202920. lajstromszámú szabadalom • Eljárás homogén rekombináns immun interferon fragmensek és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

1

HU 202920 B

2

általános képletű aminosav-szekvenciát tartalmazó homogén rekombináns immun interferon fragmens előállítására, azzal jellemezve, hogy

a) valamely fentiekben meghatározott homogén rekombináns immun interferon fragmenst kódoló nukleotid szekvenciát valamely expressziós plazmidba, előnyösen a pDS8/RBSII,SphI plazmidba illesztünk be oly módon, hogy a fenti nukleotid szekvencia a fenti plazmid expressziós kontroll szekvenciájához móködőképesen kapcsolódjék;

b) az a) lépés szerint kapott rekombináns plazmiddal

E.coli sejteket transzformálunk;

c) a transzformált E.coli-t táptalajban tenyésztjük és ily módon a fenti rekombináns plazmid által kódolt interferon fragmenst kifejezzük; és

d) az interferon fragmenst a fermentléből kinyerjük. (Elsőbbség: 1986. 08. 13.)

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy Z helyén Ser-Gln-Met-Leu-Phe-Aig csoportot tartalmazó homogén rekombináns immun interferon fragmenst kódoló nukleotid szekvenciát tartalmazó rekombináns plazmiddal transzformáljuk az E.coli sejteket. (Elsőbbség: 1986. 08. 13.)

3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy Z helyén Ser-Gln-Met-Leu-Phe csoportot tartalmazó homogén rekombináns immun interferon fragmenst kódoló nukleotid szekvenciát tartalmazó rekombináns plazmiddal transzformáljuk az E.coli sejteket. (Elsőbbség: 1987. 08. 10.)

4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy Z helyén Ser-Gln-Met-Leu csoportot tartalmazó homogén rekombináns immun interferon fragmenst kódoló nukleotid szekvenciát tartalmazó rekombináns plazmiddal transzformáljuk az E.coli sejteket. (Elsőbbség: 1986. 08. 13.)

5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy Z helyén Ser-Gln-Met csoportot tartalmazó homogén rekombináns immun interferon fragmenst kódoló nukleotid szekvenciát tartalmazó rekombináns plazmiddal transzformáljuk az E.coli sejteket. (Elsőbbség: 1987. 08. 10.)

6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy Z helyén Ser-Gin csoportot tartalmazó homogén rekombináns immun interferon fragmenst kódoló nukleotid szekvenciát tartalmazó rekombináns plazmiddal transzformáljuk az E.coli sejteket. (Elsőbbség: 1987. 08. 10.)

7. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy Z helyén Ser csoportot tartalmazó homogén rekombináns immun interferon fragmenst kódoló nukleotid szekvenciát tartalmazó rekombináns plazmiddal transzformáljuk az E.coli sejteket. (Elsőbbség: 1986.

08. 13.)

8. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az interferon fragmenst valamely dimer, trimer vagy tetramer alakjában nyerjük ki. (Elsőbbség: 1986. 08. 13.)

9. Eljárás az 1-7. igénypontok bármelyikében meghatározott rekombináns immun interferon fragmenst kódoló nukleotid szekvenciát tartalmazó plazmid előállítására, azzal jellemezve, hogy

a) valamely fenti rekombináns immun interferon fragmenst kódoló nukleotid szekvenciát valamely expressziós plazimidba, előnyösen a pDS8/RBSII,SphI plazmidba illesztünk be oly módon, hogy a fenti nukleotid szekvencia a fenti plazmid expressziós kontroll szekvenciájához móködőképesen kapcsolódjék;

b) az a) lépés szerint kapott rekombináns plazmiddal E.coli sejteket transzformálunk;

c) a transzformált E.coli sejteket növekedésük szembontjából alkalmas táptalajban tenyésztjük; és

d) az E.coli sejtekből a rekombináns plazmidot izoláljuk. (Elsőbbség: 1986. 08. 13.)

10. Eljárás az 1-7. igénypontok bármelyikében meghatározott rekombináns immun interferon fragmens kifejezésére képes transzformált E.coli sejtek előállítására, azzal jellemezve, hogy

a) valamely fenti rekombináns immun interferon fragmenst kódoló nukleotid szekvenciát valamely expressziós plazmidba, előnyösen a pDS8/RBSII,SphI plazmidba illesztünk be oly módon, hogy a fenti nukleotid szekvencia a fenti plazmid expressziós kontroll szekvenciájához működőképesen kapcsolódjék;

b) az a) lépés szerint kapott rekombináns plazmiddal E.coli sejteket transzformálunk; és

c) a transzformált E.coli sejteket növekedésük szempontjából alkalmas táptalajban tenyésztjük. (Elsőbbsége: 1986. 08. 13.)

11. Eljárás homogén rekombináns immun interferon fragmenst tartalmazó gyógyászati készítmények előllítására, azzal jellemezve, hogy az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti eljárással előállított rekombináns immun interferon fragmenst gyógyászatiig alkalmas hordozóanyagokkal összekeverünk. (Elsőbbség: 1986. 08. 13.)

5

10

15

20

25

30

35

40

45

13