítása (2. reakcióvázlat) 0,200 g (0,2797 mmól) (1) lépés szerint előállított 14-(trifluor-metánszulfonil-oxi)-daunomicin-hidrogén-kloridot 20 ml vízben oldunk (pH 2,4), és az oldatot szobahőmérsékleten 25 (kán keresztül keverve lejátszatjuk a hidrolízist A reakcióelegyet 20 ml vízzel hígítjuk és kloroformmal kétszer extraháljuk. A vizes oldathoz nátrium-klorídot adunk, olyan mennyiségben, hogy kb. 5%-os vizes oldatot kapjunk, majd 4 : 1 térfogatarányban kloroformot és metanolt adunk hozzá. A vizes fázis pH-ját telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal 7,4-re állítjuk. A vizes fázist kloroform és metanol 4:1 térfogatarányú elegyével extiaháljuk, és a szerves fázist telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. Az oldószert eltávolítjuk. 0,1074 (70,7%) adriamicint kapunk, szabad formában. A szabad formában lévő adriamicint 10 ml 10 : 1 térfogatarányú kloroform-metanol elegyben oldjuk, és hozzáadunk 0,234 ml 1 n metanolos hidrogén-klorid-oldatot (f = 1,013; 1,2 ekvivalens, 0,2374 mmól). A reakcióelegyet koncentrálva csapadékot kapunk. A koncentrátumot leszűrjük. A szűrletet kloroform és metanol 10 : 1 térfogatarányú elegyével, majd kloroformmal mossuk és szárítjuk. 0,1023 g cím szerinti vegyületet kapunk, amelynek relatív tisztasága HPLC meghatározás szerint 94,1%, 14-brómdaunomicin-hidrogén-kloridból számított összhozama 63,1 %, és fizikai tulajdonságai az alábbiak: Olvadáspont: 203-205 *C (bomlás közben) [a] d = +250,8’ (c = 0,096, metanol) UV-spektrum (metanol) nm: 531,495,480 IR-spektrum v“[ (cm1): 3370 (-OH, -NHj), 1725 (C=0), 1610,1580 (C=0) NMR-spektrum (DMSO-d/TMS) 8 (ppm): 1,16 (3H, d, J = 6 Hz, H-6’), 1,67-1,99 (2H, m, H-2’), 1,99- 2,21 (2H, m, H-8), 2,80-3,00 (2H, m, H-10), 3,55-3,70 (1H, m, H-4’), 3,99 (3H, s, -OCH3), 4,08-4,17 (1H, m, H-5’), 4,60 (2H, s, H-14), 4,89 (1H, m, H-7), 5,28 (1H, m, H-l’), 5,50 (1H, s, 9-OH), 7,52-7,70 (2H, m, H-2, H-3), 7,80 (1H, d, J = 3 Hz, H-l), 7,92-8,12 (2H, m, -NHj), 13,25 (1H, széles s, Ar-OH), 14,08 (1H, s, Ar-OH). 2. példa Adriamicin-hidrogén-klorid előállítása a 14-(trifluor-metánszulfonil-oxi)-daunomicin izolálása nélkül 1,00 g (1,555 mmól) 14-bróm-daunomicin-hidrogén-klorid - amelyet a 4 360 664 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás 2. példája szerint állítunk elő - 5 ml dimetil-formamiddal készült, barna reakcióedényben lévő oldatához nitrogénatmoszférában 0,751 g (2,923 mmól) ezüst-trifluor-metánszulfonátot adunk, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán keresztül keverjük. A csapadék formájában kivált ezüstbromidot szűréssel elválasztjuk és dimetil-formamiddal mossuk. A szűrletet és a mosófolyadékokat egyesítjük. Az elegyhez 40 ml vizet adunk, és a pH-t 1 n nátrium-hidroxid-oldattal 6,0-6,5 értékre állítjuk, majd a hidrolízist 0,5 órán keresztül lejátszatjuk. A reakcióelegyet vízzel hígítjuk. A hígított elegy pH-ját 1 n sósavoldattal 3,5-re állítjuk, és kloroformmal kétszer mossuk. A vizes fázishoz metanolt adunk, és a vizes fázis pH-ját telített, vizes nálrium-hidrogén-karbonát-oldattal 8-9- re állítjuk. Az oldatot ezután kloroformmal extraháljuk. A szerves fázist telített, vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk és vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. Az oldószert koncentrálással eltávolítjuk és hozzáadunk 1,05 ml 1 n hidrogén-klorid-oldatot (metanolban, f = 1,013). Az adriam icin-hidrogén-kloridot ezután kloroformmal kicsapjuk. A csapadékot szűrjük, és a szűrletet kloroform és metanol 10:1 térfogatarányú elegyével mossuk, és szárítjuk. 0,632 g (94,7%) adriamicin-hidrogén-kloridot kapunk, a hozam 14-bróm-daunomicin-hidrogén-kloridból 70,1%. A tennék fizikai-kémiai jellemzői azonosak az 1. példa szerinti termék megfelelő adataival. 3. példa 14-Bróm-daunomicin és 14-acetojd-daunomicin lúgos hidrolízise és a 14-(trifluor-metánszulfonil-oxi)-daunomicin lúgos hidrolízise közötti különbségek (Módszer) Ismeretes, hogy az adriamicin lúgokkal szemben instabil [Arcamone F.: Topics in Antibiotic Chemistry, 2. kötet, szerkesztő Sammes P. G„ Ellis Horwood Limited (1978), 1121. oldal]. A 14-bróm-daunomicint nátrium-foszfáttal, a 14-acetoxi-daunomicint vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal hidrolizáljuk a 3 803 124 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett lúgos hidrolízises eljárás szerint Ettől függetlenül, a 14-(trifiuor-metánszulfonil-oxi)-daunomicin savas hidrolízisét vízben és 0,05 móí/1 koncentrációjú foszfát-puffeiben (pH 6,0) hajtjuk végre. A fenti eljárások során képződő hidrolizátum keletkezését vékonyréteg-kromatográfiásan követjük, és a hidrolizátumokat kiértékeljük. Reakciókörülmények (1) Lúgos hidrolízis (I-a) 14-bróm-daunomicin hidrolízise nátrium-foszfáttal 14-bróm-daunomicin-hidrogén-klorid 0,1 g 0,5 mól/1 Na3P04 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
