203109. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfinsav-származékok valamint ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
17 HU 203 109 B 18-metil-l-(metil-karbamoil)-butil]-karbamoil]-pentil]-foszfmil]-metil]-karbamoil]-3-metil-butil]-karbamoil]-l-pirrolidin-karboxilátot kapunk. Analízis: ChH^NAP (707,850) képletre számított: C% = 59,39; H% = 8,26; N% = 9,89; talált: C% = 59,30; H% = 8,26; N% = 9,67. (üi) 0,53 g benzil-(S)-2-[[(S)-l-[[[metoxi-[(RS)-4- -metil-2- [[(S)-3-metil-1 -(metil-karbamoil)-butil] -karbamoil]-pentil]-foszfinil]-metil]-karbamoil]-3-metil-butil]-karbamoil]-l-pirrolidin-karboxilátot 50 ml metanolban oldunk, amely 0,8 ml 1 mólos sósavat tartalmaz. Az oldatot 0,1 g 10%-os palládium-szén katalizátor jelenlétében 4 órán át hidrogénezzük. Az elegyet szűrjük és a szűrletet bepároljuk. A maradékot a víz eltávolítása céljából 30-30 ml toluollal háromszor bepároljuk. A kapott fehér maradékot 3 ml dimetil-formamid és 10 ml diklór-metán elegyében oldjuk. Az oldathoz 0,15 g ecetsavanhidridet és 0,2 ml g trietil-amint adunk, majd az elegyet 2 órán át keverjük. Az oldószert eltávolítjuk. A maradékot 30 ml etil-acetátban felvesszük, a trietil-amin-hidrokloridot szűréssel eltávolítjuk. A szűrletet bepároljuk. A maradékot flash-kromatografálással és 5:2 arányú etil-acetát/metanol eleggyel végzett eluálással tisztítjuk. Fehér hab alakjában 0,43 g [[[N-(l-acetil-L-prolil)-L-leucil]-amino]-metil]-[(RS)-4-metil-2-[[(S)-3-metil-1 -metil-karbamoil)-butil]-karbamoil]-pentil]-foszfinsav-metil-észtert kapunk. Analízis: CaH^NAP (615,753) képletre számított: C% = 56,57; H% = 8,84; N% = 11,37; talált: C% = 56,47; H% = 8,47; N% = 11,15. (B) Az eljárás 0,1 g [[[N-(l-acetil-L-prolil)-L-leucil]-amino]-metil]-[(RS)-4-metil-2-[[(S)-3-metil-1 -metil-karbamoil)-butil]-karbamoil]-pentil]-foszfInsav-metil-észtert a 3(B) példában leírt módon kezelünk. Csaknem fehér hab alakjában 95 mg [[[N-(l-acetil-L-prolil)-L-leucil]-amino]-metil]-[(RS)-4-metil-2-[[(S)-3-metil-l-(metil-karbamoil)-butil]-karbamoil]-pentil]-foszfinsavat kapunk. NMR: 8 (d* DMSO, 300 MHz): 8,54-7,87 (4H, m, NH), 4,4-4,02 (3H, m), 3,82-3,17 (4H, m), 2,82- 2,63 (1H, m), 2,53 (3H, m), 3,36-1,02 (18H, m), 0,95-0,75 (18H, m). MS: m/e 602 (M+H)*. 10. példa 0,11 g benzil-(S)-2-[[(S)-l-[[[metoxi-[(RS)-4-metil-2- [ [(S)-3-metil-1 -(metil-karbamoil)-butil] -karbamoil]-pentil]-foszFinil]-metil]-karbamoil]-3-metil-butil]-karbamoil]-l-pirrolidin-karboxilátot 4 ml diklór-metánban oldunk és az oldathoz 0,5 ml bróm-trimetil-szilánt adunk. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten másfél órán át keverjük, majd az oldószert eltávolítjuk. A maradékot 5 ml acetonban oldjuk, majd 1 ml vizet és 0,5 g nátrium-hidrogén-karbonálot, végül 50 mg klór-hangyasav-benzil-észtert adunk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékleten 2,5 órán át keverjük, majd bepároljuk. A maradékot 15 ml 1 mólos nátrium-hidroxid-oldatban oldjuk és a kapott oldatot 3 x 15 ml dietil-éterrel extraháljuk. A vizes oldatot 10%-os kénsavval megsavanyítjuk, nátrium-klorid-oldattal telítjük és 5 x 20 ml, 5%-os metanolt tartalmazó diklór-metánnal extraháljuk. A szerves