203091. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új labdán-származékok és a vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására

5

HU 203 091 B

6

cokat elpusztítunk, a szívüket kivesszük és szobahőmérsékleten Ringer-oldatba helyezzük. A bal és a jobb kamrát egyaránt izoláljuk, majd egy szervtartón rögzítjük és a készítményt egy Ringer oldatot tartalmazó 32 *C-on tartott szervfürdőbe helyezzük. Ezután az elegyen 95% oxigént és 5% széndioxidot engedünk keresztülbuborékolni és a kamrát elektromosan ingereljük. A vizsgált vegyületet ismert koncentrációjú oldattá hígítjuk vízben és hozzáadjuk a fürdőhöz. A kamra összehúzódási erősségét 7-10 percig regisztráljuk egy Nihon Kohden 4- csatomás regisztrálón izometrikus tágulási mérő-csíkokkal. A hatást a kapott adatokból ECjo-ként fejezzük ki.

A modellen kapott eredményeket az alábbi III. és IV. táblázat mutatja a találmány szerint előállított néhány reprezentatív vegyületre vonatkozóan.

in. táblázat

(I) általános képlett! vegyületek (R6 = OH)

m*

RZ3 (képlet)

Tengeri malac kamra EC50 pg/ml

i

nh2

0,1

i

(1)

0,545

i

N[CH(CH3)J2

1,0

i

N(C2H5)2

0,03

i

(3)

0,18

i

(5)

0,1

i

(6)

1,42

i

(8)

>1,0

i

N(CH3)2

0,3

IV. táblázat

(I) általános képletű vegyületek

Tengeri malac

kamra

m'

R7 R23 (képlet)

EC» pg/ml

i

OH NH2

>10

i

OAc NH2

0,008

i

OAc N(C2H3)2

0,03

i

OAc N[CH(CH3)J2

0,14

i

OAc (2)

0,04

i

OAc (5)

0,006

i

OAc (6)

0,072

2

OAc NÍCHj^

0,058

2

OAc NH2

0,02

2

OAc (2)

0,086

Vérnyomáscsökkentő hatás vizsgálata Vérnyomás macskán

3-4 kg tömegű mindkét nemhez tartozó macskákat éterrel érzéstelenítünk és 70 mg/kg intravénásán beadagolt kloralózzal narkózisban tartunk. A vérnyomás feljegyzésére, illetve a gyógyszer adagolására kanüllel látjuk el az állatok femorális artériáját és vénájáL A femorális artéria vérnyomását Statham P 23 Db nyomásmérőn mérjük a Nihon-Kohden-féle regisztrálón jegyezzük fel fiziológiai célokra. A vizsgált vegyületet desztillált vízben feloldjuk és intravénásán adagoljuk. Meghatározzuk a vérnyomáscsökkentést és a vérnyomáscsökkentő hatás időtartamát.

A modellen kapott eredményeket néhány reprezentatív vegyületre az V. táblázat mutatja

V. táblázat

(I) általános képletű vegyületek

dózis vérnyomásvérnyomás

mg/kg csökkenés

csökkenés

(Hg mm).

időtartama

m’ R23 Re mbar

perc

1

nh2

0,1

(20)

26,7 mbar

120

1

NHBoC

0,3

(30)

40 mbar

35

1

NH[CH(CH3)J2

0,1

(25)

333 mbar

125

1

(2)

0,1

(25)

33,3 mbar

40

1

(3)

1

(60)

80 mbar

45

1

(5)

0,1

(20)

26,7 mbar

40

1

(6)

0,1

(30)

40 mbar

60

1

(8)

0,3

(35)

46,7 mbar

30

1

(1)

1

(80) 108 mbar

60

A találmány további részleteit a következő példákkal szemléltetjük:

1. példa

8.13- epoxi- la,6ß,9a-trihidroxi-7ß-(2-N-tritilglicinil-oxi)-acetoxi-labd-14-én-l 1-on

0,087 g (0,275 mmól) tritüglicint 0,5 ml dimetil-formamidban oldunk és erős keverés közben szobahőmérsékleten hozzáadjuk 0,107 g (0,25 mmól) 8,13-epoxi-7ß-(2-hidroxiacetoxi)- la,6ß,9a-trihidroxi-labd-14- -én-ll-on és 0,062 g (0,3 mmól) diciklohexil-karbodiimid 5 ml etilacetáttal készített oldatához. 15 perc múlva hozzáadunk 0,031 g (0,25 mmól) 4-dimetilamino-piridint és az elegyet 16 óra hosszat keverjük. Az elegyet leszűrjük, a szűrletet konyhasó-oldattal mossuk és nátrium-szulfát felett szárítjuk. Az oldószert eltávolítjuk és a visszamaradó olajat gyorskromatografálással 20% etilacetátot tartalmazó petroléter alkalmazásával tisztítjuk. Termelés 0,135 g (74,5%).

A fenti eljárás szerint 8,13-epoxi-6ß-(2-hidroxi-acctoxi)-la,7ß,9a-trihidroxi-labd-14-én-11-ónból kapjuk a

8.13- epoxi-6ß(2-N-tritil-gliciniloxi)acetoxi- la,7ß,9a-trihidroxi-labd-14-én-ll-ont 75%-os termeléssel.

A 7ß-acetoxi-la,9a-dihidroxi-8,13-epoxi-6ß-(2-N-tritil-glicinil-oxi)-acetoxi-labd- 14-én-11 -ont 61 %-os termeléssel kapjuk a 7ß-acetoxi-la,9a-dihidroxi-8,13- -cpoxi-6ß-(2-hidroxi-acctoxi)-labd- 14-én-11 -ónból.

2. példa

8.13- epoxi-7ß-(2-gliciniloxi)acetoxi- la,6ß,9a-trihidroxi-labd- 14-én-11 -on-monohidroklorid

0,1 g (0,138 mmól) 8,13-epoxi-la,6ß,9a-trihidroxi-7ß-(2-N-tritil-gliciniloxi)-acetoxi-labd-14-0n-ll-ont feloldunk 10 ml éterben és ehhez feleslegben hozzáadunk 0,2 ml trifluorecetsavat A tiszta oldatot 1 óra hosszat szobahőmérsékleten tartjuk, majd hozzáadjuk sósav és éter elegyét. A keletkezett fehér csapadékot leszűrjük, száraz éterrel mossuk, majd magasvákuumban szárítjuk. Termelés: 0,052 g (72,57%). Op.: 167- 172*.

A fenti eljárással kapjuk a 8,13-epoxi-6ß-(2-glicinil-5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

4