extraktumot vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és bepároljuk. Fehér hab alakjában 0,1 g [[[N-[l-[(benziloxi)-karbonil]-L-prolil]-L-leucil]-amino]--metil]-[(RS)-4-metil-2-[[(S)-3-metil-l-(metil-karbamoil)-butil] -karbamoil] -pentil]-foszfinsavat kapunk. NMR: 8 (d« DMSO, 300 MHz): 8,53-7,86 (4H, m, NH), 7,40-7,25 (5H, m), 5,16-4,90 (2H, m), 4,41-4,02 (3H, m), 3,80-3,13 (4H, m), 2,80-2,61 (1H, m), 2,53 (3H, m), 2,26-0,99 (15H, m), 0,95-0,65 (18H, m). MS: m/e 694 (M+H)*. 11. példa (A) A kiindulási anyag előállítása (i) 1,06 g L-leucil-L-alanin-etil-észter-hidrokloridot és 1,46 g 2(RS)-[[(RS)-(metoxi)-(ftálimido-metil)-foszfinil]-metil]-4-metil-valeriánsavat [az 1(A) (iii) példa szerint állítjuk elő] 12 ml dimetil-formamidban oldunk. Az oldatot 0 *C-ra hűtjük, 1,08 g hidroxi-benzotriazolt és 0,46 g N-etil-morfolint adunk hozzá, majd az összes szilárd anyag feloldódása után 0,88 g N,N’-diciklohexil-karbodiimidet adagolunk be. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 18 órán át keverjük, majd az oldószert eltávolítjuk. A maradékot 50 ml etil-acetáttal kezeljük, majd a diciklohexil-karbamidot kiszűrjük. A szűrletet 2 x 50 ml telített nátrium-hidrogén-kaibonát-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és bepároljuk. A visszamaradó sárga gumit flash-kromatografálással tisztítjuk és etil-acetáttal eluáljuk. Fehér hab alakjában l,06g [(R vagy S)-2-[[(S)-l-[[(S)-l-(etoxikarbonil)-etil]-karbamoil]-3-metil-butil]-karbamoil]-4-metil-pentil]-(ftálimido-metil)-foszfinsav-metil-észter-hidroklorídot kapunk. Analízis: Caí^NjOsP (579,631) képletre számított: C% = 58,02; H% = 7,30; N% = 7,25; talált: C% = 58,27; H% = 7,22; N% = 7,15. (ii) az (i) bekezdés szerint előállított, négy izomerből álló keveréket szilikagélen végzett ismételt flash-kromatografálással etil-acetátos eluálással választjuk szét. A feldúsított frakciókat dietil-éter/n-hexán elegyből frakcionált kristályosításnak vetjük alá. Az oszlopról az alábbi sorrendben eluáljuk az A-, B-, C- és D-izomert A-izomer, op.: 149-150 *C; m/e 580 (M+H)+. B-izomer, op.: 164-165 °C; m/e 580 (M+H)*. C-izomer, op.: 174-176 *C; m/e 580 (M+H)*. D-izomer, op.: 93-95 'C; m/e 580 (M+H)*. (B) Az eljárás (a) 0,1 g A- és B-izomer keveréket [az (ii) bekezdés szerint állítjuk elő] a 3(B) példa szerint kezelünk. Fehér hab alakjában 95 mg [(R)- vagy (S)-2-[[(S)-l-[[(S)-l-(etoxikarbonil)-etil] -karbamoil]-3-metil-butil] -karbamoil]-4-metil-pentil]-(ftálimido-metil)-foszfinsavat kapunk. NMR: 8 (d* DMSO, 300 MHz): 8,73 (1H, d, J = 7Hz), 8,32 (1H, d, J = 8,5Hz), 7,95-7,83 (4H, m), 4,29- 4,16 (1H, m), 4,13-3,80 (5H, m), 2,92-2,74 (1H, m), 2,14-1,97 (1H, m), 1,78-1,34 (6H, m), 1,25 (3H, d, J = 7,5Hz), 1,20 (1H, m), 1,15 (3H, t, J = 7,5Hz), 0,96-0,75 (12H, m). MS: m/e 566 (M+H)*. (b) 0,1 g, az (ii) példa szerint előállított C- és D-izomer-keveréket a 3(B) példában leírt módon kezelünk. Fehér hab alakjában 95 mg [(R)- vagy (S)-2-[[(S)-l-[[(S)-l-(etoxikarbonil)-etil]-karbamoil]-3-metil-butil]-karbamoil]-4-metil-pentil]-(ftálimido-metil)-foszfinsavat kapunk. NMR: 8 (dé DMSO, 300 MHz): 8,34 (1H, d, J = 7Hz), 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
